提高蛋白质纯化效率的利器--His-tag重组蛋白

提高蛋白质纯化效率的利器--His-tag重组蛋白

蛋白质折叠是细胞生物学中一项复杂而重要的过程，确保蛋白质的正确结构和功能。分子伴侣蛋白，如热休克蛋白（HSP），在辅助蛋白质折叠和防止蛋白质聚集方面发挥着关键作用。在HSP家族中，HSP40，也被称为DNAJ蛋白，因其参与蛋白质折叠途径而备受关注。此外，His-Tag重组蛋白的使用彻底改变了蛋白质纯化和表征的方法，为研究蛋白质折叠机制提供了宝贵的工具。

HSP40与蛋白质折叠：

HSP40蛋白是与HSP70协同作用的辅助伴侣蛋白，其具有保守的J-结构域，负责刺激HSP70的ATP酶活性，以及其他结构域，介导底物的识别和相互作用。HSP40蛋白能够识别和结合未折叠或错误折叠蛋白上的暴露疏水区域，防止其聚集并促进正确折叠。通过调节HSP70的ATP酶循环，HSP40确保细胞环境中蛋白质折叠的高效和质量控制。

His-Tag重组蛋白与蛋白质纯化：

His-Tag技术彻底改变了蛋白质纯化和表征的方法。His-Tag是短肽序列，通常由六个组氨酸残基组成，与重组蛋白融合。His-Tag使得利用固定金属亲和层析（IMAC）特异而高效地纯化蛋白质成为可能，其中His-Tag与固定在固体支持上的金属离子（如镍或钴）结合。这种技术能够快速高产地纯化His-Tag重组蛋白，便于后续的结构研究、酶活性测定和蛋白质相互作用分析等应用。

HSP40与His-Tag重组蛋白的相互作用：

His-Tag存在于重组蛋白上可能会影响其折叠和与分子伴侣蛋白的相互作用。研究表明，His-Tag可能会影响蛋白质的溶解性、稳定性和折叠动力学。HSP40蛋白具有底物识别能力，可以识别和与带有His-Tag的蛋白相互作用，协助其折叠并防止聚集。HSP40的J-结构域刺激HSP70的ATP酶活性，一旦折叠完成，促使His-Tag重组蛋白从伴侣复合物中释放出来。

意义和应用：

了解HSP40与His-Tag重组蛋白的相互作用对于蛋白质折叠研究和生物技术应用具有重要意义。HSP40可以用于提高表达和纯化过程中His-Tag重组蛋白的折叠效率和产量。这可以提高蛋白质生产的成功率，并有助于研究蛋白质的结构与功能关系。此外，HSP40还可以帮助重新折叠变性或错误折叠的His-Tag重组蛋白，恢复其功能活性。

作为辅助伴侣蛋白，HSP40在蛋白质折叠过程中起着至关重要的作用，确保蛋白质的正确折叠并防止聚集。His-Tag重组蛋白的使用革命了蛋白质纯化，而HSP40与His-Tag蛋白的相互作用为提高蛋白质折叠效率提供了独特的机会。

艾美捷HSP40，His-tag重组：

货号：BPS-50285

英文名称：HSP40, His-tag Recombinant

同义词：HSP40、热休克蛋白 40、DnaJ

物种：人

宿主物种/表达系统：大肠杆菌

纯度：≥90%

格式缓冲：水溶液

配方：25 mM Tris-HCl，pH 7.5,400 mM NaCl，0.05% 吐温-20,10% 甘油和 3 mM DTT。

标签：C 端 His 标签

HSP40, His-tag重组蛋白HSP40, His-tag Recombinant产品数据：

HSP40, His-tag重组蛋白HSP40, His-tag Recombinant文献参考：

1. Gibbs SJ, et al. PLoS ONE. 2009;4(2):e4595.

2. Li Z, Srivastava P. Curr Protoc Immunol. 2004 Feb; Appendix 1T. Review

https://www.amyjet.com/products/BPS-50285.shtml

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ExoBrite CD9 Flow Antibody--经Biotium验证，提供优质的性躁比

ExoBrite™ CD9 Flow Antibody 经 Biotium 验证，可通过流式细胞术检测纯化或珠结合外泌体中的外泌体标记 CD9。抗体偶联物提供优质的信噪比，并包括 Pacific Blue™、FITC 和 PE 通道的颜色选项。

艾美捷ExoBrite CD9 Flow Antibody（BTM-P003-410）特点：

流式细胞仪合适检测外泌体标志物 CD9

经验证可用于纯化或珠结合的外泌体

明亮的信号和低背景

有 4 种颜色可供选择

细胞外囊泡 (EV)，包括外泌体，是从细胞中释放出来的与脂质结合的囊泡。显示特定的表面蛋白，可以携带核酸和其他货物，使它们能够在身体不同部位的细胞之间传递生物信息。因此，越来越多地研究外泌体在药物递送和医学诊断应用中的潜在用途。用作外泌体标记的最常见蛋白质是 CD9、CD63 和 CD81，它们是四跨膜蛋白家族的成员。Tetraspanins 是具有许多建议功能的质膜蛋白，包括其他膜蛋白的激活和分选。它们还被认为在将蛋白质靶向多泡体 (MVB) 和外泌体方面发挥作用。

其他用于四跨膜蛋白 CD9、CD63 和 CD81 的市售抗体通常未针对分离的外泌体进行验证，并且可能需要对您的外泌体制备和染色方案进行繁琐的优化。

ExoBrite™ Flow Antibody Conjugates 经验证可在纯化和珠结合的外泌体中提供明亮的信号和低背景的外泌体标记物。ExoBrite™ 同种型控制流抗体已被发现不与人体细胞中的任何靶标反应，并且与四跨膜蛋白抗体具有相同的同种型，也可用作阴性对照。

另外，ExoBrite™ EV 膜染色试剂盒，用于通过流式细胞术检测分离的 EV 和外泌体。ExoBrite™ EV 膜染色试剂盒还可与抗体染色结合使用，用于多参数分析。

ExoBrite™ 流动抗体偶联物：

ExoBrite  Flow Antibody相关研究：

ExoBrite™ CD63 Western Antibody

编号：P004-680-250 - P004-770-1000

ExoBrite™ CD81 Flow Antibody

编号：P005-410-125 - P005-RPE-500

ExoBrite™ CD9 Western Antibody

编号：P003-680-250 - P003-770-1000

ExoBrite™ IgG1 Isotype Control Flow Antibody

编号：P008-410-125 - P008-RPE-500

https://www.amyjet.com/products/BTM-P003-410-125.shtml

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非反应性 IgG1 小鼠抗体：ExoBrite IgG1 Isotype Control Flow Antibody

已发现 ExoBrite™ IgG1 同种型控制流抗体不与人体细胞中的任何靶点发生反应，并且与针对四跨膜蛋白 CD9、CD63 和 CD81 的 ExoBrite™ 流抗体具有相同的同种型。该抗体与用于 Pacific Blue™、FITC 和 PE 通道的 ExoBrite™ Flow Antibodies 具有相同的偶联物。

艾美捷ExoBrite IgG1 Isotype Control Flow Antibody（BTM-P008-410）属性：

在蛋白质阵列中验证：单特异性

抗体编号：#P008

抗体类型：同种型对照

克隆性：单克隆

宿主物种：鼠

同型对照：IgG1，κ

抗体反应性（目标：同种型对照

运输条件：室内温度

抗体应用说明：流式细胞术的推荐浓度：每 0.1 mL 外泌体 5 uL

抗体/偶联物制剂：PBS、0.1% BSA、0.05% 叠氮化物

保质期：按建议存放时，保证自收货之日起至少 24 个月

储藏条件：储存于 2 至 8 °C，避光保护荧光偶联物

仅供研究使用 (RUO)

ExoBrite IgG1 Isotype Control Flow Antibody特点：

非反应性 IgG1 小鼠抗体

用作 ExoBrite™ Flow Antibodies 的同种型阴性对照

有 4 种颜色可供选择

细胞外囊泡 (EV)，包括外泌体，是从细胞中释放出来的与脂质结合的囊泡。显示特定的表面蛋白，可以携带核酸和其他货物，使它们能够在身体不同部位的细胞之间传递生物信息。因此，越来越多地研究外泌体在药物递送和医学诊断应用中的潜在用途。用作外泌体标记的最常见蛋白质是 CD9、CD63 和 CD81，它们是四跨膜蛋白家族的成员。Tetraspanins 是具有许多建议功能的质膜蛋白，包括其他膜蛋白的激活和分选。它们还被认为在将蛋白质靶向多泡体 (MVB) 和外泌体方面发挥作用。

ExoBrite™ 流动抗体偶联物：

Biotium 还提供ExoBrite™ EV 膜染色试剂盒，用于通过流式细胞术检测分离的 EV 和外泌体。ExoBrite™ EV 膜染色试剂盒还可与抗体染色结合使用，用于多参数分析。

https://www.amyjet.com/products/BTM-P008-410-125.shtml

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ExoBrite Streptavidin Magnetic Beads/ExoBrite链霉亲和素磁珠（28000）

艾美捷ExoBrite Streptavidin Magnetic Beads/ExoBrite链霉亲和素磁珠（28000）：

使用ExoBrite Streptavidin磁珠简化EV和外泌体分离工作流程，与同类产品相比，该磁珠可提供更低的背景和更高的EV捕获灵敏度。这些链霉亲和素包被和磁性聚苯乙烯珠(直径4.5um)可用于从细胞培养基或其他生物流体中分离EV，而无需过夜沉淀步骤。

ExoBrite Streptavidin Magnetic Beads/ExoBrite链霉亲和素磁珠特点：

结合生物素化抗体(不包括)分离EV，

无需过夜沉淀步骤从生物体液中分离EV，

比竞争对手更低的背景和更高的灵敏度方便的磁分离，

通过显微镜，流式细胞术或western blot检测下游

ExoBrite Streptavidin Magnetic Beads/ExoBrite链霉亲和素磁珠结果展示：

图1：首先将ExoBrite™ 链霉亲和素磁珠与（橙色点）或不与（灰色点）生物素化的CD9抗体一起孵育，然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。EV被ExoBrite™ 560/585 CTB EV染色，并通过流式细胞仪在PE通道中检测。

图2：首先将ExoBrite™ 链霉亲和素磁珠与（橙色点）或不与（灰色点）生物素化的CD63抗体一起孵育，然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。结合的EV被ExoBrite™ 560/585 CTB EV染色，并通过流式细胞仪在PE通道中检测。

图3：首先将ExoBrite™ 链霉亲和素磁珠与（橙色点）或不与（灰色点）生物素化的CD81抗体一起孵育，然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。EV被ExoBrite™ 560/585 CD9流式抗体染色，并通过流式细胞仪在PE通道中检测。

图4：首先将ExoBrite™ 链霉亲和素磁珠与（橙色点）或不与（灰色点）生物素化的CD81抗体一起孵育，然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。EV被ExoBrite™ 560/585 CTB EV染色，并通过流式细胞仪在PE通道中检测。

https://www.amyjet.com/brand/exobrite-antibody.shtml

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艾美捷APExBIO染色质/表观遗传学解决方案

表观遗传学是基因表达的可遗传修饰，与DNA序列的变化无关。表观遗传修饰主要发生在 DNA 或组蛋白八聚体上。有几种类型的表观遗传学修饰，通过 DNA-甲基转移酶 （DNMT） 进行的 DNA 甲基化和组蛋白的共价修饰（例如乙酰化、甲基化、磷酸化和泛素化）。组蛋白乙酰转移酶 （HAT） 的组蛋白乙酰化参与转录激活，而组蛋白脱乙酰酶 （HDAC） 的组蛋白去乙酰化与转录抑制有关。组蛋白去甲基化与赖氨酸特异性去甲基化酶 （LSD） 和含有组蛋白去甲基化酶 （JHDM） 的 JmjC 结构域有关。

核小体由四种组蛋白（H2A、H2B、H3 和 H4）组成，它们是染色质的主要组成部分。特定化学基团的添加和去除称为表观遗传标记，它调节染色质结构并影响基因表达。此外，RNA与抑制性染色质状态的形成密切相关。

表观遗传机制在细胞水平上响应环境变化，从而影响细胞可塑性。染色质和表观遗传调控在基因组发育和应激反应过程中的编程中起着重要作用，表观遗传学的缺陷可导致癌症、炎症和代谢紊乱等。

艾美捷APExBIO染色质/表观遗传学热门研究：

B8210 (R)-PFI 2 hydrochloride

B3276 MG 149 2 Citation

B3274 CCT007093

B3272 Inauhzin

A8792 GSK J5 HCl

A8766 OG-L002 HCl

C5773 CTPB

C5709 AGK7

C5334 BRD6688

C5180 JFD00244

C5162 Bizine

C5042 MS37452

C5000 HAT Inhibitor II

C4834 (S)-PFI-2 (hydrochloride)

C4614 bpV(HOpic) (potassium salt, technical grade)

C4672 IOX4

C4401 PTP Inhibitor IV

C4445 2-D08

C4347 β-Glycerophosphate (sodium salt hydrate)

C4119 2',3',5'-triacetyl-5-Azacytidine

C4247 RN-1 (hydrochloride)

C4229 UMB-32

C4018 4-iodo-SAHA

C4097 NI-57

C3776 MS049 (hydrochloride)

C3829 Cl-Amidine (trifluoroacetate salt)

C3668 GSK6853

C3996 PRL-3 Inhibitor

C3823 Phthalazinone pyrazole

C3095 N-Oxalylglycine

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艾美捷APExBIO--MAPK信号传导在疾病发生发展中的作用

丝裂原活化蛋白激酶 （MAPK） 是一个高度保守的丝氨酸/苏氨酸激酶家族，可介导一系列细胞过程，包括增殖、分化、运动、迁移、应激反应、细胞凋亡和存活。MAPK的激活涉及由激活MAPK/ERK（即MAPKK或MEK）的MAPK激酶（即MAPKK或MEKK）组成的信号通路。多种细胞外信号，如有丝分裂原、细胞因子、生长因子和环境应激源，刺激 MAPK 活性的磷酸化依赖性增加。

活化的 MAPK 转导 MAPK 活化蛋白激酶 （MAPKAPK） 的磷酸化和激活，例如 RSK、MSK 或 MNK 家族和 MK2/3/5。有三个主要的 MAPK 家族，信号调节激酶 1 和 2（Erk1/2 或 p44/42）、c-Jun N 末端激酶 1-3 （JNK1-3）/应激活化蛋白激酶（SAPK1A、1B、1C）、p38 亚型（p38α、β、γ 和 δ）。ERK信号转导参与细胞分裂、迁移和存活。p38 MAPK和JNK/SAPK通路被细胞应激激活。p38 MAPK通路调节细胞运动、转录和染色质重塑。JNK/SAPK 信号转导影响细胞凋亡和炎症。MAPK通路失调导致肿瘤发生和其他病理状况。

艾美捷APExBIO--MAPK信号传导热门研究：

C5850 SD 169

C5489 8-CPT-Cyclic AMP (sodium salt)

C5316 RWJ 67657

C5545 MK2 Inhibitor IV

B7850 BMS-582949 hydrochloride

C4949 SB 202474

C5106 LL-Z 1640-4

C4683 H-8 (hydrochloride)

C4308 Kemptide

C4361 PD 184161

C4338 AG-126

C3728 Sp-5,6-dichloro-cBIMPS (sodium salt)

C3921 Ulixertinib (hydrochloride)

A1117 PKA inhibitor fragment (6-22) amide

B7820 APS-2-79

B6188 Pamapimod (R-1503, Ro4402257)

B6187 BMS-582949

B6177 PLX7904

B6159 Vacquinol-1

B6024 DEL-22379

B6014 BI-847325

B6012 Pexmetinib (ARRY-614)

B5960 PF-03394197(Oclacitinib)

B5942 AS601245

B5866 SCH772984 HCl

B5867 SCH772984 TFA

A8716 LY3009120

B5820 RO5126766(CH5126766)

B5817 GDC-0994 2 Citation

B4937 SB 706504

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艾美捷APExBIO--DNA损伤/DNA修复：探索DNA修复的重要性

由于外部（外源性）和内部（内源性）压力，人类细胞中的DNA每天会受到数以万计的损害。外源性损害由化学污染、紫外线、电离辐射和烷基化/甲基化等引起，而内源性损害来自碱的氧化、烷基化和水解等。由于DNA的单链和双链断裂在损伤后会发生，未修复的DNA损伤会导致细胞衰老、细胞凋亡和恶性肿瘤等。为了克服这种威胁，细胞已经发展出DNA损伤反应，以检测DNA损伤并介导其修复。

DNA修复涉及错配、碱基切除、核苷酸切除修复等多种机制。一组蛋白质和途径参与这些过程。ATM/ATR 激酶和 DNA-PK 对于检测 DNA 损伤至关重要。染色质重塑剂调节染色质的可及性，使 DNA 修复因子发挥作用。RPA、Rad51 和 fanconi 贫血蛋白直接作用于修复 DNA 损伤。p53 网络、RAS GTP 酶超家族和泛素系统在 DNA 损伤反应中也起着重要作用。异常的DNA损伤反应与衰老、癌症和免疫疾病有关。

艾美捷APExBIO--DNA损伤/DNA修复热门研究：

A8705 SCR7 6 Citation

C5790 9-amino Camptothecin

C5851 MI-192

C5006 UK 1

C4941 SCR7 pyrazine

B7866 2-Deoxyuridine

C4764 Trimidox

C4732 Illudin S

C4558 Isoxanthopterin

C4327 CBHA

C4451 Trioxsalen

C4433 Luotonin A

C4310 4-amino-1,8-Naphthalimide

C4305 HNHA

C4228 Luotonin F

C3606 Nullscript

C3166 JW 74

B7822 AZD0156

Summary: ATM kinase inhibitor

B6186 RHPS4 1 Citation

B6162 AZ6102

B6152 Benzamide

B6150 Picolinamide

B6114 CC-115

B6086 BGP-15

B6080 Methylthioadenosine

B6046 NVP-TNKS656

B6021 Dp44mT

B6009 6-Thio-dG

B6007 AZD6738 1 Citation

B5983 MN 64

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艾美捷APExBIO--泛素化/蛋白酶体：细胞质质量控制的重要机制

泛素化是靶向蛋白质以被蛋白酶体降解的过程。泛素 （Ub） 是一种 76 个氨基酸的多肽，可以通过泛素化过程共价连接到各种细胞蛋白上。这种泛素-蛋白酶体系统在细胞分裂、生长、分化、转录调控、细胞凋亡和免疫等方面起着至关重要的作用。三种主要类型的酶参与泛素化过程。在第一步中，泛素活化酶（E1）通过ATP依赖性反应进行泛素活化。在第二步中，活化的泛素从 E1 转移到泛素结合酶 （E2）。在最后一步中，泛素蛋白连接酶 （E3） 是标记泛素以靶向底物蛋白所必需的。泛素的羧基末端与靶蛋白中赖氨酸残基的ε氨基之间形成异肽键。

一旦底物蛋白被标记，蛋白酶体将与多泛素链结合，从而允许标记蛋白的降解。然后，多泛素化的靶蛋白被 26S 蛋白酶体识别并降解。去泛素化酶 （DUB） 通过从其底物蛋白中去除泛素来逆转泛素化过程。泛素-蛋白酶体系统的失调与癌症、糖尿病、心血管和神经退行性疾病等有关。

艾美捷APExBIO--泛素化/蛋白酶体热门研究：

B6032 CB-5083

B2151 STF-62247

A8172 Dihydroeponemycin 1 Citation

C4090 HMB-Val-Ser-Leu-VE

A8740 C598-0466

C3250 Ubiquitin Isopeptidase Inhibitor I

B6179 VPS34-IN1

B6174 MRT68921

B6160 PIK-III 1 Citation

B6122 ML241 hydrochloride

B6107 ML241

B6026 VR23

B5873 Spautin-1 1 Citation

A8715 SBI-0206965 2 Citation

A8716 LY3009120

A8693 C527

A8883 SAR405 22 Citation

B5550 HBX 41108

B4755 PI-1840

B5797 PRT 4165

B5567 SMER 3

B7745 SZL P1-41

B7727 NSC 624206

B7637 SMER 28

B3516 DUBs-IN-3

B3515 DUBs-IN-2

B1391 Divalproex Sodium

B1395 Sulfacetamide Sodium

B1397 Trifluoperazine 2HCl

B1307 SJB3-019A

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