基质胶使用注意事项汇总

大家都知道基质胶用途广泛，无论在成瘤、成管、干细胞包被，还是类器官培养中，都需要基质胶这个得力助手。但基质胶也是有“怪脾气”的，稍有懈怠，它就凝给我们看，还死倔死倔地“不干活”嘞，所以咱们聊一聊基质胶有哪些“怪脾气”！

1、融化时间非常短，对高温过度“敏感”

有小伙伴，是把基质胶放在冰盒上融化的，冰盒是放在超净台上的，发现过了半小时基质胶凝了。是的，为啥呢？

基质胶如果不是全部插在冰里，一半暴露在空气中，其融化时间很短，通常在冰上不超过30min就完全液化了，尤其是在炎热的夏天，暴露在空气中的一半很快会因为温度过高而凝固掉，所以，基质胶最好的融化方法是在4℃冰箱过夜融化。

2、当基质胶不小心凝固后，当天是不愿意再“干活”嘞

当我们不小心让基质胶凝固了以后，采用冰水化合物降温，采用4℃静置2h，采用-20℃静置10min，都无法“换醒”基质胶，它就静静凝在那里“无动于衷”。是的，这就是基质胶的“怪脾气”，“不搭理”人了。正确做法是先放-20℃，让它进入“冬眠”2h，然后放在4℃过夜融化，等第二天它就“流动”起来了，因为它“消气”着实慢呀。

3、基质胶能反复冻融吗？用不完咋办？

基质胶反复冻融，流动性会变差，用不完可以分装到EP管冻存，为了减少反复冻融，我们推出的基质胶1.5mL 4（abs9495）支装的，每次用时，取出一支4℃过夜融化。如果一支用不完，可以放在4℃保存1个月，依然保持很好的流动性。

4、基质胶融化完或使用时发现有气泡咋办？

基质胶本身富含多种蛋白，粘滞性大，出现“吐气泡”现象的原因主要是流动性变差。如果出现气泡，使用时可以用桌面离心机2000r离1min，可有效去除小气泡。

5、培养类器官时，怎样避免基质胶很快凝固？

采用金属冰盒，效果更好，点胶前，将冰盒，枪头，离心管，EP管放-20℃预冷1h以上，也就是和基质胶接触的东西（除孔板外）都进行充分预冷，可以有效避免基质胶凝固。

6、类器官传代时，基质胶和细胞团分不开咋办？

首先咱们可以采取一些有效的措施促进两者分离：

1）加入适量（10-14mL）缓冲液，稀释基质胶类器官混合物，能促进分离；

2）将基质胶类器官混合物放于-20℃，5min，加速基质胶液化，能促进分离；或者4℃静置40min促进基质胶液化；

3）离心机的选择非常重要，水平角离心机相比固定角离心机更利于基质胶和类器官分离；

4）离心机的温度最好是4℃（可避免基质胶固化），离心转速可适当提高（最高不要超过500g），离心时间可适当加长（最常不超过10min）。

其次如果采取了上述措施，基质胶还是存在少量残留怎么办？

不要慌，如下图所示，可以看到基质胶和细胞团混在一起（基质胶里的白点为细胞团）。此时，我们可以摒弃掉上层缓冲液及基质胶的上1/3，保留下2/3基质胶细胞团混悬物，并加新胶，混合点板。

7、基质胶用途多多，不同基质胶有不同用途，如下表：