生物安全实验室的安全性检测验证

生物安全实验室的安全性检测验证

一、设施与设备安全测试：
 （一）环境完整性测试： 
1.烟雾测试： 
采用发烟源(如发烟管、水雾震荡器等)来造成可视化流场的效果，针对室内周围可能泄漏之位置进行目视检查，作法是在空调运转状态中， 以烟源趋近可能泄漏之周边环境，视烟雾流动的方向评估泄漏位置。应检验位置包含墙面、天花板、地板、窗框、门框、照明灯插座、灭菌锅周围、曲型地面、排气处理室、排气导管、排气HEPA过滤器、闸门、阀门、供气HEPA箱体、电线插座与气体管路连接等。 
2.实验室负压衰减测试： 
执行本测试的结果可提供定量化数据作为实验室周界的气密程度指标。在BSL-4实验室执行此测试， 应于500Pa暂压下， 于三十分钟内前后气压差值应低于50％，对BSL-3实验室为建议实施项目。程序为密封或紧闭实验室内门、阀件与bubble-tight dampers,拔除压力监测管线。之后连接压力表病运转排气风机（或真空泵）使室内外压差达500Pa后关闭抽气口闸门，于20分钟内每10秒纪录室内外压降直到压差为0 Pa。此项测试不属于年度测试内容，应于建筑物完工阶段或实验室结构修改后始执行之。 
3.风管正压衰减测试： 
执行风管正压压衰减测试的结果可提供定量化数据作为实验室排气风管泄漏的气密程度指标。BSL-4实验室执行此测试，应于1000Pa暂压下，于三十分钟内前后气压差值应低于10%，对BSL-3实验室为建议实施项目。本项测试应于建物刚完工且该风管段系统未包覆任何材质前实施之。 
（二）生物安全柜测试：依照美国卫生基金会NSF/ANSI 49-2002 标准实施现场测试，包含： 
1.    烟雾气流型态测试：
采气雾检查安全柜设计之气流型态与生物安全屏障之隔离能力，细分四项：（1)烟源应在操作台面的中心线位置由前端点移动到后端位置， 其高度为窗口开口上方10cm处，烟雾应平顺的流下，并无停滞点与回流产生；（2）烟雾应在视窗内2.5cm，视窗窗口上方15cm高度处从柜体侧端移动至另一端，烟雾不应逸散至外部；（3）烟雾源应沿着视窗口边缘，距柜体外约4.0cm处的周围移动，沿开口周围的烟雾均应被完全的吸入柜内；（4）烟雾源应距视窗内5cm，并由视窗开口一端由低点移动至操作区最高高度，该高度下移动至另一端，再往下移动，烟雾不应有翻滚或向外逸散的现象。 
2.    HEPA泄漏测试： 
采PAO微粒检查HEPA过滤器有无泄漏。由供气HEPA上游引入PAO气溶胶，使用Photometer Scanner在HEPA下游扫瞄，在下游任何位置不应超过上游浓度值的0.01％。
3.    噪音测试：
柜体运转噪音检查。在最大环境噪音57dbA之下，运转噪音值不应超过70dbA。
4.    照明测试：
操作区间照明的光度检查。背景光强度在160Lux以下时，安全柜照明度应大于背景光至少480Lux以上。 
5.下吹气流测试： 
量测操作区内下吹气流均匀性与流速。平均流速应达出厂设定值±20%（若未指定则建议值为0.35～0.53m/s）； 
6.面速度测试：
量测柜体入口气流速度是否达安全标准。A2型安全柜平均面速度需达0.50m/s以上。 
7.场地安装评估测试：
由气雾检查室内通风、风管系统等项目并进行柜体功能检查及设置的安全性评估。 
（三）HEPA过滤器泄漏测试： 
对于室内总体排气的HEPA过滤装置（非安全柜排气） 进行泄漏测试， 可获得HEPA过滤器是否破损或安装不当造成泄漏之信息。采用目前微粒产生源（PAO Particle Generator）搭配光度计（Photometer）对室内所有可施行的排气HEPA过滤器扫描或单点侦测，由气溶胶在HEPA上游产生足够浓度之微粒，预设位置应侦测得到10μg/L以上， 之后以光度计对下游预设点执行检查。对于可扫瞄的HEPA下游，应以光度计连结扫瞄探头于HEPA下游面上循序扫瞄，下游之任何一点浓度均需低于0.01％。对于无法扫描之过滤器（如安装于排气管道内），于下游预设点测试浓度应低于0.005％。
（四）空调系统性能与安全控制测试： 执行实验室空调性能检查，测试项目含实验室各室负压差量测与换气率测试；另亦针对空调控制系统之安全连锁设计验证之。包含以下测试： 
1.    于实验室空调系统正常运转状态下， 采用视觉或烟雾检查实验室气流均有向内流动趋势。 
2.    检查阻隔区（BSL-3实验室）与安全区（如准备室、走廊）之压差是否达到25Pa以上，实验室前室亦需呈现负压状态。 
3.    采空气流量计针对每一排气口、供气口检查供排气流量， 换算为室内新鲜空气换气率后，应达到每小时12次换气次数以上（Air Change Rate Hour）。 
4．检查空调系统于负压失效状况下之连锁装置，如前室两门全开、风机停止运转、停电或安全柜停机之运转模式， 是否仍有警报声并可持续预防实验室发生正压。 
（五）生物安全管理与稽核： 可制订生物安全检查表执行查核程序， 详细内容请参考“Biosafety in Micrological and Biomedical Laboratories”一书，下列出检查纲要如下： 
1.文件与记录之查核 
（1）操作规范说明文件 
（2）操作与步骤：门禁管制、工作人员实验室操作授权书、问题发现与报告、危害性生物材料处理与储存、尖锐物品处理、通风换气系统之性能监测、废弃物处理与处置、除污与清洁管理、危害性生物材料运送事宜。 
（3）安全操作手册／曝露控制计划：一般性生物安全三级屏障条件；独特实验培养、设备之条件、仪器和操作以及工作类型；与感染性生物有关之病症、传染模式和危险频率；所有工作人员熟悉曝露控制计划。 
（4）工作人员实验室操作授权书：每一工作人员有生物安全三级实验室之训练、工作经验与授权；定期更新实验室操作授权书；维修、行政管理与参访者皆要通知及授权。每一参访者皆需授权。 
（5）训练：知的权利；年度训练或实验会议中逐步进行训练课程；筹备课程及确认课程表；提供出席者记录（概要、训练者、出席者及日期）以及个人复制档案。 
（6）泄漏/暴露/紧急应变：紧急医疗；设施故障；火灾；地震、台风等；泄漏。
（7）设备与个人防护装备：实验室及屏障防护设备；适当应用及正确使用个人防护装备。 
（8）健康监测：免疫功能欠缺；有人呈现实验室感染病症；预防接种； 血清储存；抗体检测。 
（9）    责任：主要研究员（实验室主任）；全体研究人员。 
2．设备与设施验证： 决定实验室是否仍然符合操作规范；损坏迹象； 防护措施；门自动关闭/上锁——前室门可互锁、定向气流；通风换气系统警报；地板、墙壁、天花板及窗户；水槽；真空系统之防护；高压蒸气灭菌锅测试，替代品确认；虫鼠控制。 
3．实验室工作人员面谈：操作；疑难问题；记载报告中事情；紧急应变 
4．其它议题： 危害性物质；动物研究；人体研究；涉及生物安全三级防护之所有研究含先导研究；生物安全三级实验室外工作；科技人士参访；实验室空间共享事宜。 
在执行实验室安全确效时，生物安全管理与考核可查验文件并依研究者或该单位生物安全负责人之叙述列出检查表以方便阅读，并在办公室内可执行完毕。而在性能测试方面，测试人员则必须进入到BSL-3实验室内，倘若该实验室为完工阶段，未有任何病原体移入，则可依照一般测试程序执行。但若欲执行于使用中之实验室或于年度测试，则必须严格遵守实验室安全管理规则，并在可*的熏蒸消毒程序后始可装戴防护器具进入测试。但何者为可*的熏蒸消毒程序，由于熏蒸人员不一定熟悉厂务系统，或建筑师未预留妥当的熏蒸口与测试孔，而可能令部分的风管管道、独立区域，甚至HEPA无法接触熏蒸气体并接受灭菌有效性验证。所以测试人员其实是存在风险的。建议执行测试的人员应由熟悉生物安全知识，并小心慎重执行之。