快速内切酶DpnII/C-BSM533，快速酶切

快速内切酶DpnII/C-BSM533，快速酶切

FlyCut™ 快速内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶，适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。所有 FlyCut™ 快速内切酶在通用的 CutOne™ 或 CutOne™ Color Buffer 中都具有优良的活性，能够在 5~15 分钟内完成酶切。此外，百时美去磷酸化、连接试剂在 CutOne™ Buffer 中均具有 100% 活性，支持一管化反应，提升“酶切 - 修饰 - 连接”的体验。CutOne™ Color Buffer包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。CutOne™ Color Buffer 的红色染料与 2500 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与 10 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

艾美捷快速内切酶DpnII：

Cat #: C-BSM533

Size: 50 rxns

Storage: -20°C

快速内切酶DpnII组分：

推荐反应条件

1xCutOne“”缓冲区；37°C培养；有关反应设置，请参阅“快速DNA消化方案”。

热灭活

在80°C下培养20分钟。

质量控制

功能测试

在含有1μgλDNA（Dam）和1μl FlyCut“”Dpnll的CutOne“缓冲液中，在37℃下孵育15分钟，反应20μl，琼脂糖凝胶电泳测定完全消化。

长时间培养/星形活性测定

在含有1μgλDNA（Dam）和1μl FlyCut“”Dpnll的CutOne“”缓冲液中，在37°C下孵育3小时，进行20μl反应，通过琼脂糖凝胶电泳测定，产生无可检测核酸酶降解的DNA模式。较长的孵化时间可能导致恒星活动。

结扎和清算

在37℃下用FlyCut“”Dpnll消化10倍后，>95%的DNA片段可以与22°C的T4 DNA配体连接。在这些连接的片段中，通过琼脂糖凝胶电泳测定，>95%可以用FlyCut“Dpnll重新切割。

非特异性核酸内切酶活性

在含有1μg超螺旋质粒和1μl FlyCut“”Dpnll的CutOne“”缓冲液中进行20μl反应，在37°C下孵育4小时，通过琼脂糖凝胶电泳测定，转化为刻痕或线性形式的转化率<10%。

在推荐的反应条件下，该酶可在5~15分钟内消化单位底物。酶的最适反应温度为37°C。

当底物DNA被DAM甲基化酶甲基化时，这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

当底物DNA被EcoBI甲基化酶甲基化时，这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

该酶在80°C下保温20分钟即可热灭活，保温3小时不显示星形活性，但保温时间较长可能会产生星形活性。

https://www.amyjet.com/products/C-BSM533-50rxns.shtml

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快速内切酶EagI/C-BSM535方案

FlyCut™ 酶是一系列能够快速消化DNA的工程限制性酶。所有FlyCut™酶在通用CutOne中显示出优异的活性™ 和CutOne™ 彩色缓冲液，能够在5~15分钟内消化DNA。这使得任何限制性酶的组合都能在一个反应管中同时工作，并消除了连续消化的需要。FlyCut™ 酶已通过多项严格的质量控制，可用于消化质粒、基因组和病毒DNA以及PCR产物。CutOne™ Color Buffer包括密度试剂以及红色和黄色跟踪染料，可以将反应混合物直接装载在凝胶上。CutOne的红色染料™ 彩色缓冲液在1%琼脂糖凝胶中与2.5kb的双链DNA片段迁移，黄色染料在1%琼脂凝胶中与10bp的双链脱氧核糖核酸片段迁移。

艾美捷快速内切酶EagI：

Cat #: C-BSM535

Size: 25 rxns

Storage: -20°C

快速内切酶EagI组分：

推荐反应条件

1xCutOne“缓冲液；在37°C下培养；有关反应设置，请参阅“快速DNA消化方案”。

热灭活

在80°C下培养20分钟。

质量控制

功能测试

在含有1μgλDNA（Hindll消化物）和1μl FlyCut“”Eagle的CutOne“”缓冲液中，在37℃下孵育15分钟，反应20μl，琼脂糖凝胶电泳测定完全消化。

长时间培养/星形活性测定

在含有1μgλDNA（Hindlll消化物）和1μl FlyCut’Eagle的CutOne“缓冲液中，在37℃下孵育3小时，反应20μl，通过琼脂糖凝胶电泳测定，产生无可检测核酸酶降解的DNA模式。较长的孵育时间可能导致星形活性。

结扎和清算

在37°C下用FlyCut“”Eagle消化10倍后，>95%的DNA片段可以与22°C的T4 DNA配体连接。在这些连接的片段中，通过琼脂糖凝胶电泳测定，>95%可以用FlyCut“”Eagle重新切割。

非特异性核酸内切酶活性

在含有1μg超螺旋质粒和1μl FlyCut“”Eagle的CutOne“”缓冲液中，在37°C下孵育4小时，20μl反应可使琼脂糖凝胶电泳测定的镍或线性形式的转化率<10%。

蓝/白筛选试验

用1μl FlyCut消化含有lacZα基因的合适载体™ 伊格。将消化产物连接并转化为大肠杆菌感受态细胞。在含有X-Gal、IPTG和适当抗生素的Luria Bertani培养板上，成功连接的β-半乳糖苷酶基因可以表达并产生蓝色菌落，而中断基因（即降解的DNA末端）产生白色菌落。FlyCut™ 限制性内切酶必须产生少于1%的白色菌落。

在推荐的反应条件下，该酶可在5~15分钟内消化单位底物。酶的最适反应温度为37°C。

当底物DNA被CpG甲基化酶甲基化时，这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

该酶在80°C下保温20分钟即可热灭活，保温3小时不显示星形活性，但保温时间较长可能会产生星形活性。

https://www.amyjet.com/products/C-BSM535-25rxns.shtml

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快速内切酶EcoRI/ C-BSM536解决方案

FlyCut™ 酶是一系列能够快速消化DNA的工程限制性酶。所有FlyCut™酶在通用CutOne中显示出优异的活性™ 和CutOne™ 彩色缓冲液，能够在5~15分钟内消化DNA。这使得任何限制性酶的组合都能在一个反应管中同时工作，并消除了连续消化的需要。FlyCut™ 酶已通过多项严格的质量控制，可用于消化质粒、基因组和病毒DNA以及PCR产物。CutOne™ Color Buffer包括密度试剂以及红色和黄色跟踪染料，可以将反应混合物直接装载在凝胶上。CutOne的红色染料™ 彩色缓冲液在1%琼脂糖凝胶中与2.5kb双链DNA片段一起迁移，黄色染料在1%琼脂凝胶中与10bp双链DNA碎片一起迁移。

艾美捷快速内切酶EcoRI：

Cat #: C-BSM536

Size: 600 rxns

Storage: -20°C

快速内切酶EcoRI组分：

推荐反应条件

1x CutOne“”缓冲器；在37°C下培养；有关反应设置，请参阅“快速DNA消化方案”。

热灭活

在80°C下培养20分钟。

质量控制

功能测试

在含有1μgλDNA和1μl FlyCut’EcoRI的CutOne“缓冲液中，在37°C下孵育15分钟，20μl反应可通过琼脂糖凝胶电泳确定完全消化。

长时间培养/星形活性测定

在含有1μgλDNA和1μl FlyCut“EcoRI的CutOne”缓冲液中，在37℃下孵育3小时，反应20μl，琼脂糖凝胶电泳检测到DNA模式没有可检测的核酸酶降解。长期孵育可能导致星形活性。

结扎和清算

用FlyCut’“EcoRl在37℃下消化10倍后，在22℃下可将>95%的DNA片段与T4 DNA连接物连接。琼脂糖凝胶电泳测定，在这些连接的片段中，>95%的片段可用FlyCut”EcoRI重切。

非特异性核酸内切酶活性

在含有1μg超螺旋质粒和1μl FlyCut’’EcoRI的CutOne“缓冲液中，在37℃下孵育4小时，20μl反应可使琼脂糖凝胶电泳测定的刻痕或线性化形式的转化率<10%。

蓝/白筛选试验：

用1μl FlyCut消化含有lacZα基因的合适载体™ EcoRI。将消化产物连接并转化为大肠杆菌感受态细胞。在含有X-Gal、IPTG和适当抗生素的Luria Bertani培养板上，成功连接的β-半乳糖苷酶基因可以表达并产生蓝色菌落，而中断基因（即降解的DNA末端）产生白色菌落。FlyCut™ 限制性内切酶必须产生少于1%的白色菌落。

在推荐的反应条件下，该酶可在5~15分钟内消化单位底物。酶的最适反应温度为37°C。

当底物DNA被CpG甲基化酶甲基化时，这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

当底物DNA被EcoBI甲基化酶甲基化时，这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

该酶在80°C下保温20分钟即可热灭活，保温3小时不显示星形活性，但保温时间较长可能会产生星形活性。

https://www.amyjet.com/products/C-BSM536-600rxns.shtml

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快速内切酶EcoRV，快速DNA消化方案

FlyCut™ 酶是一系列能够快速消化DNA的工程限制性酶。所有FlyCut™酶在通用CutOne中显示出优异的活性™ 和CutOne™ 彩色缓冲液，能够在5~15分钟内消化DNA。这使得任何限制性酶的组合都能在一个反应管中同时工作，并消除了连续消化的需要。FlyCut™ 酶已通过多项严格的质量控制，可用于消化质粒、基因组和病毒DNA以及PCR产物。CutOne™ Color Buffer包括密度试剂以及红色和黄色跟踪染料，可以将反应混合物直接装载在凝胶上。CutOne的红色染料™ 彩色缓冲液在1%琼脂糖凝胶中与2.5kb双链DNA片段一起迁移，黄色染料在1%琼脂凝胶中与10bp双链DNA碎片一起迁移。

艾美捷快速内切酶EcoRV：

Cat #: C-BSM537

Size: 200 rxns

Storage: -20°C

快速内切酶EcoRV组分：

推荐反应条件

1x CutOne“”缓冲器；在37°C下培养；有关反应设置，请参阅“快速DNA消化方案”。

热灭活

在80°C下培养20分钟。

质量控制

功能测试

在含有1μgλDNA和1μl FlyCut“”EcoRV的CutOne“缓冲液中，在37°C下孵育15分钟，20μl反应可通过琼脂糖凝胶电泳确定完全消化。

长时间培养/星形活性测定

在含有1μgλDNA和1μl FlyCut“EcoRV的CutOne”缓冲液中，在37℃下孵育3小时，反应20μl，琼脂糖凝胶电泳检测到DNA模式没有可检测的核酸酶降解。长期孵育可能导致星形活性。

结扎和清算

在37℃下用FlyCut’“”EcoRV消化10倍后，在22°C下可将>95%的DNA片段与T4 DNA配体连接。在这些连接的片段中，通过琼脂糖凝胶电泳测定，>95%可以用FlyCut“”EcoRV重新切割。

非特异性核酸内切酶活性

在含有1μg超螺旋质粒和1μl FlyCut“”EcoRV的CutOne“缓冲液中，在37℃培养4小时，进行20μl反应，通过琼脂糖凝胶电泳测定，转化为刻痕或线性形式的转化率<10%。

蓝/白筛选试验

用1μl FlyCut消化含有lacZα基因的合适载体™ EcoRV。将消化产物连接并转化为大肠杆菌感受态细胞。在含有X-Gal、IPTG和适当抗生素的Luria Bertani培养板上，成功连接的β-半乳糖苷酶基因可以表达并产生蓝色菌落，而中断基因（即降解的DNA末端）产生白色菌落。FlyCut™ 限制性内切酶必须产生少于1%的白色菌落。

在推荐的反应条件下，该酶可在5~15分钟内消化单位底物。酶的最适反应温度为37℃。

当底物DNA被CpG甲基化酶甲基化时，这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

当底物DNA被EcoBI甲基化酶甲基化时，这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

该酶可以在80°C下孵育20分钟进行热灭活。孵育3小时不会显示星形活性，但孵育时间较长可能会导致星形活性。

快速DNA消化方案：

① 按照指示的顺序在冰上混合下列反应组分

Plasmid DNA    PCR product    Genomic DNA

ddH₂O    15μl   16μl    30μl

10x CutOne' Buffer or 10xCutOne Color Buffer2μl    3μl²    5μl

DNA    2μl(up to 1μg)   10μ(～0.2μg)    10μl(5μg)

FlyCut" EcoRV 1μl   1μl    5μl

Total    20μl   30μl    50μl

对于纯化的PCR产物。如果PCR产物未纯化，则10×CutOne的量™ 缓冲液应减少到2μl，以减少未纯化的PCR产物中剩余的金属离子。我们建议在消化前纯化PCR产物，将其用于克隆，因为一些DNA聚合酶的核酸外切酶活性可能会改变切割DNA的末端

② 轻轻混合并向下旋转；

③ 在37°C下培养15分钟（质粒DNA）或15～30分钟（PCR产物）或30～60分钟（基因组DNA）；

④可选：在80°C下加热20分钟使酶失活；

⑤如果CutOne™ 在反应中使用颜色缓冲液，将反应混合物的等分试样直接装入凝胶中。

https://www.amyjet.com/products/C-BSM537-200rxns.shtml

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AF 488偶联试剂盒详细信息及光谱图赏析

FlyLink™ 染料是一系列高度水溶性的荧光染料，跨越可见光和近红外光谱，用于标记生物分子，特别是蛋白质和核酸。FlyLink™ 染料具有不同荧光染料的核心结构，覆盖了从UV到NIR的荧光光谱。对核心结构的创新修改使FlyLink™ 染料优于其他商业染料，具有许多创新的新特性。我们的试剂盒已经预先激活，可以直接用于偶联。FlyLink™ 标签套件是为准备FlyLink而设计的™直接来自蛋白质、肽和其他含有游离氨基的配体的缀合物。

艾美捷AF 488偶联试剂盒：

Cat #: D-AKE520/D-AKE530/D-AKE540/D-AKE560/D-AKE580

Size: 100 μg*3

Storage: Stored at -20°C for 6 months, protected from light

AF 488偶联试剂盒信息：

图1：AF 488偶联试剂盒：FlyLink™ 488是一种绿色荧光染料，可由488nm氩激光线最佳激发，该激光线是FITC的替代品，Alexa Fluor 488。它产生生物学上更特异的缀合物和更少的背景。

图2:FlyLink™ 488光谱图

样品制备：

待标记样品的初始浓度应高于2 mg/mL。提示蛋白浓度在2.5mg/mL以上。否则，在实验之前需要增加蛋白质浓度。待标记样品的成分（或储存缓冲液）应符合以下要求：

（1） 不要含有氨基成分，否则会影响偶联效果。

（2） 少量BSA不会影响偶联效果。建议使用PBS作为存储缓冲液。

（3） 如果样品中含有可能干扰标记的物质，建议用PBS代替缓冲液。具体方法如下

将样品加入超滤膜中，加入200-150µL PBS。在12000 g、4°C、10分钟的温度下离心，然后滤出滤液。然后再次加入PBS，并在12000g，4°C，10分钟下离心。离心后，取出超滤管的内芯，将其置于干净的外管中，并在4000g，4℃，2分钟下离心以收集样品。

https://www.amyjet.com/products/D-AKE520-3.shtml

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AF 555偶联试剂盒数据分析&FAQ

FlyLink™ 染料是一系列高度水溶性的荧光染料，跨越可见光和近红外光谱，用于标记生物分子，特别是蛋白质和核酸。FlyLink™ 染料具有不同荧光染料的核心结构，覆盖了从UV到NIR的荧光光谱。对核心结构的创新修改使FlyLink™ 染料优于其他商业染料，具有许多创新的新特性。我们的试剂盒已经预先激活，可以直接用于偶联。FlyLink™ 标签套件是为准备FlyLink而设计的™直接来自蛋白质、肽和其他含有游离氨基的配体的缀合物

艾美捷AF 555偶联试剂盒：

Cat #: D-AKE520/D-AKE530/D-AKE540/D-AKE560/D-AKE580

Size: 100 μg*3

Storage: Stored at -20°C for 6 months, protected from light

AF 555偶联试剂盒信息：

图1：FlyLink™ 555是一种明亮且可光稳定的荧光染料，可由555 nmargonlaserline最佳激发，它是TRITC、Cy3和Alexa Fluor 555的超级替代品。它产生生物学上更特异的偶联物和无背景

图2：FlyLink™ 555光谱图

数据分析

1.共轭物浓度的计算：

C（mg/mL）=｛[A2so-（AmaxxCf）]÷1.4｝x稀释因子

式中：C，实验中收集的偶联物的浓度；稀释因子：光度测量中的稀释因子；

Azso和Ama：280 nm处的吸光度和最大吸收波长处的吸光度（最大

FlyLink“”AF 488的吸收波长为490 nm）；Cf：修正系数。FlyLink“”AF 488的Cf值为0.1；

1.4：gG的消光系数（mL/mg）。FlyLink“”AF 488的消光系数为70000。

2.共轭物标记度（DOL）的计算：

DOL=（AmaxMwtx稀释系数）÷（exC）

式中：Ama：在最大吸收波长（FlyLink“AF 488的最大吸收波长为490 nm）下的吸光度；Dilution factor：光度测量中的稀释因子；C：实验中收集的偶联物的浓度；Mwt：待标记样品的分子量；Ş：荧光染料的消光系数，FlyLink的消光系数”“488 AF是70000。

注：柱洗脱的缀合物可能过于浓缩，无法直接进行吸光度检测，因此需要稀释至合适的浓度（在蛋白质分析仪检测的浓度范围内）。稀释倍数（即稀释因子）需要根据初始样品质量和洗脱缀合物的总体积进行估计。如果未稀释，则稀释系数为1。

FAQ：

Q1：浓缩后，样品浓度仍低于2 mg/mL？

A1：如果浓缩后样品浓度仍低于2 mg/mL，则可以适当调整标记系统的体积，但最终浓度应大于1 mg/mL。FlyLink的音量™步骤1中的AF488标记溶液应为标记系统体积的10%。在步骤2中，去离子水可能不会结块，并且激活的FlyLink的体积™ 488解决方案保持不变。你也可以根据自己的实验做出适当的调整。

Q2：如何选择合适的纯化柱，以适应不同分子量的待标记样品

A2：纯化的柱适用于分子量为100KD至200KD的样品。如果样品的分子量大于200kD或小于100kD，则最好配备更合适的纯化柱尺寸。

Q3：待标记样品的分子量是否与FlyLink相似™ AF 488？

A3：如果样品的分子量与FlyLink相似™ AF 488，在完成与本说明书对应的标记步骤后，加入30µL 0.5µM NH4Cl，并在37°C下孵育10分钟，以猝灭freeFlyLink™AF 488，而不需要纯化步骤。

https://www.amyjet.com/products/D-AKE530-3.shtml

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链霉亲和素磁珠C-BETA2002操作方案

链亲和素磁珠，也称为SA磁珠，是2.8µm的超顺磁性颗粒，与高纯形式的链亲和素共价偶联。该珠可用于捕获生物素标记的底物，包括抗原、抗体和核酸。链霉亲和素磁珠可用于捕获生物素标记的底物，包括抗原、抗体和核酸。

艾美捷链霉亲和素磁珠：

目录：C-BETA2002

名称：链霉亲和素磁珠-2.8μm

平均直径：2.8μm

浓度：10 mg/ml

共轭：链亲和素

无菌/内毒素：无菌，无内毒素

蛋白质浓度：0.6 mg/10 mg珠子

尺寸：2mL/10mL/100mL

特异性：生物素化配体

缓冲液：1xPBS，pH 7.4,0.1%BSA，2mM EDTA

储存温度：2℃至8℃

保质期：2年

链霉亲和素磁珠协议：

1.捕获生物素化核酸

1.1为了确保均匀性，在使用前，用20秒的轻柔涡流将珠子充分混合。将100μL链霉亲和素磁珠加入1.5 mL微量离心管中。将试管放入磁性支架中，收集珠子。取出并丢弃上清液。

注：建议生物素化分子和磁珠之间使用1:1或2:1的比例，以实现磁珠结合的饱和。生物矿化分子的量需要根据实验条件进行优化。

1.2向试管中加入1mL洗涤缓冲液A。将管子倒置几次或轻轻地涡旋混合。用磁性支架收集珠子，然后取出并丢弃上清液，重复洗涤两次。

注：当使用体积大于1 mL的磁珠时，建议向磁珠中添加等量的洗涤缓冲液a。

1.3加入用洗涤缓冲液A稀释的500μL生物素化核酸（以达到2mg/mL的珠浓度），通过振荡充分混合，并在室温下在摇床上孵育30分钟或在4℃下孵育2小时。

1.4用磁性支架收集珠子，并将上清液移到新的试管中。

1.5重复“步骤1.2”两次，清洗磁珠。

1.6根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，使磁珠重新悬浮。生物素化核酸的捕获步骤现已完成。磁珠可以用于后续的实验操作。

2.捕获生物素化抗体/蛋白质

2.1为了确保均匀性，在使用前，用20秒的轻柔涡流将珠子充分混合。将100μL链霉亲和素磁珠加入1.5 mL微量离心管中。将试管放入磁性支架中，收集珠子。取出并丢弃上清液。

注：建议生物素化分子和磁珠之间使用1:1或2:1的比例，以实现磁珠结合的饱和。生物矿化分子的量需要根据实验条件进行优化。

2.2向试管中加入1mL洗涤缓冲液B。将管子倒置几次或轻轻地涡旋混合。用磁性支架收集珠子，然后取出并丢弃上清液，重复第三次洗涤。

注：当使用体积大于1毫升的磁珠时，建议在磁珠中加入等量的洗涤缓冲液B。

2.3加入用洗涤缓冲液B稀释的500μL生物素化抗体/蛋白质（以达到1mg/mL的珠浓度），通过摇动充分混合，并在室温下在摇动器上孵育1小时。

2.4用磁性支架收集珠子，并将上清液移到新的试管中。

2.5第五次重复“步骤2.2”，清洗磁珠。

2.6根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，使磁珠重新悬浮。生物素化抗体/蛋白质的捕获现已完成。磁珠可以用于后续的实验操作。

洗涤缓冲液：

注：

●将珠粒的pH值保持在6-8之间，避免冷冻和离心。

●避免将磁珠长时间暴露在磁场中，以防止磁珠聚集，从而降低结合活性。

●为了最大限度地减少磁珠的损失，磁分离时间应不少于1分钟。

●在制备生物素化样品的过程中，使用脱盐柱去除游离生物素。

●转移磁珠时，应通过摇动确保彻底再悬浮，并避免操作过程中出现气泡

本品仅供研究使用。

https://www.amyjet.com/products/C-BETA2002-100mL.shtml

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彗星法DNA损伤分析试剂盒，快速灵敏测试

彗星检测试剂盒（3孔载玻片）是一种单细胞凝胶电泳检测（SCGE），用于检测细胞中DNA损伤的快速灵敏测试。其原理是，在器官或组织遭受（如辐射、重金属等）后，细胞中的单链或双链DNA断裂，将细胞与融化的琼脂混合并放在玻片上，然后用裂解溶液破坏细胞膜，用碱性溶液解开DNA。最后，对样品进行电泳，在电场的作用下，正常细胞的大分子DNA迁移较短的距离，完整的DNA保留在细胞核的范围内，DNA碎片从细胞核中迁移出来，用PI染料染色，在荧光显微镜下观察，完整的脱氧核糖核酸形成圆形或微辫状；DNA碎片形成彗星状图案。根据电泳缓冲液的pH值，可分为中性彗星试验（pH=8.4）和碱性彗星试验（pH>13）。中性彗星法主要用于检测DNA双链断裂损伤，碱性彗星法具有较高的灵敏度，可用于检测较少的单链和双链断裂损害。

艾美捷彗星法DNA损伤分析试剂盒：

目录号：D-AKE3040

尺寸：15T

储存：在4°C下储存6个月，避光

彗星法DNA损伤分析试剂盒（3孔载玻片）:

套件组件尺寸（15T）储存条件

彗星载玻片（3孔）5 4℃

10×赖氨酸溶液15 mL 4℃

EDTA（500 mM）25 mL 4℃

琼脂（低熔点）15 mL 4℃

碘化丙啶（PI）（50x）20μL 4℃，避光

40 mM Tris-HCl（pH 7.5）15 mL 4℃

彗星法DNA损伤分析试剂盒试剂准备：

彗星幻灯片（3孔）：随附随用。使用前将其平衡至室温。在4℃下储存。10×赖氨酸溶液：供应即用。使用前将其平衡至室温。在4℃下储存。EDTA（500mM）：供应时即用。使用前将其平衡至室温。储存温度为4℃。

琼脂（低熔点）：将琼脂（低沸点）瓶在90-95°C的水浴中加热20min，直到琼脂液化。将瓶子转移到37°C水浴中20分钟以保持液态。将其余部分等分并在4℃下储存。

碘化丙啶（PI）（50×）：使用前新鲜制备，用PBS稀释50倍至1×PI染料浓度，在4°C下储存并避光。

40 mM Tris-HCl（pH 7.5）：在使用前制备，用PBS稀释100倍至0.4 mM Tris-HCl（pH7.5）的浓度，并在4°C下储存。

1×裂解缓冲液：制备100 mL 1×裂解液

可以使用以下方法之一测量尾力矩：

（a） 橄榄尾力矩=尾DNA%×尾力矩长度（从头部中心到尾部中心测量，见图1）

（b） Extent Tail Moment=Tail DNA%×Tail Length（见图1）彗星测定结果分析软件可通过Opencomet、CASPlab和彗星测定IV（PerceptiveInstruments）等获得。

图1：彗星试验中的DNA损伤。

图2：定性方法：DNA损伤按尾DNA%的比例分为五级

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

https://www.amyjet.com/products/D-AKE3040-15T.shtml