铜离子检测助力肿瘤治疗研究

背景介绍：

铜浓度检测在药物发现和环境监测中得到广泛应用。铜是人体必需的微量元素。铜蛋白酶在铁和儿茶酚胺代谢，在清除自由基，血红蛋白，弹性蛋白，胶原等方面扮演着重要角色。铜主要存在于肝脏中的铜蓝蛋白中。铜含量过低会导致智力低下、色素缺失、贫血、肌肉紧张症、骨质坏血病等疾病。

铜离子检测在肿瘤研究中的应用：

历史研究表明，铜稳态失调与多种肿瘤有关，如妇科肿瘤、结直肠癌等，而癌症患者血清铜水平的升高与癌症分级和化疗耐药性有关，如果铜的浓度超过一定的阈值，就会中毒，导致一种新细胞死亡形式，称为铜中毒，这种方式也被视为癌症治疗的潜在方法。

2023年10月20日，上海市第一人民医院黄陈教授和范广建教授团队在Nature Communications杂志上发表了题为“Lactylation of METTL16 promotes cuproptosis via m6A-modification on FDX1 mRNA in gastric cancer”的研究论文。本研究揭示了METTL16调控胃癌细胞铜死亡的分子机制，阐明乳酰化修饰及m6A修饰在胃癌进展中的重要意义，为胃癌的治疗提供新的靶标和策略。

图 运用铜离子检测试剂盒abs580140对48例胃癌患者的胃癌组织裂解物进行了铜含量检测

铜离子检测试剂盒：

另需自备的材料：酶标仪（可读取605nm处的吸光度）、蒸馏水、移液器与枪头、离心机、计时器等。

操作步骤（以组织样本为例）：

1、样本处理：称取1g组织，与1mL Assay buffer在冰上匀浆，10000g 4℃离心10min，取上清液至新离心管中，冰上保存待检测。

2、试剂准备：

标准品：用蒸馏水二倍连续稀释标准品；

图 标准品二倍连续稀释示例

Masking Reagent：使用1mL蒸馏水溶解（现配现用）；
Dye Reagent：使用1mL Dye Reagent Diluent溶解Dye Reagent，70℃加热助溶（现配现用）。

3、上样：分别将140uL不同浓度的标准品、样品加入相应孔中，另设置空白孔加入140uL蒸馏水；每孔分别加入40uL Reaction Buffer，10uL Masking Reagent以及10uL Dye Reagent，混合均匀，室温孵育15min。

4、检测与计算：使用酶标仪测量605nm处的吸光度，拟合标准曲线并计算样本浓度。

图 标曲示例

注意事项：

1）金属螯合剂（如EDTA）会干扰此分析，在样品制备中应避免使用；
2）对于未知的样品，建议多做几个稀释梯度进行预实验，确保读数在标准曲线范围内；
3）试剂盒中的Dye Reagent需要现配现用，配好的溶液无法储存，可能影响显色读数进而影响检测；如果样本需要分批检测，建议分批收样储存，待样本收齐后统一检测；
4）每次实验必须重新检测并绘制标准曲线。

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