小分子化合物常见问题解答

Q1：收到化合物后如何处理？

A1：收到化合物后若最近一段时间不使用，建议粉末状态下-20℃储存。正式实验时，可提前一天按照说明书的要求选择合适的溶剂配制储存液（不稳定的化合物需现配现用），并于-20℃分装保存，避免反复冻融造成的药物使用效果不佳。

Q2：按照产品说明书的要求操作，化合物没有完全溶解应该如何处理？

A2：一般情况下，按照说明书推荐的溶解方式是可以溶解的，个别比较特殊的化合物不溶可以采取以下助溶措施：
1）水浴加热45℃以下，20-30min；
2）超声处理，15min左右。

Q3：DMSO含量多少对细胞/动物没有损伤？

A3：一般情况下，细胞（体外）实验要求DMSO的终浓度不超过0.1%；动物（体内）实验中，若是正常鼠，DMSO的终浓度最好不超过10%，若是裸鼠或体弱鼠，DMSO的终浓度建议不超过2%。建议在实验中设置溶剂对照，排除DMSO对实验造成的影响。

Q4：化合物摩尔浓度如何计算？

A4：爱必信官网→技术资源→产品资讯，参考软文《细胞培养小分子药物配制方法解析》

爱必信官网→技术资源→常用工具→摩尔浓度计算器

浓度计算工具链接：https://www.absin.cn/molarCalculator.html?sourceType=other

Q5：动物/细胞实验化合物如何稀释？用什么溶剂稀释？

A5：一般情况下，化合物先溶于某一溶剂（如DMSO）配成储存液，再用另一种溶剂（如PBS）进行稀释，不能将2种溶剂混合再去溶解。细胞（体外）实验可选择培养基、生物缓冲液等进行稀释；动物（体内）实验溶解方式以下方案仅供参考（现配现用，当天使用）：

1）依序添加每种溶剂: 10% DMSO→90%（20% SBE-β-CD in saline）

2）依序添加每种溶剂:10% DMSO→ 90% Corn Oil（建议实验周期半个月以内）

3）依序添加每种溶剂: 10% DMSO →40% PEG300→5% Tween 80 →45% saline

备注：以1mL工作液为例，取100μL澄清DMSO溶解的储存液加到400μL PEG300中，混合均匀；再向上述体系中加入50μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入450μL生理盐水定容至1mL。

生理盐水的配制：将 0.9g氯化钠，溶解于ddH₂O并定容至100mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。

Q6：化合物保存条件是什么，能保存多久？

A6：一般情况下，粉末在-20℃储存一年有效；溶解后分装保存，避免反复冻融，-20℃储存6个月有效，2-4℃保存两周有效。对于不稳定的化合物，需现配现用。

Q7：说明书没有提到我购买的化合物是否无菌，需要做灭菌处理吗？如何灭菌？

A7：爱必信小分子化合物都没有做无菌处理，使用时需要除菌。若储存液用DMSO溶解，因DMSO具有很强的杀菌能力，可认为配制好的溶液即为无菌溶液。对于用其它溶剂（如水）溶解的化合物可用0.22μm滤膜进行过滤除菌。避免使用紫外灭菌和高压蒸汽灭菌，可能会破坏化合物的结构，影响其生物活性。

Q8：为什么参考文献或之前的实验浓度，对我的细胞没有效果了？是化合物有问题吗?

A8：小分子药物的使用浓度受细胞种类，传代次数、细胞通透性，孵育时间等多种因素的影响。不同实验作用效果不同、文献只能作参考，不能作为标准。除参考文献外，还需要做浓度梯度曲线确定最佳作用浓度。若之前用过这个化合物，已经摸索最佳浓度，可以排查是不是由于化合物批次不同或保存不当超过有效期引起的差异。

Q9：配制的澄清储存液，使用时从冰箱取出发现有沉淀，这个该怎么处理？

A9：如果储存液的浓度接近化合物溶解度，冻融会产生沉淀。这种沉淀是暂时的，当溶液的温度恢复到室温时会溶解。如果沉淀溶解缓慢，可以适当水浴加热或超声处理。

Q10：是否可以使用小分子化合物作为分析标准品或者对照品？

A10：货号以abs8开头的小分子化合物适用于细胞/动物实验，不用作分析标准品或者对照品。标注有标准品和货号以abs4开头的植物提取物，可作为标准品使用。

本期小爱推荐小分子激动剂/抑制剂：