Jackson 辣根过氧化物酶HRP标记链霉亲和素应用方案

链霉亲和素是与亲和素具有相似性质的一种蛋白质，都具有与生物素特异结合的能力，结合常数高达10（15）M.同时，由于链霉亲和素等电点比亲和素低，且不含糖基链，故在检测中的灵敏度和特异性都高于亲和素，建立在此基础上的生物素-链霉亲和素系统的应用比生物素-亲和素系统有更大优势.

Jackson 辣根过氧化物酶HRP标记链霉亲和素（#016-030-084）可与Biotin标记的各种亲和纯化二抗或者Biotin标记的色谱级蛋白联用进行各种免疫检测.与亲和素相比，由于更容易穿透组织并且分子结构更小，链霉亲和素更稳定、更灵敏，并且背景更低.该产品可以用各种酶联免疫、免疫组化、流式分析、原位杂交以及斑点杂交等实验.

Jackson 辣根过氧化物酶HRP标记链霉亲和素应用：

辣根过氧化物酶标记Streptavidin可以用于生物素（Biotin）标记的抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测。

具体用途：

包括Western、ELISA、免疫租化或免疫细胞化学、原位杂交、Southem、Northern、EMSA等。在检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法的简历及初步应用的实验中建议检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法（BSA-ICC）并作临床初步应用。

方法：

从健康人外周血单个核细胞（PBMC）中富集CD4细胞，计入莫能霉素，用不同浓度的佛波醇酯（PMA）和钙离子载体诱导CD4细胞不同时间，比较其胞内表达白细胞介素-2（IL-2）/白细胞介素-4（IL-4）的细胞百分率，确定适诱生条件，用不同稀释度的IL-2M cAb、IL-4M cAb、不同浓度的生物素化羊抗鼠IgG（bio-SAM IgG）和辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素和素（HRP-SA）作棋盘配比实验，确认McAb、bio-SAM IgG和HRP-SA的最适浓度，根据上述结果建立了检测细胞内细胞因子的BSA-ICC法。

Jackson ImmunoResearch公司是美国著名的二抗及相关免疫产品生产厂商，其产品包括各种纯化和标记的二抗（AMCA、Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、 Cy5、长臂生物素、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶标记）、免疫球蛋白、血清等.由于其产品效价高、种类全、价格实惠，长期以来深受全球广大科研用户的喜爱，一直享有二抗金标准的赞誉.作为多家知名品牌的中国代理或区域代理，艾美捷向您推荐Jackson的各种标记的二抗产品，包括HRP及AP酶标二抗、FITC/Rhodamine /Cy系列/DyLight系列等荧光二抗等均为原装进口包装，高效敏感，能为您提供最值得信赖的抗体产品保障和售后服务.

来源：https://www.amyjet.com/products/016-030-084.shtml

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亲脂性荧光染料——细胞膜荧光探针DiR

染料DiI， DiO， DiD 和 细胞膜荧光探针DiR是一类亲脂性荧光染料家族，用于标记细胞膜和疏水性组织。这是一类环境敏感型荧光染料，当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子（例如蛋白质，虽然在水中其荧光强度很弱）结合时，其荧光强度显著增强。它们具有很高的淬灭系数，偏光依赖性和很短的激发寿命。

一旦应用于细胞中，这种染料会在细胞内质膜中逐步扩散，导致在其最佳浓度条件下，将整个细胞染色。它们不同的荧光颜色：DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光），为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI可以分别与标准的FITC和TRITC滤光器一同使用。

其中，DiO可以被633 nm He-Ne激光激发，并且具有比DiI更长的激发和发射光波长，为标记细胞和组织的那些本身就具有本底荧光的染料提供了非常卓越的替代品。细胞膜荧光探针DiR#AAT-22070在活体成像或者示踪中非常有用，因为它们所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织，并且在红外光范围内，其本底荧光水平很低。

DIR-RGD-NP对微肿瘤的染色。小肠和肠系膜的荧光光谱图像。显示的图像来自mCherry频道（红色；左栏）和DIR通道（绿色；中柱）。合并后的图像（右栏）显示了在接受DIR-RGD-NP的动物中mCherry和DIR信号（白色箭头）的最佳共定位。显示了每个输送系统的代表性动物(n = 可溶性DIR和DIR-NP为4；n = 12表示DIR-RGD-NP）。

来源：Alvero等人的卵巢癌小鼠模型检测腹腔内微转移的新方法，科学报告

DIR-RGD-NP增强的体内保留和更好的共定位。在建立肿瘤（ROI~40000）后，每隔一天给予小鼠四个剂量的可溶性DIR、DIR-NP或DIR-RGD-NP。在指定的时间点24获得活体动物的mCherry（红色）和DIR（绿色）荧光图像 第4次给药后h。显示的图像是合并图像，显示了在接受DIR-RGD-NP的动物中mCherry和DIR信号（黄色）的最佳共定位。显示了每个输送系统的代表性动物(n = 可溶性DIR和DIR-NP为4；n = 12表示DIR-RGD-NP）。

来源：Alvero等人的卵巢癌小鼠模型检测腹腔内微转移的新方法，科学报告

美国AAT Bioquest Inc。（前身是ABD Bioquest，Inc。）是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括显色、荧光和生物发光技术。AAT Bioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。作为AAT Bioquest Inc。的中国区域代理，艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测技术并应用于生化、生理代谢和细胞分析领域的产品，包括显色，荧光和发光技术等全系列解决方案。

文章来源：https://www.amyjet.com/products/AAT-22070.shtml