转基因产品检测技术简介

转基因产品检测技术简介

转基因产品的检测技术是贯彻实施标识管理政策的技术保障，国内外许多实验室都在积极开展转基因产品检测方法的研究。

检测方法主要分两种，一种是基于 DNA 的检测方法，一种是基于蛋白质的检测方法。

基于 DNA 的检测方法包括定性 PCR 和定量 PCR 。定性 PCR 又分为简单 PCR （即每个 PCR 反应体系中仅加入一对引物进行扩增反应）、巢式 PCR （ Nest-PCR ，一次扩增完成后再向反应体系中加入一对新的引物对扩增产物进行二次扩增）及复合 PCR （ Multiple PCR ，同一反应体系中加入多对不同引物同时对多个不同目标片段进行扩增）；定量 PCR 则分为竞争性定量 PCR （ Quantitative Competitive PCR, QC-PCR ）和实时定量 PCR （ Real-time PCR ）。

基于蛋白质的检测方法主要是 ELISA （ Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay ）；检测试纸也已开始在一些实验室使用。还有一些实验室尝试用 PCR 和 ELISA 相结合的 PCR-ELISA 法来对转基因产品进行半定量检测。

在实际检测工作中， DNA 检测法得到了广泛使用。中国主要是利用定性 PCR 检测技术对转基因产品中外源基因的 DNA 序列进行检测。

定性 PCR 检测主要针对转基因产品中的通用序列（如 35S 启动子、 Nos 终止子等）及目的基因特异 DNA 序列（如 cry1A 基因 、 epsps 基因 和 bar 基因 等）进行检测。 PCR 检测法最大的优点是灵敏度和特异性高，不论外源基因是否表达， PCR 都能检测出来，用 PCR 甚至可将一个拷贝的靶标分子扩增到可检测的浓度。但在 PCR 检测中，有时也会出现假阳性。例如自然环境中存在的病毒或细菌的 DNA 片段，往往被扩增出来，而被认为是样品中的转基因成分。因此在实际检测时，还常常针对导入片段中的边界序列，设计跨区的 PCR 引物，以避免检测过程中假阳性的出现，如在对抗农达大豆进行 PCR 检测时，针对导入片段 35S ＋ CP4 ＋ EPSPS 区域、 35S ＋ CP4 或 EPSPS ＋ NOS 区段设计引物进行检测。有时还需要对 PCR 扩增产物的真实性进行验证，验证方法包括限制性内切酶酶切、 Southern 杂交或测序等。