葡萄球菌的SOP文件

实验方法的审批和修正(每十二个月或有任何修需主任签名)

修正内容:

日期:

主任签名:

实验方法的废止日期:

批准人签名:

1. 生化学特性葡萄球菌是革兰氏阳性球菌,大小0.5---1.5um,呈单、双四联、短链状（3—4个细胞）或无规则葡萄状排列.无动力,无芽胞.其代谢方式是呼吸兼发酵 .触酶阳性.通常氧化酶阴性,还原硝酸盐,能被溶葡萄球菌素溶菌,但不被溶菌酶溶菌.能利用多种碳水化合物,产酸.产生胞外酶,如葡萄球菌凝固酶.多数菌为兼性厌氧菌,有氧条件下生长好 ,最适生长温度35--40℃ 最适pН7.0—7.5. DNA中G+C含量:30--39 mol%. 模式菌:金黄色葡萄球菌. 常见各菌种的生化反应特性如表Ⅰ

2. 临床意义: 葡萄球菌是人类化脓性感染的最重要的病原菌.可引起局部毛囊炎、疖肿、蜂窝组织炎、肺炎、心胞炎、骨髓炎、肾盂肾炎、肾脓肿、化脓性脑膜炎、败血症、脓毒血症 、食物中毒、中毒性休克综合症（TSS ）等疾病。

3．标本：根据病种及检查目的的不同，采集不同标本 。

3．1标本种类：脓汁、渗出液、咽拭子、血液、脑脊液、痰等，如疑为食物中毒的患者,应分别采集剩余食物、呕吐物、和粪便。

3．2采取方式：按不同标本要求采集（见另外SOP）

3．3标本要求：按不同标本的要求判定是否合格（见另外SOP）。

3．4预处理：按不同标本要求进行（见另外SOP）。

4．仪器和设备：

4.1SDA型 超净工作台(770×590×600mm):北京四达净化技术研究所

4.2 CHK型光学显微镜:日本Olympus株式会社

4.3 HH.BH11型孵育箱:上海市跃进医疗器械一厂

4.4 接种器具与火焰灯: 上海求精生化仪器厂

4.5 YXQ.SG46.28Q型手提式高压灭菌锅:哈尔滨松花江医疗器械厂

4.6 GL-360型冰箱 :美国好运公司

5．试剂：

5．1种类及品号：革兰氏染色液 D014 血平板 B108 血液增菌培养基 B150 高盐甘露醇琼脂平板 B154 5%Nacl琼脂 B134 氧化酶试剂 D012 氧化酶试纸 D013 新生霉素纸片 C038 兔血浆（EDTA抗凝）自制 OF试验培养基 A088 3%H2O2溶液 E062 杆菌肽纸片(0.04u/片) C037 呋喃唑酮纸片（100µg/片） C082 其它各种生化反应用培养基及配套试剂（具体种类见前面列表）。以上试剂均為天和微生物試剂有限公司。

5．2保存：试剂应严格按有关要求登记、保存。

5．2．1培养基类：应在2--8℃冰箱保存。

5．2．2药敏纸片类：应在-20℃冰箱保存。

5．2．3生化反应配套试剂及氧化酶试剂：应在2--8℃冰箱保存。

5 .2 .4 革兰氏染色液:20--25℃条件保存。

6．检验流程：

7．检验方法：

7．1分离培养：应根据不同标本分别采用不同的分离培养方法，脓汁、脑脊的离心可直接分离培养，血液标本必须真菌后再进行分离培养、粪便、呕吐物及剩余食物等应使用选择性较高的高盐甘露醇琼脂平板进行分离培养.培养温度35℃、时间24—48小时，需氧条件。

7．2涂片染色：脓汁、脑脊的离心沉淀物可直接涂片、染色。其它标本在分离培养后，选取可疑菌落进行涂片、染色。

7．3各种试验方法（见另外SOP）。 7

．4结果判定：镜检为革兰氏阳性球菌、在血平板上形成圆形凸起1-2mm溶血菌落，在高盐甘露醇琼脂平板上生长良好，然后进行属间鉴别和种间鉴别。

7．4．1属间鉴别：应于其它革兰氏阳性球菌鉴别，试验项目与判定标准见表2： 表2葡萄球菌属于其它革兰阳性球菌的鉴别
 

7．5结果报告：应按有关原则(参见另外SOP文件)准确报告,细菌结果应报告至种的水平。

8.特殊情况的处理:

8．1在晚间、周末及假日无值班人员或其它不能马上接种标本的时候，应按有关原则(参见另 SOP文件)将标本进行妥善保存。

8．2如果遇到停电等暂时不能进行检验的情况时，应委托给**医院检验科代为检验。

参考文献： 1． 叶应妩、王毓三 主编 ， 全国临床检验操作规程（第2版） ，东南大学出版社，1997。

2． 李仲兴、郑家齐、李家宏主编，诊断细菌学，黄河文化出版社，1992。

3． 蔡文城编著，实用临床微生物诊断学，东南大学出版社，1998。