Abbexa/艾美捷人Asprosin ELISA试剂盒，体外定量测定

Abbexa/艾美捷人Asprosin ELISA试剂盒，体外定量测定

Asprosin 是哺乳动物在其脂肪（白色脂肪）组织中产生的一种蛋白质激素，可刺激肝脏 将葡萄糖释放到血液中。在这些组织中，asprosin 由基因 FBN1 编码，该基因也编码蛋白质 原纤维蛋白。在肝脏中，asprosin 通过环磷酸腺苷 （cAMP） 依赖性途径激活快速葡萄糖释放。 Asprosin 最初由 Batul Chopra 博士和贝勒医学院的同事鉴定为 C 端切割产物 FBN1基因产物profibrillin。他们在两名先天性部分脂肪营养不良患者中发现了FBN1基因突变，并且 早衰样外观。这两名患者是Lizzie Velasquez和Abby Solomon。这些患者中 FBN1 蛋白的截断 被认为对蛋白质产生有两个后果：突变/截短的原纤维蛋白和非常低的血浆 asprosin 水平 （来自假设的显性负面影响）。此后，这种情况被命名为马方样-早衰-脂肪营养不良综合征。

Abbexa/艾美捷人Asprosin ELISA Kit是一种ELISA试剂盒，用于体外定量测定血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、细胞裂解物和其他生物体液中人Asprosin的浓度。低水平的阿斯普罗辛可用于指示马凡脂肪营养不良综合征，高水平的阿斯普罗辛可以在肥胖患者中发现。

Abbexa人Asprosin ELISA试剂盒检测原理：

该试剂盒基于夹心酶联免疫吸附测定技术。将抗体预包被到 96 孔板上。将标准品、测试样品和生物素偶联试剂加入孔中并孵育。然后加入HRP偶联试剂，孵育整个板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的偶联物。TMB 底物用于定量 HRP 酶促反应。加入TMB底物后，只有含有足够FBN1的孔才会产生蓝色产物，然后在加入酸性终止溶液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的 FBN1 量成正比。在酶标仪中以450nm处的分光光度法测量光密度（OD），从中可以计算FBN1的浓度。

试剂制备：

此过程仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册上的规定使用，并与产品一起交付。

1）标准品：用推荐体积的标准稀释缓冲液配制标准品，制成标准溶液。然后按照实验方案中的说明，使用标准稀释剂缓冲液对标准溶液进行连续稀释。

2） 洗涤缓冲液：按照实验方案中的说明，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。

3）检测试剂制备：计算所需工作液的总体积。稀释检测试剂 A 和检测试剂 B 分别用稀释剂 A 和稀释剂 B 以 1：100 的比例稀释。

检测程序：

此过程仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册上的规定使用，并与产品一起交付。

1）制定标准，测试样品和控制井。

2） 将 100 μl 稀释的标准品分装到标准孔中。

3） 将 100 μl 标准稀释缓冲液分装到对照（零）孔中。

4） 将 100 μl 稀释的样品分装到样品孔中。在37°C孵育1小时。

5） 将 100 μl 检测试剂 A 分装到每个孔中。在37°C孵育1小时。

6）洗涤3次。

7） 将 100 μl 检测试剂 B 分装到每个孔中。在37°C孵育30分钟。

8）洗涤5次。

9） 将 90 μl TMB 底物分装到每个孔中。在37°C孵育10-20分钟。

10） 分装 50 μl 终止液。

11） 在 450 nm 处测量外径。

协议：

此过程仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册上的规定使用，并与产品一起交付。

使用前将试剂盒组分和样品平衡至室温（18 - 25°C）。建议为每个测试绘制一条标准曲线。

1.在预涂板上分别设置标准、测试样品和对照（零）孔，然后记录它们的位置。建议至少测量每个标准品和样品一式两份。

2. 将 100 μL 每种标准品、对照品和样品加入适当的孔中。用盖子密封板，在 37°C 下孵育 1 小时。

3. 取下盖子，丢弃液体。

4. 向每个孔中加入 100 μl 检测试剂 A 工作溶液。用盖子密封板，在 37°C 下孵育 1 小时。

5. 取下盖子并丢弃溶液。用 1X 洗涤缓冲液洗涤板 3 次。

6. 向每个孔中加入 100 μL 检测试剂 B 工作液，密封并在 37°C 下孵育 30 分钟。

7. 弃去溶液，按照上一步所述用洗涤缓冲液洗涤板 5 次。

8. 将 90 μl TMB 底物分装到每个孔中。用盖子密封板，在 37°C 下孵育 10-20 分钟。避免暴露在光线下。孵育时间仅供参考，最佳时间应由最终用户确定。不要超过 30 分钟。

9. 向每个孔中加入 50 μL 终止液。立即以 450 nm 读取。

结果计算：

计算时，对每个参考标准和每个样品的 O.D.450 重复读数求平均值，然后减去平均对照（零）O.D.450 读数。标准曲线可以绘制为每种参比标准溶液[Y]的相对外径450与每种标准溶液（X）的相应浓度的关系。样品的Asprosin浓度可以从标准曲线中插值。

检测精密度：

测定内精密度（测定内精密度）：在一个平板上分别测试3个低、中、高水平Asprosin样品20次。

批间精密度（测定间精密度）：在 3 个不同的平板上测试 3 个含有低、中、高水平 Asprosin 的样品，每个平板重复 8 次。

CV （%） =（标准偏差/平均值） × 100 批内：CV<10%批间：CV<12%

仅供研究使用。 范围和灵敏度可能会发生变化。

作为在中国的区域Abbexa代理，艾美捷将为中国客户提供全面的Abbexa产品以及客户订制化服务。

https://www.amyjet.com/brand/Abbexa.shtml

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Abbexa/艾美捷人I型前胶原N端前肽（PINP）ELISA试剂盒

I型胶原蛋白存在于软结缔组织和骨骼中，占有机物的90%以上 矩阵。在骨形成过程中，I型胶原蛋白由I型原胶原合成，I型胶原由成纤维细胞分泌，并且 成 骨 细胞。I 型原胶原含有 N 端和 C 端延伸，这些延伸在 将原胶原转化为胶原蛋白。这些延伸被称为 I 型前胶原的 C 端和 N 端前肽 （PICP 和 PINP）。

Abbexa/艾美捷人原胶原 I N 端前肽 （PINP） ELISA 试剂盒是一种 ELISA 试剂盒，用于体外定量测定血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、细胞裂解物和其他生物体液中人原胶原 I N 端前肽 （PINP） 浓度。该测定法对检测原胶原 I N 端前肽 （PINP） 具有高灵敏度和出色的特异性，

未观察到前胶原 I N 端前肽 （PINP） 与类似物之间存在显着的交叉反应性或干扰。

Abbexa人I型前胶原N端前肽（PINP）ELISA试剂盒相关参数说明：

目标 I 型前胶原 N 末端前肽 （PINP）

反应 人

经测试的应用程序 酶联免疫吸附

推荐稀释度 最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。

存储 在 4 °C 下运输。 收到后，根据套件手册中的存储说明存放套件。

有效性 该套件的有效期为 6 个月。

稳定性 试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的储存条件下，保质期内的损失率小于5%。为了尽量减少性能波动，应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个检测过程由同一用户全程进行。

测试范围 78 皮克/毫升 - 5000 皮克/毫升

敏感性 < 31 皮克/毫升

标准表格 冻

检测方法 色度

检测类型 三明治

检测数据 定量的

样品类型 血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、细胞裂解物和其他生物体液。

目标类型 抗原

检测原理 该试剂盒基于夹心酶联免疫吸附测定技术。将抗体预包被到 96 孔板上。将标准品、测试样品和生物素偶联试剂加入孔中并孵育。然后加入HRP偶联试剂，孵育整个板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的偶联物。TMB 底物用于定量 HRP 酶促反应。加入TMB底物后，只有含有足够PINP的孔才会产生蓝色产物，然后在加入酸性终止溶液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的 PINP 量成正比。在酶标仪中以450nm处的分光光度法测量光密度（OD），从中可以计算出PINP的浓度。

套件组件：

列出的套件组件仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册上的规定使用，并与产品一起交付。

预涂 96 孔微孔板

标准

标准稀释缓冲液

洗涤缓冲液

检测试剂A

检测试剂B

稀释剂 A

稀释剂B

TMB底板

停止解决方案

板式封口机

需要但未提供的材料：

37°C培养箱

多通道和单通道移液器以及无菌移液器吸头

喷瓶或自动洗板机

1.5毫升管

蒸馏水

吸水性滤纸

100 毫升和 1 升量筒

酶标仪（波长：450 nm）

ELISA振荡器

测定内精密度：

在一个平板上分别测试3个低、中、高水平前胶原I N-末端前肽（PINP）的样品20次。

批间精密度（检测之间的精密度）：在 3 个不同的平板上测试了 3 个具有低、中、高水平 Procollagen I N 末端前肽 （PINP） 的样品，每个平板重复 8 次。

CV （%） =（标准偏差/平均值） × 100 批内：CV<10%批间：CV<12%

仅供研究使用。 范围和灵敏度可能会发生变化。

作为在中国的区域Abbexa代理，艾美捷将为中国客户提供全面的Abbexa产品以及客户订制化服务。

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BioXCell/艾美捷重组MAb人IgG4（S228P）同型对照，抗鸡蛋溶菌酶

BioXCell的这种人 IgG4 S228P 同型对照抗体与鸡蛋溶菌酶反应，与任何人类样本的特异性结合都很低或没有特异性。包括 S228P 突变以防止 IgG4 Fab 交换。这是一种在CHO细胞中产生的重组人IgG4抗体。

BioXCell/艾美捷重组MAb人IgG4（S228P）同型对照，抗鸡蛋溶菌酶规格：

同种型 人IgG4， κ

推荐稀释缓冲液 InVivo公司纯 pH 7.0 稀释缓冲液

突变 S228P系列

免疫原 鸡蛋溶菌酶（HEL）

配方 PBS，pH 7.0

不含稳定剂或防腐剂

内毒素 <1EU/mg （<0.001EU/μg）

通过鲎试剂凝胶凝固测定法测定

集合体 <5%

由 SEC 决定

纯度 >95%

由 SDS-PAGE 确定

无 菌 0.2 μm 过滤

生产 在无动物设施中从 CHO 细胞上清液中纯化

纯化 蛋白A

RRID公司 AB_2894768

分子量 150 kDa

鼠类病原体检测 瘧膜炎/鼠痘病毒： 阴性汉坦病毒： 阴性 K 病毒： 阴性

乳酸脱氢酶升华病毒： 阴性淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒： 阴性小鼠腺病毒： 阴性小鼠巨细胞病毒： 阴性小鼠肝炎病毒： 阴性小鼠微小病毒： 阴性小鼠诺如病毒： 阴性小鼠细小病毒： 阴性

小鼠轮状病毒：阴性肺支原体：阴性

小鼠肺炎病毒：阴性 多瘤病毒：阴性呼肠孤病毒筛查：阴性 仙台病毒：阴性 泰勒鼠脑脊髓炎：阴性

存储 抗体溶液应以 4°C 的储备浓度储存。 不要冷冻。

BioXCell重组MAb人IgG4（S228P）同型对照，抗鸡蛋溶菌酶相关研究：

重组MAb小鼠IgG2a（D265A）同型对照，抗鸡蛋溶菌酶

重组MAb人IgG1（LALA-PG）同型对照，抗鸡蛋溶菌酶

重组单克隆抗体人IgG4 S228P L235E P329G（SPLEPG）同型对照，抗鸡蛋溶菌酶

InVivoSIM单克隆抗体多克隆llama IgG （克隆多克隆）

InVivoSIM单克隆抗体小鼠IgG2c同种型对照，抗登革热病毒（克隆DV5-1）

InVivoPlus人 IgG2 同种型对照

InVivoPlus单克隆抗体人 IgG2 同型对照

InVivoPlus单克隆抗体人 IgG1 同种型对照

InVivoPlus人 IgG1 同种型对照

InVivoPlus大鼠 IgG1 同型对照，抗三硝基苯酚

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BioXCell/艾美捷InVivoSIM抗人PD-1（帕博利珠单抗生物类似药）

BioXCell的这种非治疗性生物仿制药抗体使用与治疗性抗体 Pembrolizumab 相同的可变区域，使其成为研究用途的理想选择。这种帕博利珠单抗生物类似药与人PD-1（程序性死亡-1）反应，也称为CD279。PD-1 是由 Pdcd1 基因编码的 50-55 kDa 细胞表面受体，属于 Ig 超家族的 CD28 家族。PD-1 在 CD4 和 CD8 胸腺细胞以及活化的 T 和 B 淋巴细胞和髓系细胞上瞬时表达。成功消除抗原后PD-1表达下降。此外，Pdcd1 mRNA 在 pro-B 细胞阶段在发育中的 B 淋巴细胞中表达。PD-1 的结构包括一个 ITIM（基于免疫受体酪氨酸的抑制基序），表明 PD-1 负调控 TCR 信号。PD-1 通过结合其两个配体 PD-L1 和 PD-L2 发出信号，它们都是 B7 家族的成员。配体结合后，PD-1 信号转导抑制 T 细胞活化，导致增殖、细胞因子产生和 T 细胞死亡减少。此外，已知PD-1在外周耐受和预防自身免疫性疾病中起关键作用。诱导的 PD-L1 表达在许多肿瘤中很常见，包括鳞状细胞癌、结肠腺癌和乳腺癌。PD-L1 过表达导致肿瘤细胞对 CD8 T 细胞介导的裂解的耐药性增加。PD-L1 过表达导致肿瘤细胞对 CD8 T 细胞介导的裂解的耐药性增加。在黑色素瘤的实验模型中，肿瘤生长可以通过阻断 PD-L1 与其受体 PD-1 之间相互作用的抗体治疗来暂时阻止。由于这些原因，抗PD-1介导的免疫疗法目前被用作癌症治疗。帕博利珠单抗与活化免疫细胞上的PD-1结合，选择性阻断PD-1与其配体的相互作用。

BioXCell/艾美捷InVivoSIM抗人PD-1（帕博利珠单抗生物类似药）规格：

同种型 人IgG4

推荐的同型对照品 重组MAb人IgG4（S228P）同型对照，抗鸡蛋溶菌酶

推荐稀释缓冲液 InVivo公司纯 pH 7.0 稀释缓冲液

免疫原 人PD-1

报告的应用程序 阻断 PD-1/PD-L 信号转导

功能检测

配方 PBS，pH 7.0

不含稳定剂或防腐剂

内毒素 <1EU/mg （<0.001EU/μg）

通过鲎试剂凝胶凝固测定法测定

集合体 <5%

由 SEC 决定

纯度 >95%

由 SDS-PAGE 确定

无 菌 0.2 μm 过滤

生产 从细胞培养上清液中纯化

纯化 蛋白A

RRID公司 AB_2894731

分子量 150 kDa

鼠类病原体检测 瘧膜炎/鼠痘病毒： 阴性汉坦病毒： 阴性 K 病毒： 阴性

乳酸脱氢酶升华病毒： 阴性淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒： 阴性小鼠腺病毒： 阴性小鼠巨细胞病毒： 阴性小鼠肝炎病毒： 阴性小鼠微小病毒： 阴性小鼠诺如病毒： 阴性小鼠细小病毒： 阴性

小鼠轮状病毒：阴性肺支原体：阴性

小鼠肺炎病毒：阴性 多瘤病毒：阴性呼肠孤病毒筛查：阴性 仙台病毒：阴性 泰勒鼠脑脊髓炎：阴性

存储 抗体溶液应以 4°C 的储备浓度储存。 不要冷冻。

BioXCellInVivoSIM抗人PD-1（帕博利珠单抗生物类似药）相关研究：

InVivoSIM单克隆抗体抗人PD-1（CD279）（克隆J110）

InVivoSIM单克隆抗体抗人PD-1（CD279）（克隆J116）

重组单抗小鼠PD-1（CD279）（克隆29F.1A12-CP159™）

重组单克隆抗体抗小鼠PD-1（CD279）（LALA-PG）（克隆RMP1-14-CP153）

重组单克隆抗体抗小鼠PD-1（CD279）（D265A）（克隆RMP1-14-CP002）

重组单克隆抗小鼠PD-1（CD279）（克隆29F.1A12-CP004™）

重组单克隆抗体抗小鼠PD-1（CD279）（D265A）（克隆29F.1A12-CP005™）

重组单抗小鼠PD-1（CD279）（克隆RMP1-14-CP165）

重组单克隆抗体抗小鼠PD-1（CD279）（LALA-PG）（克隆29F.1A12-CP155™）

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PeproTech/艾美捷GMP级别细胞因子 - 常见问题解答

1. 我可以使用PeproTech/艾美捷PeproGMP®细胞因子进行研究性产品的GMP生产和商品化治疗产品的生产吗？

是的，PeproGMP®细胞因子可用于GMP级别生产研究性或已上市的临床产品，如细胞治疗、基因治疗、组织工程产品、复合制剂或其它先进的医疗产品。

然而，PeproGMP®细胞因子本身不是治疗性产品或辅药，因此不可直接用于人体。更多信息，请参阅美国药典(USP)第1043章：“用于细胞、基因和组织工程产品的辅助材料”。

2. PeproGMP®细胞因子的风险性归于哪类？

在美国药典(USP)第1043章中，PeproGMP®细胞因子的风险性被归为第2层级：

级别1：低风险，高质量的材料(治疗性药物或生物制剂，医疗器械)。

级别2：遵循GMP规范生产的低风险、充分鉴定过的材料，并意图用作辅助材料。

级别3：中等风险，不作为辅助材料使用。

级别4：高风险材料。

3. PeproGMP®细胞因子的生产设施是美国FDA认证过的吗？美国FDA是否检查过PeproTech？我们的质量保证(QA)部门如何确认PeproTech公司的资质以及PeproGMP®细胞因子是否合格？

美国FDA不对辅助试剂的生产设施进行检查或GMP认证。在某些国家，其国家监管机构对各类产品的GMP生产设施均进行检查和认证，但美国FDA的GMP检查仅限于治疗产品和医疗器械。

PeproGMP®细胞因子是在符合ISO 9001的质量体系下，遵循GMP管理规范进行生产的。生产、测试、标签和包装等各方面均受到PeproTech QA部门的严格控制、验证和监视。PeproTech对PeproGMP®产品线的所有产品均提供详细的产品分析报告(CoA)和安全数据说明书(SDS)。

4. PeproGMP®细胞因子是无动物源和人源成分的吗？

是的。PeproGMP®产品线中的细胞因子均是使用化学成分明确的培养基、酶和化学品生产出来的，其中没有一种原材料是动物或人源的。

5. PeproGMP®细胞因子与PeproTech研究级别细胞因子的生物活性一样吗？

一样的。PeproGMP®细胞因子在功能上与对应的科研级别细胞因子相同。

6. PeproGMP®细胞因子是如何运输的？

PeproGMP®细胞因子制成冻干粉后，能在很宽的温度范围内保持稳定，因此一般是室温运输。根据客户的要求，并加收额外费用后，这些产品也可以用冰袋或干冰运输。

PeproTech部分热门研究产品：

货号 名称 规格

PEP-200-01A-10UG Recombinant Human IL-1α 10ug

PEP-200-01B-10UG Recombinant Human IL-1β 10ug

PEP-200-01Ra-100UG Recombinant Human IL-1RA 100ug

PEP-200-02-50UG Recombinant Human IL-2 50ug

PEP-200-02RC-25UG Recombinant Human sIL-2 Receptor α (CHO derived) 25ug

PEP-200-03-10UG Recombinant Human IL-3 10ug

PEP-200-04-20UG Recombinant Human IL-4 20ug

PEP-200-05-10UG Recombinant Human IL-5 10ug

PEP-200-06-20UG Recombinant Human IL-6 20ug

PEP-200-06RC-20UG Recombinant Human sIL-6 Receptor α (CHO derived) 20ug

PEP-200-07-10UG Recombinant Human IL-7 10ug

PEP-200-08-25UG Recombinant Human IL-8 (CXCL8) (77 a.a.) 25ug

PEP-200-17-25UG Recombinant Human IL-17A 25ug

PEP-212-12-20UG Recombinant Murine IL-2 20ug

PEP-213-13-10UG Recombinant Murine IL-3 10ug

PEP-214-14-20UG Recombinant Murine IL-4 20ug

PEP-215-15-25UG Recombinant Murine IL-5 25ug

PEP-216-16-10UG Recombinant Murine IL-6 10ug

PEP-217-17-10UG Recombinant Murine IL-7 10ug

PEP-219-19-10UG Recombinant Murine IL-9 10ug

PEP-220-11-10UG Recombinant Murine IL-11 10ug

PEP-AF-100-08-25UG Animal-Free Recombinant Human IGF-BP3 25ug

PEP-AF-100-15-500UG Animal-Free Recombinant Human EGF 500ug

PEP-AF-120-05ET-10UG Animal-Free Recombinant Human BMP-4 (E.coli derived) 10ug

PEP-AF-120-14E-10UG Animal-Free Recombinant Human/Murine/Rat Activin A (E.coli derived) 10ug

PEP-AF-200-01A-2UG Animal-Free Recombinant Human IL-1α 2ug

PEP-AF-200-01B-10UG Animal-Free Recombinant Human IL-1β 10ug

PEP-AF-200-01RA-100UG Animal-Free Recombinant Human IL-1RA 100ug

PEP-AF-200-02-10UG Animal-Free Recombinant Human IL-2 10ug

PEP-AF-200-03-10UG Animal-Free Recombinant Human IL-3 10ug

PEP-AF-200-04-20UG Animal-Free Recombinant Human IL-4 20ug

PEP-AF-200-05-10UG Animal-Free Recombinant Human IL-5 10ug

PEP-AF-200-06-20UG Animal-Free Recombinant Human IL-6 20ug

PEP-AF-200-07-10UG Animal-Free Recombinant Human IL-7 10ug

PEP-AF-200-08M-25UG Animal-Free Recombinant Human IL-8 (CXCL8) (72 a.a.) 25ug

PEP-AF-200-09-10UG Animal-Free Recombinant Human IL-9 10ug

PEP-AF-200-10-10UG Animal-Free Recombinant Human IL-10 10ug

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PeproTech/艾美捷常见问题 - RUO细胞因子

1. PeproTech/艾美捷的蛋白产品的稳定性如何？

除非在产品说明书中特别注明，PeproTech的所有产品均为冻干粉，在室温条件下非常稳定。尽管如此，PeproTech建议您将冻干产品保存在-20oC至-80oC。

对于大多数产品，重悬后在4oC仅能短期保存。如想长期保存，请用含载体蛋白(如0.1% BSA)的溶液稀释已重悬的蛋白，然后分装、冻存于-20oC至-80oC。分装浓度要求不低于1 µg/ml，每管体积要求不小于10µl。

务必注意，请避免反复冻融，因每次冻融均可能引起蛋白的部分变性。因此，我们建议分装的蛋白溶液冻融不要超过1次。

2. PeproTech重组蛋白的内毒素水平如何？

PeproTech大部分无动物成分级别蛋白的内毒素水平均保证低于0.01 ng/µg蛋白，即0.1 EU/µg蛋白。对于大多数非无动物成分级别的蛋白，内毒素水平保证低于0.1 ng/µg蛋白，即1 EU/µg。其实，许多蛋白的实际内毒素含量均低于上面标称的内毒素水平。

3. 为什么我在管中看不到蛋白团块？

与市场上的许多蛋白产品不同，PeproTech的产品中不含任何载体蛋白和其它添加物 (如BSA, HSA和蔗糖等)，因此在冻干时微量的蛋白可能会在管内形成一个薄层，有时肉眼不可见。我们建议，在打开管盖前用小离心机快速离心20-30秒，使附着在管盖或管壁上的蛋白团块聚集于管底。尽管可能看不到蛋白团块，但我们的质控程序保证每管中的蛋白含量准确无误。

4. 哪些细胞因子有种属交叉活性？

除少数例外，大多数人细胞因子对小鼠细胞均有活性，很多小鼠细胞因子也可作用于人，但反应的特异性可能低于对应的人细胞因子。干扰素，GM-CSF, IL-3和IL-4等细胞因子的种属特异性很强，与其它种属细胞的交叉反应活性非常弱。相反，成纤维细胞生长因子(FGF)和神经营养素(neurotrophins)等高度保守，在不同动物种属细胞上均呈现良好的生物学活性。

5. ED50和units/mg均用来表示比活性(specific activity)，两者之间有什么关联？

ED50的定义是可诱导50%最大反应的细胞因子浓度，而比活性(specific activity)是单位重量蛋白样品中所含的活性单位。比活性单位(Specific Activity Units)只能用于表示蛋白的效能，且仅适用于剂量反应曲线为S形的蛋白。以ng/ml为单位的ED50和以units/mg为单位的比活性之间的换算公式为：

6. 比活性单位(specific activity units)和活性的国际单位(International Units)之间有什么关联？

比活性单位和国际单位(IU)之间没有直接的关联，不能相互换算。

国际单位(IU)是与国际标准品的活性单位(即IU/ng)比对后得出的活性数值，后者是在世界卫生组织(WHO)领导的国际合作研究中确定的。WHO国际标准品由英国国家生物制品检定所(NIBSC)制备和提供。

简单地与国际标准品比对而得出的蛋白活性国际单位(IU)常会出现偏差，原因是每个蛋白厂家所用的活性检测方法很难一致，从而导致与国际标准品比对后得到的国际单位(IU)值相互间不具可比性。想要实现真正的可比性，必须建立标准的活性检测方法，以保证所得出的蛋白活性国际单位(IU)值仅与蛋白的质量有关，而与蛋白的来源无关。

7. PeproTech是怎样得到蛋白活性的国际单位(IU)值的？

在可能的情况下，PeproTech通过将自己的产品与对应的WHO标准品在自已的生物活性测试中进行多次平行比对来得出国际单位(IU)值。多次对比可保证我们能够排除因测试本身的不稳定性(如产品批次，使用方法和测试方案等的变异性)而导致的异常值的出现。经多次比对得出的结果可对PeproTech产品的国际单位(IU)值进行可靠的定量。

作为在中国的区域PeproTech代理，艾美捷将为中国客户提供全面的PeproTech产品以及客户订制化服务。

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Jackson/艾美捷有关抗体的结构问题分析

1. 什么是抗体亚类？

免疫球蛋白类别（哺乳动物中的 IgA、IgD、IgE、IgG、IgM）由其重链的结构定义。在每一类的亚类之间发现重链的细微差异。 Jackson ImmunoResearch 提供对小鼠亚类 IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c 和 IgG3 具有特异性的多克隆抗体。Jackson也有针对骆驼亚类 IgG 2+3 的特异性抗体。Jackson目前没有针对其他物种的亚类特异性抗体。、

2. Fab、Fc 和 F（ab'） 有什么区别2碎片？

这些产物是蛋白水解消化IgG的结果。用木瓜蛋白酶消化产生 Fab 和 Fc 片段，用胃蛋白酶消化产生 F（ab'）2碎片。

3. 什么是抗体同种型？

同种型是抗体重链和轻链的不同形式，可指类或亚类。轻链同种型为κ和λ，重链同种型为α（IgA）、δ（IgD）、ε（IgE）、γ（IgG）、μ（IgM）。重链可以进一步分化为亚类，例如γ1（IgG1）。

4. 什么是同型对照？

同种型是抗体重链和轻链的不同形式，可指类或亚类。轻链同种型为κ和λ，重链同种型为α（IgA）、δ（IgD）、ε（IgE）、γ（IgG）、μ（IgM）。重链可以进一步区分为亚类，例如γ1（IgG1）。

同型对照是一种阴性对照，用于验证一抗或二抗的特异性结合。同型对照与实验抗体相同类别或亚类，但对抗原靶标不具有特异性。同型对照可以从实验抗体的物种宿主的正常血清中纯化IgG;或者在单克隆抗体的情况下，可以是同一亚类的单克隆抗体，针对不相关的抗原。未标记抗体的同型对照是未标记的，标记抗体的对照用与实验抗体相同的报告分子（荧光团、酶或生物素）标记。

Jackson产品主要包括：各种纯化的二抗、标记的二抗（AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、长臂生物素、辣根酶和碱磷酶标记）、试剂等。

作为在中国的区域Jackson代理，艾美捷将为中国客户提供全面的Jackson产品以及客户订制化服务。

https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml

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Jackson/艾美捷：如何使用偶联二抗进行多重标记？

多重标记，可同时检测多个靶标

多重标记是通过免疫荧光或比色 IHC/ICC 检测多种抗原的序贯免疫标记过程。成功检测出一种以上的抗原需要合理的实验设计，同时考虑到每个实验步骤积累的大量变量。在这里，Jackson详细介绍了如何设置多重标记实验以及执行成功检测所必需的一些注意事项。

设计多重标记实验

同时检测一种以上抗原的抗体的选择至少取决于两个重要标准：

1、无法识别的二抗的可用性：

彼此（来自相同的宿主物种），

测定系统中使用的其他一抗，

内源性免疫球蛋白存在于所研究的组织或细胞中。

2、使用分离良好的探针（酶反应产物、荧光团或电子致密粒子）。

（标有“ML”（多重标记）的亲和纯化抗体专为满足这些标准而制备。它们包括小鼠 IgG 亚类特异性抗体和针对其他物种交叉吸附 （min X） 的抗体。）

Jackson/艾美捷多重标签示例：

注意：在本例中，使用的二抗不会相互调和，因为它们都是在驴中制造的。它们已被固相吸附，因此它们无法识别步骤 2、5 和 8 中使用的其他一抗 （min X）。此外，它们不与内源性小鼠 Ig 发生反应，内源性小鼠 Ig 可能存在于小鼠组织中。

注意：不要用正常血清稀释任何抗体或将抗体混合在一起以节省时间，因为这可能会导致免疫复合物的形成和背景增加。

多标记协议生成器

此工具可能有助于设计您的实验。它将应用上述标准来确定一抗之间的潜在交叉反应性，从而确定每种二抗所需的最小交叉反应性。

输入样品种类和要使用的抗体。所有二抗最好使用相同的宿主物种，以尽量减少交叉反应的可能性。可以通过直接编辑表格中的文本来自定义抗原名称。

请注意，即使工具指示，也可能无法提供所有潜在的最小交叉反应性排列。山羊和驴通常是合适的二抗宿主物种选择，因为交叉反应性选择极少。

标记来自同一宿主物种的一抗

亲和纯化的二抗的单价 Fab 片段用于覆盖（阻断）免疫球蛋白表面，以双重标记来自同一宿主物种的一抗，或阻断组织切片或细胞表面的内源性免疫球蛋白。它们可用于这些目的，因为 Fab 片段只有一个抗原结合位点（即它们是单价的）。

标记与样品相同物种的一抗

有时可能需要使用与样品相同物种的一抗，例如Mouse on Mouse。在这些情况下，二抗也可能检测到内源性免疫球蛋白，从而引起不需要的背景。这可以通过Fab片段阻断来避免。

其他注意事项

阻塞

对于一般封闭目的，来自与二抗宿主相同的物种的正常血清 （5% v/v） 可有效降低非特异性、保守序列和/或 Fc 受体结合的背景。

抗体的特异性有害反应可以用二抗的单价Fab片段阻断。这种类型的封闭适用于标本和一抗属于同一物种的情况（例如小鼠标记上的小鼠），或者当在同一宿主动物中产生多种一抗时。

可视化

成功的多重标记取决于探头的使用，其信号可以通过可用设备进行区分。

荧光显微镜是多重标记的通用平台，因为滤光片组被设计用于区分许多可用的荧光团。窄带通发射滤光片对于从多个荧光基团分离信号、抑制重叠光谱中的荧光检测至关重要。在规划多标记方案时，应从荧光基团配制染料组合，该荧光基团具有与现有仪器兼容的发射光谱。

酶联抗体也可以实现多重标记。用一抗和二抗标记抗原位点，然后用显色底物（如 DAB、TMB 或 AEC）显色。其他抗原位点按顺序标记，每个抗原位点使用不同的显色剂。

对于电子显微镜中的多重标记，不同大小的胶体金颗粒与二抗复合，可以清晰地显示不同的抗原位点。

控制

在执行多重标记方案之前，优化每个一抗/二抗对的条件。滴定一抗和二抗将识别低背景和合适的阳性信号的情况。为了证明每种二抗对其预期一抗的特异性，请尝试用“错误”的二抗（阴性对照）标记一抗。

当使用在与标本物种相同的宿主中产生的一抗时（例如小鼠对小鼠），对照可用于确定非特异性信号的水平。

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