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细胞外基质筛选阵列 Ultra-36--简单、不到24小时内确定

武汉艾美捷科技有限公司2024年4月7日 15:41 点击:30

细胞外基质筛选阵列 Ultra-36--简单不到24小时内确定

 

细胞外基质筛选阵列 Ultra-36是一种细胞外基质筛选阵列,包含一个显微镜载玻片,其表面涂覆有一种专有的水凝胶。三十六种(36)细胞外基质(ECM)条件被沉积在水凝胶表面,形成印刷的阵列斑点——所有ECM条件均来源于人类。

 

每个斑点直径为400微米,并且每个斑点以9次重复印刷(见图1)。ECM被限制在每个斑点内,不会与邻近的斑点发生交叉扩散,因此每个斑点代表一个独立的“井”或实验。哺乳动物细胞在体内存在于独特的微环境中,这些微环境影响它们的行为(如增殖、分化、死亡等)和功能。


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1 ECM Select®阵列幻灯片设计。每个方块包含一个独特的ECM条件,有9个复制点。

 

当细胞在体外培养时,为了生理学上相关的生长,需要重现这样的微环境。在影响体内细胞行为的众多因素中,ECM在决定细胞功能方面起着重要作用。目前,寻找最适合细胞培养的ECM是一个需要大量细胞以及显著的时间和成本投入的试错过程。

 

细胞外基质筛选阵列 Ultra-36允许在短时间并行筛选36ECMECM组合,只需少量细胞。感兴趣的细胞被播种在附带的4室培养板中的载玻片上,并在孵化器中培养一段时间。细胞形态、附着和生长可以使用明场显微镜进行观察。

 

通过使用特定的荧光基础标记物对载玻片上的细胞进行染色,可以监测特定的细胞行为。荧光信号可以使用荧光显微镜成像系统进行检测。

 

艾美捷细胞外基质筛选阵列 Ultra-36ABM-5170-1EA的优势:

与在多孔板组织培养中进行相同实验相比,Advanced BioMatrix细胞外基质筛选阵列 Ultra-36的使用更为简单。细胞播种、固定、洗涤和处理步骤都在单一的溶液交换中完成,消除了多孔板溶液处理的需要。从开始到结束,对于大多数细胞类型,最适合培养细胞的ECM可以在不到24小时内确定。

 

本产品仅限于研究和开发用途,不适用于人体或其他用途。有关危害和安全操作的信息,请参考材料安全数据表。

 

细胞外基质筛选阵列 Ultra-36存储、保质期和稳定性

保质期在-10-30°C下存储时至少为12个月。保质期测试正在进行中。不推荐重复冻融,但有限的冻融似乎对产品没有负面影响。不建议在更冷的温度下存储。

根据我们的稳定性研究,当在28°C下存储时,ECM Select® Ultra Array Kit的表现足够好,可保持3-4天。然而,在28°C下存放2周后,一些细胞外基质条件在其细胞附着能力上会有所降低。在28°C下存放1个月后,阵列载玻片上几乎所有的ECM条件都会失去其细胞附着能力。

 

细胞外基质筛选阵列 Ultra-36应用

已经成功应用于多种细胞系,如MCF-7CHOHUVEC、成纤维细胞、MG-63Jurkat细胞,以及使用此方案的原代细胞,例如小鼠心脏祖细胞、大鼠新生心肌细胞和人类少突胶质细胞前体细胞。

 

参考细胞外基质产品

ECM Component "Advanced BioMatrix

Catalog Number"

Collagen,Human,Type l 5007

Collagen,Human,Type I 5021

Collagen,Human,Type IV 5022

Collagen,Human,Type V Not Available (1)

Laminin,Human Not Available

Fibronectin,Human 5050

Vitronectin,Human 5051

Tropoelastin,Human,Recombinant 5052

 

细胞外基质筛选阵列 Ultra-36文献参考:

Brafman D., Shah KD, Fellner T, Chien S, Willert K. (2009) Defining Long-TermMaintenance Conditions of Human Embryonic Stem Cells With Arrayed CellularMicroenvironment Technology.Stem Cells Dev., 18(8): 1141-1154.

 

Brafman, D, de Minicis S, Seki E, Shah KD, Teng D, Brenner D, Willert K, ChienS. (2009) Investigating the role of the extracellular environment in modulatinghepatic stellate cell biology with arrayed combinatorial microenvironments.Integr. Biol., 1(8): 513 524

 

https://www.amyjet.com/products/ABM-5170-1EA.shtml

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Synomag磁性纳米粒子适用场景和特点说明

 

Synomag磁性纳米粒子具有优异的示踪性能,可用于磁性粒子成像和热疗应用,亦被广泛应用于分离提取产品开发。(Synomag 是由德国Micromod GmbH公司的一种纳米颗粒产品的商标。)

 

Synomag主要分为如下3个系列:


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*具有PEG-OMe25 kDa)表面,可延长在血液中的循环时间

 

艾美捷Synomag磁性纳米粒子详情产品列表如下:

货号 产品名称 表面修饰 直径 浓度 体积

103-02-301 synomag COOH 30 nm 10 mg/ml 5 ml

103-02-501 synomag COOH 50 nm 10 mg/ml 5 ml

104-00-501 synomag-D plain 50 nm 20 mg/ml 5 ml

104-00-701 synomag-D plain 70 nm 20 mg/ml 5 ml

104-01-501 synomag-D NH2 50 nm 10 mg/ml 5 ml

104-01-701 synomag-D NH2 70 nm 10 mg/ml 5 ml

104-02-501 synomag-D COOH 50 nm 10 mg/ml 5 ml

104-02-701 synomag-D COOH 70 nm 10 mg/ml 5 ml

104-124-501 synomag-D PEG 25.000-OMe 50 nm 10 mg/ml 5 ml

104-124-701 synomag-D PEG 25.000-OMe 70 nm 10 mg/ml 5 ml

104-19-501 synomag-D streptavidin 50 nm 5 mg/ml 2 ml

104-19-701 synomag-D streptavidin 70 nm 5 mg/ml 2 ml

104-26-501 synomag-D biotin 50 nm 10 mg/ml 2 ml

104-26-701 synomag-D biotin 70 nm 10 mg/ml 2 ml

104-55-501 synomag-D PEG-NH2 50 nm 10 mg/ml 5 ml

104-55-701 synomag-D PEG-NH2 70 nm 10 mg/ml 5 ml

104-56-501 synomag-D PEG-COOH 50 nm 10 mg/ml 5 ml

104-56-701 synomag-D PEG-COOH 70 nm 10 mg/ml 5 ml

105-00-102 synomag-S plain 100 nm 25 mg/ml 10 ml

105-01-102 synomag-S NH2 100 nm 10 mg/ml 5 ml

105-02-102 synomag-S COOH 100 nm 10 mg/ml 5 ml

105-124-102 synomag-S PEG 25.000-OMe 100 nm 10 mg/ml 5 ml

105-19-102 synomag-S streptavidin 100 nm 5 mg/ml 2 ml

105-26-102 synomag-S biotin 100 nm 10 mg/ml 2 ml

105-55-102 synomag-S PEG-NH2 100 nm 10 mg/ml 5 ml

105-56-102 synomag-S PEG-COOH 100 nm 10 mg/ml 5 ml

 

Synomag磁性纳米粒子系列:

适用场景: 磁性粒子成像(MRI)和磁共振治疗(MRT),热疗,生物传感器和芯片设计,细胞分离和追踪。

特点: 可用COOH-synomag),葡聚糖-synomag-D)或淀粉包覆(synomag-S),尺寸范围为30 nm100 nm

 

https://www.amyjet.com/brand/synomag-D.shtml

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Biotin-dC-puromycin,生物素-嘌呤霉素专为蛋白研究的创新设计

 

Biotin-dC-puromycin,生物素-嘌呤霉素,是一款专为蛋白研究设计的创新试剂,集生物素标记与puromycin翻译抑制特性于一体,为科学家们提供了前所未有的研究精度与控制力。

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Biotin-dC-puromycin 结构式

 

艾美捷Biotin-dC-puromycin,生物素-嘌呤霉素NU-925-BIO-S):

运输:通过凝胶包运输。

存储条件:在-20°C下保存。

短期暴露(累计最多1周)于环境温度下是可能的。

保质期:自交货日期起12个月。

分子式:C47H69N13O16P2S(自由酸)。

分子量:1166.14 g/mol(自由酸)。

精确质量:1165.42 g/mol(自由酸)。

CAS号:436083-86-2

纯度:95%(高效液相色谱法,HPLC)。

形态:水溶液。

颜色:无色至微黄色。

浓度:0.10 mM - 0.11 mM

pH值:7.5 ± 0.5

光谱性质:zui大吸收波长λmax 260 nm,摩尔吸光系数ε 19.0 L mmol^-1 cm^-1Tris-HCl pH 7.5)。

 

Biotin-dC-puromycin,生物素-嘌呤霉素参考文献:

Yoshikawa et al. (2018) Efficient analysis of mammalian polysomes in cells and tissues using Ribo Mega-SEC. Elife doi: 10.7554.

Starck et al. (2002) Puromycin oligonucleotides reveal steric restrictions for ribosome entry and multiple modes of translation inhibition. RNA 8 (7):890.

Starck et al. (2004) A general approach to detect protein expression in vivo using fluorescent puromycin conjugates. Chem. Biol. 11 (7):999.

Kawahashi et al. (2007) High-throughput fluorescence labelling of full-length cDNA products based on a reconstituted translation system. J. Biochem. 141 (1):19.

 

Biotin-dC-puromycin,生物素-嘌呤霉素相关产品:

AB-102, Nourseothricin - Powder

NU-1121, 6-Thio-GMP

CLK-A105P4, DBCO-PEG4-Biotin Conjugate

PCR-603, T7 RNA Polymerase

NU-931, O-Propargyl-puromycin, Acetate salt

AC-155, Immobilized γ-Aminophenyl-m7GTP (C10-spacer)

CLK-1010, THPTA

CLK-1167, Picolyl-Azide-PEG4-Biotin

CLK-067, BTTAA

CLK-1276, AF488-Picolyl-Azide

 

https://www.amyjet.com/products/NU-925-BIO-S.shtml

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Biotin-11-dUTP生物素化核苷酸高效的标记效率

 

生物素-11-dUTP在酶的作用下被嵌入到DNA/ cDNA中,作为其天然对应物dTTP的替代品。由此产生的生物素标记的DNA/cDNA探针随后使用与辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)、荧光染料或琼脂糖/磁珠结合的链霉亲和素进行检测。通过在尿嘧啶的C5位置附加一个11个原子的连接臂,确保了合适的底物特性以及高效的标记效率和对生物素部分的有效检测。推荐在PCR和缺口翻译中使用的生物素-11-dUTP/dTTP比例为:50%生物素-11-dUTP / 50% dTTP

请注意:生物素-11-dUTP的最终浓度可能会根据应用和检测条件而有所不同。为了获得合适的产品质量和高结合率,建议对生物素-11-dUTP/dTTP比例进行个别优化。

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Biotin-11-dUTP、生物素化核苷酸结构式

 

艾美捷Biotin-11-dUTP生物素化核苷酸NU-803-BIOX-S):

运输:通过凝胶包进行运输。

存储条件:应在-20°C的环境下保存。

短期(累积不超过1周)暴露于环境温度下是允许的。

保质期:自交货之日起12个月。

分子式:C28H45N6O17P3S(自由酸形式)。

分子量:862.67/摩尔(自由酸形式)。

精确质量:862.18/摩尔(自由酸形式)。

纯度:高于或等于95%(通过高效液相色谱法测定)。

形态:在10 mM Tris-HCl溶液中的过滤溶液,分子量截留30 kDa

颜色:无色至淡黄色。

浓度:1.0 mM1.1 mM

pH值:7.5,误差范围±0.5

光谱特性:zui大吸收波长λmax240/289纳米,摩尔吸光系数ε为10.7/7.1 L·摩尔^-1·厘米^-1Tris-HClpH 7.5)。

 

Biotin-11-dUTP生物素化核苷酸参考文献:

[1] Day et al. (1990) Synthesis in vitro and application of biotinylated DNAprobes for human papilloma virus type 16 by utilizing the polymerase chainreaction. Biochem J 267:119.

[2] Ried et al. (1992) Simultaneous visualization of severe different DNA probesby in situ hybridization using combinatorial fluorescence and digital imagingmicroscopy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:1388.

[3] Langer et al. (1981) Enzymatic synthesis of biotin-labeled polynucleotides:novel nucleic acid affinity probes. Proc Natl Acad Sci USA 78:6633.

[4] Brigati et al. (1983) Detection of viral genomes in cultured cells and paranembedded tissue sections using biotin-labled hybridization probes. Virology126:32.

[5] Day et al. (2008) Microfluidic-based enzymatic on-chip labeling of miRNAs.N Biotechnol 25:142.

[6] Flickinger et al. (1992) Differential incorporation of biotinylated nucleotidesby terminal deoxynucleotidyl transferase. Nucleic Acids Res 20:2382.

[7] Anderson et al. (2005) Incorporation of reporter-labeled nucleotides by DNA polymerases. Biotechniques 38:257.Moritz et al. (2014) Simple methods for the 3’ biotinylation of RNA. RNA. 20(3):421.

 

Biotin-11-dUTP、生物素化核苷酸相关产品:

Biotin-16-dUTP, #NU-803-BIO16

Biotin-16-dCTP, #NU-809-BIO16

Biotin-11-dCTP, #NU-809-BIOX

Digoxigenin-11-dUTP, #NU-803-DIGX

 

https://www.amyjet.com/products/NU-803-BIOX-S.shtml

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Digoxigenin-11-dUTP地高辛/二硝基苯酚修饰的核苷酸

 

Digoxigenin-11-dUTP被酶促掺入DNA/cDNA中作为其天然对应物dTTP的替代物。随后使用与辣根过氧化物酶(HRP),碱性磷酸酶(AP)或荧光染料缀合的洋地黄毒苷抗体检测所得的洋地黄毒苷标记的DNA/cDNA探针。通过连接到尿苷C5位的a11原子接头确保了最佳的底物性质和标记效率。推荐用于PCR和切口翻译的洋地黄毒苷-11-dUTP/dTTP比率:35%洋地黄毒苷-11-dUTP/65%dTTP

请注意:洋地黄毒苷-11-dUTP的最佳终浓度可能很大程度上取决于应用和测定条件。为了获得最佳的产品收率和高掺入率,建议对洋地黄毒苷-11-dUTP/dTTP比率进行单独优化。

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Digoxigenin-11-dUTP结构式

 

艾美捷Digoxigenin-11-dUTP地高辛/二硝基苯酚NU-803-DIGXS):

运输:通过凝胶包进行运输。

存储条件:应在-20°C的环境下保存。

短期(累计最多1周)暴露于室温下是可行的。

保质期:自交货之日起12个月。

分子式:C43H65N4O21P3(自由酸形式)。

分子量:1066.91/摩尔(自由酸形式)。

精确质量:1066.34/摩尔(自由酸形式)。

纯度:高于或等于95%(通过高效液相色谱法测定)。

形态:在10 mM Tris-HCl溶液中的过滤溶液,分子量截留30 kDa

颜色:无色至淡黄色。

浓度:1.0 mM1.1 mM

pH值:7.5,误差范围±0.5

光谱特性:zui大吸收波长λmax290纳米,摩尔吸光系数ε为8.8 L·摩尔^-1·厘米^-1Tris-HClpH 7.5)。

应用:

生物素-11-dUTP可以通过以下方法嵌入到DNAcDNA中:

使用Taq聚合酶进行聚合酶链式反应(PCR)。

利用DNAI/DNA聚合酶I进行缺口翻译(Nick Translation)。

使用Klenow exo-进行引物延伸(Primer Extension)。

使用末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase,简称TdT)进行3'端标记。

使用MMLV逆转录酶进行逆转录。

 

此外,生物素-11-dUTP还可以通过以下方法嵌入到RNA中:

使用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)进行3'-端标记。

 

Digoxigenin-11-dUTP地高辛/二硝基苯酚参考文献:

[1] Anderson et al. (2005) Incorporation of reporter-labeled nucleotides by DNApolymerases. Biotechniques 38:257.

[2] Jackson et. al (1991) Detection of Shiga Toxin-Producing Shigelladysenteriae Type 1 and Escherichia coli by Using Polymerase Chain Reactionwith Incorporation of Digoxigenin-11-dUTP. J Clin Microbiol. 29 (9):1910.

[3] Dauwerse et al. (1999) Two-colour FISH detection of the inv (16) ininterphase nuclei of patients with acute myeloid leukemia. Br J Haematol106:111.

[4] Wiegant et al. (2008) Probe Labeling and Fluorescence In Situ Hybridization.Current Protocols in Cytometry: Unit 8.3.

[5] Schmitz et al. (2008) Nonradioactive labeling of oligonucleotides in vitrowith the hapten digoxigenin by tailing with terminal transferase. Anal Biochem199:222.

[6] Grimmond et al. (2001) Expression Profiling with cDNA Microarray’s: A User’sPerspective and Guide. In: DNA Microarrays: Gene Expression Applications(Jordan). Springer Verlag Berlin Heidelberg

[7] Rosemeyer et al. (1995) Nonradioactive 3’-end-labeling of RNA molecules ofdifferent lengths by terminal deoxynucleotidyltransferase Anal Biochem224:446.

 

Digoxigenin-11-dUTP地高辛/二硝基苯酚相关产品:

HighFidelity Digoxigenin PCR Labeling Kit, #APP-101-DIGX

Digoxigenin NT Labeling Kit, #PP-310-DIGX

 

https://www.amyjet.com/products/NU-803-DIGXS.shtml

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Gaussia Luciferase Protein发光强度高其它萤光素酶1000

 

Gaussia Luciferase作为报告基因有多方面的优势:

分泌型萤光素酶,可在不同时间段直接取上清检测,无须裂解细胞;

发光强度高,是其它萤光素酶的1000倍;

反应无须ATP,不受ATP影响;

稳定性高,对温度、pH值等耐受性强。

 

艾美捷Gaussia Luciferase Protein321):

化合物编号:Gaussia princeps 萤光素酶(包含用于重组的Gaussia稀释缓冲液)

生产:通过分泌系统进行重组生产,与大肠杆菌表达相比,由于优化了折叠条件,具有更高的特异性活性。

外观:白色冻干粉末。

重组:例如,使用Gaussia稀释缓冲液(每笔订单均提供)重组为1毫克/毫升的溶液。

应用:作为发光测定中阳性对照。

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SDS凝胶电泳:将1微升1毫克/毫升的GLuc溶液与2Laemmli缓冲液(含还原剂和不含还原剂)混合,煮沸后直接应用于4-20%SDS凝胶上。

注意:使用BSA-Fraction V作为纯度对照(纯度大于98.5%)。标记标准品的分子量在左侧列出。

 

Gaussia Luciferase Protein相关产品:

371   Gaussia Luciferase-Streptavidin

381   NanoKAZ Luciferase Protein

3815   NanoKAZ Luciferase Protein (PBS)

312   Renilla Mulleri Luciferase

 

Gaussia Luciferase Protein文献引用:

Gaussia luciferase is used as a reporter in conjunction with CRISPR to investigate the function of noncoding RNAs (ncRNA) : Multiplexable, locus-specific targeting of long RNAs with CRISPR-Display.  Shechner DM, Hacisuleyman E, Younger ST, Rinn JL. July 2015. PubMed

 

https://www.amyjet.com/brand/NanoLight-Prolume.shtml

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Renilla Mulleri Luciferase溶解性超强,光波长更长

 

Renilla Mulleri Luciferase (RLuc) 是一种在生物研究中广泛使用的生物发光酶,它源自海洋生物Renilla mulleri,这种小型的甲壳类动物能够在深海中发出蓝光。RLuc因其独特的发光特性,被用作生物学研究中的报告基因,尤其是在基因表达、蛋白质相互作用以及细胞信号传导等领域。

 

与传统的萤光素酶相比,Renilla Mulleri Luciferase发出的光波长更长,这使得它在生物体内的背景噪声更低,信号更容易被检测。此外,Renilla Mulleri Luciferase的发光效率较高,能够在较低的底物浓度下产生较强的信号,这对于灵敏度要求高的实验尤为重要。

 

Renilla Mulleri Luciferase的研究不仅限于其发光特性的改进,还包括对其分子特性的深入了解。通过分子对接、分子动力学模拟以及自由能计算等方法,研究者们正在探索Renilla Mulleri Luciferase的活性位点特性、配体-受体相互作用以及其催化机制。这些研究有助于揭示Renilla Mulleri Luciferase在结合步骤中的构象变化,以及活性位点几何结构如何调整以支持催化活性和红移发光。

 

艾美捷Renilla Mulleri Luciferase312):

产品名称:雷尼拉穆勒萤光素酶 95%

生产:重组蛋白 通过IPTG/卡那霉素→离子交换色谱→凝胶过滤 得到冻干粉末

存储温度:在-20℃下干燥阴暗处保存,或长期保存于-80℃。

外观:白色至浅黄色蓬松粉末

溶解性:极易溶解,迅速溶解

在生理盐水或蒸馏水中,每毫升1毫克可形成清晰至微浑的溶液。

zui大转化率:在300 mM NaCl pH 7.6-7.8(海水)中为1.4×10^10 PS/

元素分析:14.5%16.5%

SDS凝胶电泳:±95% 亮蓝染色

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https://www.amyjet.com/brand/NanoLight-Prolume.shtml

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异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体流程

 

FITC(异硫氰酸荧光素)能够与各种抗体蛋白结合,同时不失去对特定抗原的特异性识别能力。一旦结合,抗体在碱性溶液中会表现出强烈的黄绿色荧光。通过在荧光显微镜下观察或使用流式细胞仪分析,可以进行对应抗原的定性、定位或定量检测。FITC在医学、农业和兽医学等多个领域被用于快速诊断由细菌、病毒、寄生虫和其他病原体引起的疾病。

 

艾美捷异硫氰酸荧光素相关参数:

产品编号:B-CHM100

规格:100毫克

存储条件:在避光的条件下,存放于-20°C

分子式:C21H11NO5S

分子量:389.38

纯度:高于或等于95%(通过高效液相色谱法测定)

光谱特性:激发/发射波长 = 490 / 525 纳米

外观:黄色粉末

运输与储存

储存条件:在避光的条件下,存放于-20°C。稳定性:在适当的储存条件下,至少稳定12个月。

 

异硫氰酸荧光素标记抗体流程:

1. 将要进行交联的蛋白质(浓度为1 mg/mL)在4°C下对交联反应缓冲液进行三次透析,调整pH值至9.0。制备交联缓冲液:将7.56克碳酸氢钠、1.06克碳酸钠和7.36克氯化钠溶解在水中,最终体积为1升。

2. FITCDMSO中溶解,浓度为1 mg/mL。为每次交联反应新鲜制备FITC溶液,并避免光照。

3. P:F(蛋白质:FITC= 1 mg:150 μg的比例,缓慢地将FITC加入抗体溶液中。在加入FITC时轻轻搅拌溶液,以确保与抗体均匀混合。在4°C的暗处进行反应8小时。

4. 加入5 mol/L的氯化铵至最终浓度为50 mmol/L,以在4°C下停止反应2小时。

5. 将结合物对PBS溶液进行至少四次透析,直到透析液变清。

6. 交联材料的特征化:蛋白质浓度(mg/mL= [A280 - 0.31 × A495] / 1.4F/P比值:3.1 × A495 / [A280 - 0.31 × A495]。这个值应该在2.5 ~ 6.5之间。

7. FITC蛋白结合物在pH 7.4PBS中保存,添加0.1%的亚硝酸钠和1%的牛血清白蛋白(BSA),在4°C的暗处保存。

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https://www.amyjet.com/products/B-CHM100-100mg.shtml

 


(来源: 武汉艾美捷科技有限公司


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