小萤课堂之转移酶（Transferases）

转移酶是一类催化特定官能团（例如甲基或糖基）从供体分子转移到受体分子的酶。它们参与无数重要的细胞过程，包括硫羟酸酯的转移、色氨酸的代谢和丙酮酸脱氢酶 (PDH) 的调节。转移酶主要根据转移的生化基团的类型进行分类，共有10大类，包括400多种独特的酶。

常见的分类包括：

甲基转移酶和甲酰基转移酶 - 转移单碳基团甲基 (-CH3) 和甲酰基 (-CHO) 基团的酶

转酮酶和转醛醇酶 - 转移酮或醛基的酶

氧化氨基转移酶或转氨酶 - 转移含氮基团的酶

磺基转移酶 - 转移含硫基团的酶

丙氨酸氨基转移酶

丙氨酸转氨酶（ALT），也称为血清谷氨酸丙酮酸转氨酶（GPT），催化丙氨酸和谷氨酸之间α-氨基的可逆转移，是氨基酸代谢中的重要酶。ALT 主要存在于肝脏以及心脏、肌肉和肾脏中，但含量要低得多。在健康受试者中，血清 ALT 水平相对较低。然而，当细胞受损时，例如在急性和慢性肝炎、阻塞性黄疸、肝癌、心肌梗塞期间，ALT 会泄漏到血流中，导致血清 ALT 水平增加。因此，血清ALT水平的检查具有重要的临床和诊断意义。

Amlite 荧光丙氨酸氨基转移酶检测

Amlite 荧光丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（货号13802）提供了一种快速、灵敏的方法来检查各种生物样品中的 ALT 浓度。通过酶偶联反应循环产生红色荧光产物来检查产物谷氨酸。可以使用荧光酶标仪在 Ex/Em = 530-570 / 590-600 nm（佳 Ex/Em = 540 / 590 nm）读取信号。使用 Amlite 荧光丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒，在 100 µL 反应体积中检测到低至 4 mU/mL 的 ALT。该测定是稳定的，可以很容易地适应各种应用。

图1. 使用 Gemini 荧光酶标仪在 96 孔黑色板中使用 Amlite 荧光丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（货号 13802）检查ALT 剂量反应。

Part.2

Amlite 比色丙氨酸氨基转移酶检测

也可以使用 Amlite 比色丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（货号 13803）通过酶偶联反应循环产生蓝色产物来检测产物谷氨酸。可以使用吸光度酶标仪在 ~575 nm 或通过 A570 nm 与 A610 nm 的吸光度比读取信号，以提高检测灵敏度。使用 Amlite 比色丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒，可在 100 µL 反应体积中检测到低至 10 mU/mL 的 ALT。

图2. ALT 剂量反应是使用 SpectraMax 酶标仪（Molecular Devices）在 96 孔白色透明底板中使用 Amlite 比色丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（货号 13803）进行检测。

Part.3

天冬氨酸氨基转移酶

天冬氨酸转氨酶（AST），也称为血清谷氨酸草酰乙酸转氨酶（GOT），催化天冬氨酸和谷氨酸之间α-氨基的可逆转移，是氨基酸代谢中的重要酶。AST 主要存在于肝脏、心脏、肌肉、肾脏和大脑等组织中。在健康受试者中，血清 AST 水平相对较低。然而，当细胞受损时，例如在急性和慢性肝炎、阻塞性黄疸、肝癌、心肌梗塞期间，AST会泄漏到血流中，导致血清 AST 水平增加。因此，血清AST水平的检测具有重要的临床和诊断意义。

Amlite 荧光天冬氨酸氨基转移酶检测

Amlite 荧光天冬氨酸氨基转移酶 (AST) 检测试剂盒（货号 13800）提供了一种快速、灵敏的方法来检测各种生物样品中的 AST 浓度。L-谷氨酸产物是通过酶偶联反应循环产生红色荧光产物来检测的。信号可由荧光酶标仪在 Ex/Em = 530-570 / 590-600 nm（佳 Ex/Em = 540 / 590 nm）读取。使用 Amlite 荧光天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒，100 µL 反应体积中的 AST 低至 2 mU/mL。该检测是稳定的，可以很容易地适应各种应用。

图3. 使用 Gemini 荧光酶标仪在 96 孔黑色板中使用 Amlite 荧光天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒（货号 13800）检测AST 剂量反应。

Part.4

Amlite 比色天冬氨酸氨基转移酶检测

也可以使用 Amlite 比色天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒（货号 13801）通过酶偶联反应循环产生蓝色产物来检测产物谷氨酸。可以使用吸光度酶标仪在 ~575 nm 或通过 A570 nm 与 A610 nm 的吸光度比读取信号，以提高检测灵敏度。使用 Amlite 比色天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒，在 100 µL 反应体积中检测到低至 3 mU/mL 的 AST。

图4. AST 剂量反应是使用 SpectraMax 酶标仪（Molecular Devices）在 96 孔白色、透明底板中使用 Amlite 比色天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒（货号 13801)进行检测。

Part.5

HDAC 活性测定

组蛋白去乙酰化酶 (HDAC) 是一类从组蛋白上的 ε-N-乙酰赖氨酸氨基酸中去除乙酰基的酶。脱乙酰作用恢复赖氨酸的正电荷，从而增加组蛋白对 DNA 带负电荷的磷酸骨架的亲和力。该过程通常通过阻断转录因子的通路来下调 DNA 转录。正在研究 HDAC 抑制剂作为癌症的治疗方法。

Amlite 荧光 HDAC 活性测定

Amlite 荧光 HDAC 活性检测试剂盒（货号13601）为检测 HDAC 活性提供了一种快速、方便且灵敏的方法。该试剂盒使用我们的非肽 HDAC Green 底物，该底物比传统的基于肽的 HDAC 底物（如 Ac-RGK(Ac)-R110、Ac-RGK(Ac)-AMC 和 Ac-RGK(Ac)-AFC）敏感得多 . 此外，HDAC Green 底物也比其他商业肽基 HDAC 底物更耐蛋白酶水解。我们的试剂盒可用于检测细胞裂解物中的 HDAC 活性或使用细胞提取物或纯化酶筛选 HDAC 抑制剂。HDAC Green 底物的长波长发射使分析较少受到化合物和细胞成分的干扰。HDAC 活性通过 490 nm 激发和 525 nm 发射进行检测。

图5. 使用 Amplite 荧光 HDAC 活性检测试剂盒（蓝色）分别与供应商 X（红色）和供应商 Y（绿色）检测HeLa 核提取物中的 HDAC 活性， 使用 Amlite 荧光 HDAC 活性检测试剂盒检测的 HDAC 活性的信号/背景比比供应商 X 和 Y 高 10 倍以上。

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