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甘油三酯(TG)比色法检测试剂盒--助力脂质代谢研究

武汉艾美捷科技有限公司2024年1月16日 3:37 点击:183

甘油三酯(TG)比色法检测试剂盒--助力脂质代谢研究

 

甘油三酯(TriglycerideTG)是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子。甘油三酯是人体内含量最多的脂类,大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量,同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成,在脂肪组织中贮存。人血清中甘油三酯水平呈明显正偏态分布。

 

用脂蛋白酯酶(LPL)使血清中的甘油三酯(TG)水解成甘油与脂肪酸,将生成的甘油用甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)磷酸化。以磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化3-磷酸甘油(G-3-P),然后以过氧化物酶(POD),4-氨基安替比林(4-AAP)与4-氯酚(三者合称PAP)反应显色,在特定波长处监测吸光度值,可计算甘油三酯含量。

 

甘油三酯 (TG) 检测试剂盒使用方法:

样品处理:将待测样品(血清、血浆等)离心分离,收集上清液。

反应体制:将收集的上清液与甘油三酯比色法检测试剂盒中的试剂按比例混合,充分混匀。

比色反应:将混合后的试剂体系孵育于适当的温度下,一定时间后,使用分光光度计测量吸光度。

 

甘油三酯 (TG) 检测试剂盒应用领域:

甘油三酯比色法检测试剂盒广泛应用于临床实验室、医学研究和生物技术领域。其主要应用包括:

心血管疾病风险评估:甘油三酯水平与心血管疾病的发生风险密切相关,通过检测甘油三酯浓度可以评估患者的心血管健康状况。

肥胖与代谢疾病研究:甘油三酯作为能量储备物质,在肥胖和代谢疾病的研究中起到重要作用,检测甘油三酯水平有助于了解相关疾病的发生机制。

药物研发和药效评估:甘油三酯比色法检测试剂盒可以用于药物研发过程中药效的评估,特别是针对调节脂质代谢的药物。

 

艾美捷EZMeta™ 甘油三酯(TG)比色法检测试剂盒

产品编号:D-AKC2200

规格:48T / 96T

储存条件:储存在4°C下,避免光照,保存期为6个月

适用样品:血清、血浆、动植物组织、细胞、细胞上清液、细菌

 

甘油三酯 (TG) 检测试剂盒样品制备:

注意:建议使用新鲜样品。如果不能立即检测,样品可以在-80°C下储存一个月。

1. 动物组织:称取0.1克组织,加入1毫升提取缓冲液,在冰上均质。以4°C8000g离心10分钟。使用上清液进行测定,并将其放在冰上待测。

2. 植物组织:称取0.1克组织,加入1毫升提取缓冲液并研磨。在冰浴中超声处理5分钟(功率20%200瓦,超声3秒,间隔7秒,重复30次)。以4°C8000g离心10分钟。使用上清液进行测定,并将其放在冰上待测。

3. 细胞或细菌:收集5 x 10^6个细胞或细菌放入离心管中,用冷PBS洗涤细胞或细菌,离心后去除上清液;加入1毫升提取缓冲液超声破碎细胞或细菌5分钟(功率20%200瓦,超声3秒,间隔7秒,重复30次)。以4°C8000g离心10分钟。使用上清液进行测定,并将其放在冰上待测。

4. 血清、血浆、细胞上清液或其他液体样品:直接将样品加入微孔板中进行测试。

注意:如果通过蛋白质浓度计算TG含量,最好使用EZMeta™甘油三酯(TG)比色法检测试剂盒对总蛋白进行定量。

 

数据分析:

注意:我们为您提供了计算公式,包括推导过程和最终公式。这两者完全相等。建议使用粗体的简洁计算公式作为最终公式。

 

1. 液体样品中TG浓度的计算:

TGmg/dL=100×CStandard×ATest-ABlank÷AStandard-ABlank=100×ATest-ABlank÷AStandard-ABlank

 

2. 动植物组织中TG浓度的计算:

1)根据蛋白质浓度计算

TGmg/mg蛋白质)=CStandard×V×ATest-ABlank÷AStandard-ABlank÷Cpr×V=ATest-ABlank÷AStandard-ABlank÷Cpr

2)根据样品的鲜重计算

TGmg/g鲜重)=CStandard×V×ATest-ABlank÷AStandard-ABlank÷W=ATest-ABlank÷AStandard-ABlank÷W

 

3. 细胞或细菌中TG浓度的计算:

TGmg/10^4=CStandard×ATest-ABlank÷AStandard-ABlank÷500=ATest-ABlank÷AStandard-ABlank÷500

 

其中:CStandard1 mg/mL100表示1 dL等于100 mLCpr为样品的蛋白质浓度,单位为mg/mLW为样品的重量,单位为gV为加入提取缓冲液的样品制备体积,为1 mL500表示细胞或细菌的总数,为5×10^6

 

该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。

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游离胆固醇 (FC) 检测试剂盒的样品准备方法

 

游离胆固醇(Free cholesterolFC)是细胞膜的主要成分,也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸和维生素D等生理活性物质的重要原料。组织中的游离胆固醇浓度可作为衡量脂质代谢的指标。EZMeta™ 游离胆固醇(FC)比色法检测试剂盒提供了一种简便的方法,用于检测动物组织、细胞、细菌、血清和血浆等生物样品中的游离胆固醇。其原理是胆固醇氧化酶催化游离胆固醇生成Δ4-胆甾酮和H2O2,过氧化物酶催化H2O24-氨基苯酚和酚生成红色醌化合物,其吸收峰位于500 nm,颜色的深浅与游离胆固醇含量成正比。

 

艾美捷 游离胆固醇 (FC) 检测试剂盒:

货号:D-AKC2210

规格:48T / 96T

储存条件:储存在4°C下,避光,保存12个月

适用样本:血清、血浆、动物组织、细胞、细菌

 

所需材料但不提供

·能够测量500 nm吸光度的微孔板读数器或可见光分光光度计

·96孔板或微玻璃比色皿、精密移液器、一次性移液头

·冰制造机、冷藏离心机、水浴

·无水乙醇 ·匀浆机(用于组织样本)

 

试剂制备

FC工作溶液:按提供的状态直接使用。使用前平衡至37°C。储存在4°C。 标准品:按提供的状态直接使用。使用前平衡至室温。储存在4°C,避光保存。 制定标准曲线:将2 µmol/mL的标准品用无水乙醇稀释至表格中所示的10.50.250.1250.0630.031 µmoL/mL

 

游离胆固醇 (FC) 检测试剂盒样品制备

注意:建议使用新鲜样品。如果不能立即测定,样品可以在-80°C下保存一个月。 1. 动物组织:称取约0.1 g组织,加入1 mL无水乙醇。在冰上匀浆。以8,000 g离心10分钟,4°C。使用上清液进行测定,并放置在冰上进行测试。 2. 细胞或细菌:收集5×10^6个细胞或细菌到离心管中,在离心后弃去上清液;加入1 mL无水乙醇,在冰浴中超声破碎细胞或细菌5分钟(功率20%200 W,超声3秒,间隔7秒,重复30次)。以8,000 g离心10分钟,4°C。使用上清液进行测定,并放置在冰上进行测试。 3. 血清(血浆)样品:直接进行测试。 注意:如果通过蛋白质浓度计算含量,最好使用EZMeta™ 游离胆固醇(FC)比色法检测试剂盒定量总蛋白质。

 

游离胆固醇 (FC) 检测试剂盒典型数据:

21.png

 

该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途

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总胆固醇 (TC) 检测试剂盒在生物研究中的应用

 

总胆固醇(TC)包括游离胆固醇和胆固醇酯。组织中的总胆固醇是指组织中所有脂蛋白中所含的胆固醇的总和。EZMeta™总胆固醇(TC)比色法检测试剂盒提供了一种简单的方法,用于检测血清、血浆、动物组织、细胞和细菌等多种生物样品中的TC浓度。在检测过程中,酯酶催化胆固醇酯的水解,产生游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA)。然后,胆固醇氧化酶催化FC产生Δ4-胆甾酮和H2O2。进一步,H2O24-氨基苯酚和苯酚过氧化物酶可以催化生成具有特征吸收峰位于500 nm处的红色醌化合物,其颜色深浅与TC含量成正比。

 

艾美捷 总胆固醇 (TC) 检测试剂盒:

货号:D-AKC2220

规格:48T / 96T

储存条件:储存于4°C,避光,保存时间为12个月

适用样品:血清、血浆、动物组织、细胞、细菌

 

所需材料但不提供

·能够测量500 nm处吸光度的微孔板读板仪或可见光分光光度计

·96孔板或微玻璃比色皿,精密移液器,一次性移液头

·冰制冰机,冷藏离心机,水浴

·无水乙醇 ·匀浆器(用于组织样品)

 

总胆固醇 (TC) 检测试剂盒试剂准备

TC工作溶液:按照提供的使用方法直接使用。使用前将其平衡至37°C。储存在4°C

标准品:按照提供的使用方法直接使用。使用前将其平衡至室温。储存在4°C,避光。

标准曲线设置:将2 µmol/mL的标准品用无水乙醇稀释至下表所示的10.50.250.1250.0630.031 µmoL/mL

 

总胆固醇 (TC) 检测试剂盒样品准备

注意:推荐使用新鲜样品。若不能立即测定,样品可以在-80°C下储存一个月。

1. 动物组织:称取约0.1克组织,加入1 mL无水乙醇。在冰上均质化。以8,000 g的速度离心10分钟,温度为4°C。使用上清液进行测定,并将其放在冰上待测。

2. 细胞或细菌:收集5×10^6个细胞或细菌放入离心管中,在离心后弃去上清液;加入1 mL无水乙醇,在冰浴中超声处理细胞或细菌5分钟(功率20%200 W,超声3秒,间隔7秒,重复30次)。以8,000 g的速度离心10分钟,温度为4°C。使用上清液进行测定,并将其放在冰上待测。

3. 血清(血浆)样品:直接进行测试。注意:如果通过蛋白质浓度计算含量,最好使用EZMeta™总胆固醇(TC)比色测定试剂盒对总蛋白质进行定量。

 

总胆固醇 (TC) 检测试剂盒典型数据:

注意:计算公式,包括推导过程和最终公式。这两个公式完全相等。建议使用粗体的简洁计算公式作为最终公式。

1. 绘制标准曲线

以标准溶液浓度为纵坐标,ΔA标准为横坐标,绘制标准曲线。将ΔA待测值代入方程得到y值(µmoL/mL)。

2. 计算样品中的TC含量

1)根据样品的新鲜重量

TC(μmol/g= y ÷(W÷V提取)× n = y ÷ W × n

2)根据蛋白质浓度计算

TC(μmol/mg蛋白)= y ÷ Cpr × n

3)根据细胞或细菌数量计算

TC(μmol/10^4= y ÷(细胞或细菌数量÷V提取)× n = y ÷ 500 × n

4)根据液体体积计算

TC(μmol/mL= y × n

其中:W:样品重量,克;V提取:添加的无水乙醇体积,1 mLn:稀释倍数;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL500:细胞或细菌的总数,5×10^6

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该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途

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游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒样品制备方案

 

游离脂肪酸(FFA),也被称为非酯化脂肪酸,不仅是脂肪水解的产物,也是脂肪合成的底物,在血浆中与白蛋白结合循环。血清中的FFA浓度与脂质代谢、碳水化合物代谢和内分泌功能有关。由于糖尿病、严重肝功能障碍、甲状腺功能亢进等疾病,FFA的浓度会增加。EZMeta™游离脂肪酸(FFA)比色测定试剂盒为血清、血浆、动植物组织、细胞和细菌中FFA的检测提供了方便的工具。其原理是FFA与铜离子结合形成可溶于氯仿的脂肪酸铜盐。通过测定铜离子的含量,可以计算出游离脂肪酸的含量,采用铜试剂法进行测定。

 

艾美捷 游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒:

编号:D-AKC2230

规格:48T / 96T

存储:储存在4°C下,避光,有效期为12个月

适用样品:血清、血浆、动植物组织、细胞和细菌。

 

游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒提供的材料和储存条件

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所需材料(但不包括在内)

· 可以测量550 nm吸光度的微孔板阅读器或可见光分光光度计

· 培养箱、冰制机、冷藏离心机

· 96孔板或微玻璃比色皿、精密移液器、一次性移液吸头

· 均质器(用于组织样品)

· 玻璃瓶(用于制备提取缓冲液)

· N-庚烷、无水甲醇、氯仿

 

游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒试剂制备

提取缓冲液:自行准备。取一个玻璃瓶,按照氯仿:N-庚烷:无水甲醇=28:21:1的比例制备提取缓冲液。将混合物密封存储在4°C,避光条件下。铜试剂:按照提供的方式直接使用。使用前使其平衡至室温。存储在4°C,避光条件下。显色剂:按照提供的方式直接使用。使用前使其平衡至室温。存储在4°C,避光条件下。标准品:在使用前加入1 mL提取缓冲液溶解。浓度为64 mM。该溶液可以密封存储在玻璃瓶中,4°C,避光条件下。标准曲线设置:根据下表将64 mM标准品用提取缓冲液稀释。

 

游离脂肪酸 (FFA) 含量检测试剂盒样品制备

注意:建议使用新鲜样品。如果不能立即进行测定,样品可以在-80°C下储存6个月。1.动物组织:称取0.1 g组织,加入1 mL提取缓冲液,在冰上均质。以4°C8,000 rpm离心10分钟。使用上清液进行测定。2.植物组织:称取0.1 g组织,加入1 mL提取缓冲液并研磨。在冰上超声处理5分钟(功率20%200 W,超声时间3秒,间隔时间7秒,重复30次)。以4°C8,000 rpm离心10分钟。使用上清液进行测定。3.细胞或细菌:收集5×10^6个细胞或细菌放入离心管中,用冷PBS洗涤细胞或细菌,离心后弃去上清液;加入1 mL提取缓冲液,在冰上超声处理5分钟(功率20%200 W,超声时间3秒,间隔时间7秒,重复30次)。以4°C8,000 rpm离心10分钟。使用上清液进行测定。4.血清等液体样品:直接进行测试。

 

该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途

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脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒的结果分析和数据解读

 

脂肪酸合酶(FAS)是脂肪酸合成中的关键酶,催化乙酰辅酶A和马来酰辅酶A生成长链脂肪酸。FAS广泛表达于各种组织和细胞中,在哺乳动物的肝脏、肾脏、脑、肺、乳腺和脂肪组织中丰富存在。EZMeta™脂肪酸合酶(FAS)比色活性检测试剂盒提供了一种方便的工具,用于检测FAS活性。其原理是FAS催化乙酰辅酶A、马来酰辅酶ANADPH生成长链脂肪酸和NADP+NADPH340 nm处具有特征性吸收峰,而NADP+则没有。通过检测340 nm处吸光度的下降速率来计算FAS的酶活性。

 

艾美捷 脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒:

编号:D-AKC2240

规格:48T / 96T

储存:在-20°C下储存6个月

适用样品:血清、血浆、动物和植物组织、细胞、细菌

 

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒提供的材料和储存条件

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脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒所需材料(但不包括在内)

· 可测量340 nm处吸光度的微孔板读取器或紫外可见分光光度计

· 96UV板或微石英比色皿、精密移液器、一次性移液头

· 冰制造机、冷藏离心机、培养箱

· 去离子水

· 均质器(用于组织样本)

 

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒试剂准备:

提取缓冲液:按照提供的状态直接使用。在使用前一天取出,放在4°C解冻并彻底混合。使其与室温平衡。储存在-20°C。测定缓冲液:按照提供的状态直接使用。在使用前使其与室温平衡。储存在4°CNADPH:为96孔加入1.64 mL测定缓冲液,为48孔加入0.82 mL测定缓冲液,溶解后使用。此溶液可以分装后储存在-20°C,以避免反复冻结和解冻。乙酰辅酶A:为96孔加入0.44 mL测定缓冲液,为48孔加入0.22 mL测定缓冲液,溶解后使用。此溶液可以分装后储存在-20°C,以避免反复冻结和解冻。马来酰辅酶A:为96孔加入0.84 mL测定缓冲液,为48孔加入0.42 mL测定缓冲液,溶解后使用。此溶液可以分装后储存在-20°C,以避免反复冻结和解冻。工作试剂:为一个孔准备180 µL工作试剂,加入16 µL溶解的NADPH4 µL溶解的乙酰辅酶A8 µL溶解的马来酰辅酶A152 µL测定缓冲液。使用前制备工作试剂,根据需要量进行调配。

 

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒样品制备:

注意:推荐使用新鲜样品,如果不立即检测,样品可以在-80°C下储存一个月。

1. 动物组织:称取0.1 g组织,加入1 mL提取缓冲液,在冰上均质。在4°C下以12,000 g离心40分钟。使用上清液进行检测,并将其放在冰上进行测试。

2. 植物组织:称取0.1 g组织,加入1 mL提取缓冲液并研磨。在冰浴中超声波处理5分钟(功率20%200 W,超声波3秒,间隔7秒,重复30次)。在4°C下以12,000 g离心40分钟。使用上清液进行检测,并将其放在冰上进行测试。

3. 细胞或细菌:收集5×10^6个细胞或细菌到离心管中,用冷PBS洗涤细胞或细菌,离心后弃去上清液;加入1 mL提取缓冲液,在冰浴中超声波处理5分钟(功率20%200 W,超声波3秒,间隔7秒,重复30次)。在4°C下以12,000 g离心40分钟。使用上清液进行检测,并将其放在冰上进行测试。

4. 血清、血浆或其他液体样品:直接进行检测。

 

注意:对于脂肪含量较高的动物组织,在离心后去除上层脂肪,然后取上清液。如果通过蛋白浓度计算含量,最好使用EZMeta™脂肪酸合酶(FAS)比色活性检测试剂盒来量化总蛋白质。

 

该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途

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高特异性单胺氧化酶 (MAO) 活性检测试剂盒--低活性准确测量

 

EZMeta™单胺氧化酶(MAO)比色活性试剂盒提供了一种简单的方法,用于检测血清、血浆、动物和植物组织、细胞、细菌等多种生物样品中的MAO活性。在该试剂盒中,MAO催化单胺底物的脱胺反应,生成相应的醛,进一步氧化为酸。底物在360 nm处具有特征吸收峰。360 nm处单胺底物浓度的降低速率可以反映MAO的活性。

 

MAO活性检测试剂盒的原理和优势:

单胺氧化酶活性检测试剂盒通过测量MAO催化底物的氧化反应来评估酶的活性水平。这种检测方法基于酶促反应产生的产物的定量分析,通常使用可见光分光光度计或荧光分光光度计进行测量。MAO活性检测试剂盒具有以下几个优势:

1. 高灵敏度:MAO活性检测试剂盒能够检测到极低浓度的MAO活性,使研究人员能够对低活性的样品进行准确测量。

2. 快速和简便:MAO活性检测试剂盒提供了一种快速、简便的方法来测量MAO活性,节省了实验室人员的时间和精力。

3. 高度特异性:MAO活性检测试剂盒对MAO酶具有高度特异性,能够准确测量目标酶的活性,避免了其他酶的干扰。

4. 可靠性和重复性:MAO活性检测试剂盒具有良好的可靠性和重复性,可以在不同实验条件下进行重复测量,确保结果的准确性和可重复性。

 

应用领域:

MAO活性检测试剂盒在药物研发和神经科学研究中具有广泛的应用。以下是一些应用领域的例子:

1. 药物筛选:MAO活性检测试剂盒可用于药物筛选,评估候选药物对MAO活性的影响,从而寻找潜在的MAO抑制剂或激动剂。

2. 神经递质代谢研究:通过测量MAO活性,研究人员可以了解神经递质代谢的变化,揭示神经系统功能的调控机制。

3. 疾病研究:MAO活性检测试剂盒可用于研究神经系统疾病与MAO活性之间的关联,帮助深入理解疾病的发生和发展机制。

 

艾美捷Biogradetech单胺氧化酶 (MAO) 活性检测试剂盒:

货号:D-AKC1900

规格:48T / 96T

储存条件:存放于4°C,避光,保存12个月

适用样本:血清、血浆、动物和植物组织、细胞、细菌

 

提供的材料和储存条件:

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样本制备:

注意:建议使用新鲜样本。如果不能立即进行测定,样本可在-80°C下保存一个月。

1. 动物和植物组织:称取0.1克组织,加入1 mL提取缓冲液Ⅰ并均质。在4°C下以1,000 g离心10分钟,废弃沉淀。将上清液转移到另一个预冷的离心管中,在4°C下以10,000 g离心30分钟,废弃上清液。向沉淀中加入1 mL预冷的提取缓冲液Ⅱ,摇匀,然后在4°C下以16,000 g离心40分钟,废弃上清液。加入1 mL预冷的测定缓冲液,摇匀。置于冰上进行测试。

 

2. 细胞或细菌:收集5 x 10^6个细胞或细菌放入离心管中,用冷PBS洗涤细胞或细菌,离心后废弃上清液;加入1 mL提取缓冲液Ⅰ超声破碎细胞或细菌5分钟(功率20%200 W,超声3秒,间隔7秒,重复30次)。在4°C下以1,000 g离心10分钟,废弃沉淀。将上清液转移到另一个预冷的离心管中,在4°C下以10,000 g离心30分钟,废弃上清液。向沉淀中加入1 mL预冷的提取缓冲液Ⅱ,摇匀,然后在4°C下以16,000 g离心40分钟,废弃上清液。加入1 mL预冷的测定缓冲液,摇匀。置于冰上进行测试。

 

3. 血清(血浆)样本:直接进行测试。

注意:如果通过蛋白浓度计算含量,建议使用EZMeta™单胺氧化酶(MAO)比色活性试剂盒对总蛋白进行定量测定,效果更佳。

 

该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。

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活性氧 (ROS) 含量检测试剂盒的实验方法及步骤说明

 

活性氧含量检测试剂盒通过使用特异性探针或底物与ROS发生化学反应,从而实现对ROS含量的测定。这种检测方法基于探针或底物与ROS的特异性反应,通常使用荧光分光光度计或流式细胞术进行测量。活性氧含量检测试剂盒具有以下几个优势:

1. 高选择性:活性氧含量检测试剂盒能够特异性地检测ROS,避免了其他化学物质的干扰,确保测量结果的准确性。

2. 高灵敏度:活性氧含量检测试剂盒能够检测到极低浓度的ROS,使研究人员能够对ROS含量进行准确测量,揭示微小变化对细胞功能和疾病发展的影响。

3. 快速和简便:活性氧含量检测试剂盒提供了一种快速、简便的方法来测量ROS含量,节省了实验室人员的时间和精力。

4. 可靠性和重复性:活性氧含量检测试剂盒具有良好的可靠性和重复性,可以在不同实验条件下进行重复测量,确保结果的准确性和可重复性。

 

活性氧 (ROS) 含量检测试剂盒应用领域:

活性氧含量检测试剂盒在生物医学研究中具有广泛的应用。以下是一些应用领域的例子:

1. 氧化应激研究:通过测量ROS含量,研究人员可以评估细胞氧化应激的程度,揭示ROS与疾病发生和发展的关联,如癌症、心血管疾病和神经退行性疾病等。

2. 药物筛选:活性氧含量检测试剂盒可用于药物筛选,评估候选药物对ROS产生和清除的影响,从而寻找潜在的抗氧化剂或氧化剂。

3. 环境毒性评估:活性氧含量检测试剂盒可用于评估环境污染物对细胞ROS产生的影响,揭示环境毒性与氧化应激的关系。

 

艾美捷Biogradetech活性氧 (ROS) 含量检测试剂盒:

货号:D-AKC1910

规格:50T / 100T

储存:储存于-20°C,避光,保存12个月

适用样本:细胞

 

实验:

对于刺激时间较短的细胞(通常少于2小时),建议先加载探针,然后用活性氧自由基阳性对照物或感兴趣的药物刺激细胞;对于需要长时间刺激的细胞(通常超过6小时),建议在加载探针之前用活性氧自由基阳性对照物或感兴趣的药物刺激细胞,这里只提供后一种实验方法,步骤如下:

1. 原位加载探针(仅适用于附着细胞)

a) 细胞准备:在测试前一天放置细胞板,确保细胞数目小于5×10^5/mL

b) 药物诱导:去除细胞培养基,加入无血清稀释药物处理细胞,在黑暗中在37°C细胞培养箱中孵育。实际诱导时间取决于药物特性和细胞类型。

c) (可选)阳性对照:用无血清培养基稀释阳性对照物H2O2,从100 mM稀释到正常工作浓度的100 μM。细胞在黑暗中孵育37°C,时间为30分钟至4小时。为了提高活性氧自由基的水平,不同细胞类型的实际时间不同。例如,HeLa细胞需要处理30-60分钟。注意:阳性对照仅在阳性对照孔中需要,其他实验组不需要。

d) 活性氧自由基探针的制备:用无血清培养基稀释DCFH-DA,最终浓度为10 μM

e) 加载活性氧自由基探针:去除处理药物,用无血清培养基洗涤细胞1-2次,加入适量稀释的DCFH-DA工作溶液,细胞需要完全覆盖,例如6孔板通常添加不少于1 mL/孔,96孔板通常添加不少于100 μL/孔。细胞在37°C培养箱中黑暗中孵育30分钟。

f) 清洗细胞:细胞用无血清培养基洗涤1-2次,去除未进入细胞的DCFH-DA

 

2. 收集细胞并加载探针(适用于附着细胞和悬浮细胞)

a) 细胞准备:按照标准方法培养细胞。需要确保用于测试的细胞状态良好。根据适当的方法清洁并收集足够数量的细胞。

b) 药物诱导:收集的细胞悬浮在适量的稀释药物中,在37°C培养箱中黑暗中孵育。实际诱导时间可以根据药物特性和细胞类型确定。

c) (可选)阳性对照:用无血清培养基稀释阳性对照物H2O2,从100 mM稀释到正常工作浓度的100 μM。细胞在黑暗中孵育37°C,时间为30分钟至4小时。为了提高活性氧自由基的水平,不同细胞类型的实际时间不同。例如,HeLa细胞需要处理30-60分钟。

d) 活性氧自由基探针的制备:用无血清培养基稀释DCFH-DA,最终浓度为10 μM

e) 探针加载:离心收集细胞,去除处理药物,用无血清培养基洗涤细胞1-2次,再次离心收集细胞,加入稀释的探针,使细胞密度为1.0×10^6-2.0×10^7。细胞在37°C培养箱中黑暗中孵育30分钟。注意:细胞密度应根据后续的检测系统、检测方法和总检测量进行调整。例如,对于流式细胞术,单管中的细胞数目不应少于10^4且不超过10^6

f) 清洗细胞:用无血清培养基洗涤细胞1-2次,去除未进入细胞的DCFH-DA

 

3.荧光显微镜照片

a) 附着细胞(步骤1.f)可以直接在荧光显微镜下观察;对于悬浮细胞(步骤2.f),将25-50 μL细胞悬浮液滴在显微镜载玻片上,用盖玻片覆盖进行观察。

b) 在荧光显微镜下,使用FITC滤光片观察荧光,并去除背景以观察荧光变化。

 

4. 流式细胞术的操作和分析方法

a) 附着细胞(步骤1.f)用胰蛋白酶消化制备单细胞悬浮液;对于悬浮细胞(步骤2.f),直接收集细胞。细胞用0.5-1 mL PBS0.5-1×10^5/mL)重新悬浮。

b) 在流式细胞术中,激发波长为488 nm,发射波长为525 nm。可以实时或定时检测刺激前后荧光强度的变化。

 

该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。

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高选择性高灵敏度血钠浓度检测试剂盒--实现结果的准确性

 

血钠浓度是指血液中的钠离子(Na+)的浓度水平,它是维持体液渗透压、神经传导和酸碱平衡等生理过程的重要指标。血钠浓度的异常与多种疾病的发生和发展密切相关,如高血钠血症和低血钠血症等。因此,准确测量血钠浓度对于临床诊断和治疗具有重要意义。在这方面,血钠浓度检测试剂盒成为了一种不可或缺的工具,为医生和研究人员提供了高效、准确的血钠浓度测定方法。

 

血钠浓度检测试剂盒的原理和优势:

血钠浓度检测试剂盒通过使用特定的试剂与血液中的钠离子发生化学反应,从而实现对血钠浓度的测定。这种检测方法基于试剂与钠离子的特异性反应,通常使用离子选择电极或光度计进行测量。血钠浓度检测试剂盒具有以下几个优势:

1. 高选择性:血钠浓度检测试剂盒能够特异性地检测血液中的钠离子,避免了其他离子的干扰,确保测量结果的准确性。

2. 高灵敏度:血钠浓度检测试剂盒能够检测到微量的钠离子,使医生和研究人员能够对血钠浓度进行准确测量,及时发现和处理异常情况。

3. 快速和简便:血钠浓度检测试剂盒提供了一种快速、简便的方法来测量血钠浓度,节省了临床工作和科研人员的时间和精力。

4. 可靠性和重复性:血钠浓度检测试剂盒具有良好的可靠性和重复性,可以在不同实验条件下进行重复测量,确保结果的准确性和可重复性。

 

应用领域:

血钠浓度检测试剂盒在临床医学和研究领域中具有广泛的应用。以下是一些应用领域的例子:

1. 临床诊断:血钠浓度检测试剂盒可用于临床诊断,评估患者的电解质平衡情况,帮助医生及时发现和处理高血钠血症或低血钠血症等异常情况。

2. 研究电解质紊乱:血钠浓度检测试剂盒可用于研究电解质平衡与疾病之间的关系,如肾脏疾病、心血管疾病和神经系统疾病等。

3. 药物监测:血钠浓度检测试剂盒可用于监测某些药物对血钠浓度的影响,帮助医生调整药物治疗方案,确保患者的安全和疗效。

 

艾美捷EZMeta™ 血清钠比色测定试剂盒

货号:D-AKC2130

规格:96孔板

存储:存储于4°C,有效期为6个月

检测范围:0.0025-0.05 mol/L

灵敏度:0.0025 mol/L

适用样品:血清

 

提供的材料和储存条件:

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数据分析:

注意:我们为您提供了计算公式,包括推导过程和最终公式。这两个公式完全相等。建议使用粗体的简洁计算公式作为最终公式。

1. 标准曲线绘制

以标准溶液的浓度为纵坐标,ΔAStandard为横坐标,绘制标准曲线。

 

2. 血清钠浓度的计算

将样品的ΔATest值代入方程式,得到y值(mol/L)。血清钠浓度(mol/L=n×y=10×y

其中:

n:样品的稀释倍数,为10

 

该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。




 

 

 


(来源: 武汉艾美捷科技有限公司


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