当免疫检查点PD-1 遇上“魔剪CRISPR”| MedChemExpress

CRISPR作为一项革命性的基因编辑技术，一直备受关注，在多个领域都得到了广泛的应用。近期，Nature杂志发表了一项最新研究成果，即借助了这一“魔剪”找到了能够让癌症免疫疗法更有效的新靶点。

研究动态

研究人员首先改造了黑色素瘤皮肤癌细胞，使它们都携带Cas9蛋白；之后再通过病毒导入sgRNA的方式，对每一个癌细胞进行修饰，共敲除了2,368个不同的基因。随后将这些肿瘤细胞注射到小鼠体内，利用PD-1抑制剂治疗这些小鼠，统计死亡的肿瘤细胞是敲除了哪种基因的样本，以此寻求进一步强化PD-1疗法的“搭档基因”。

图1. 实验示意图（图片来源《Nature》）

经过分析，研究者不仅证实了已知的两种免疫逃避基因（PD-L1和CD47）的作用，还发现了新的靶点：Ptpn2。实验发现，将这一基因敲除可以增加了癌细胞的抗原表达，大大提升了癌细胞对 IFNγ 敏感性，使其遭受免疫攻击时更容易被识别。

图2. Ptpn2对IFNγ表达的影响（图片来源《Nature》）

CRISPR使得癌症免疫治疗具备了在基因层面进行大规模筛选的技术基础，从一次筛选几千个基因到最终能够筛选整个基因组，从筛选黑色素瘤到筛选结肠癌、肺癌和肾癌等，更多新的潜在药物靶点即将出现。与此同时，针对这一技术本身的改进也在不断获得突破，在一项新的研究中，来自美国加州大学的研究人员证实，在Cas9成功地对靶基因进行编辑之后，添加一种抗CRISPR蛋白将会阻止基因组中的其他位点遭受不必要的损伤，大大降低了脱靶效应。在可以预见的将来，日趋完善的CRISPR技术必然会成为免疫治疗的最大助力，彻底攻克癌症或许指日可待！

参考文献：

[1] Robert t. Manguso, et al. In vivo CRISPR screening identifies Ptpn2 as a cancer immunotherapy target.Nature. 2017 July 19.

[2] Jiyung Shin, Fuguo Jiang, Jun-Jie Liu et al. Disabling Cas9 by an anti-CRISPR DNA mimic. Science Advances, 12 Jul 2017, 3(7):e1701620, doi:10.1126/sciadv.1701620.

4-Hydroxytamoxifen

4-Hydroxytamoxifen是tamoxifen的活性代谢产物，是一种选择性的雌激素受体调节分子，在乳腺癌的治疗和化学疗法中应用广泛。

Brefeldin A
布雷菲德菌素A(Brefeldin A)是真菌代谢物，以扰乱高尔基体的结构和功能，阻断蛋白的转运。

KU-57788
KU-57788(NU7441)是DNA-PK选择性抑制剂，IC50为14 nM，对mTOR，PI3K，ATM和ATR的抑制性较弱。

Nocodazole
Nocodazole是快速可逆的微管聚合抑制剂，对Abl，Abl(E255K)和Abl(T315I)的IC50分别为0.21 μM，0.53 μM和0.64 μM。

RS-1
RS-1对RAD51有作用，能够增加RAD51结合活性，有报告称RS-1能够杀死癌细胞。

Zidovudine
Zidovudine (Azidothymidine, AZT)是核苷类似物逆转录酶抑制剂（NRTI），可作用于HIV/AIDS感染。