GloMelt热转移蛋白稳定性试剂盒：快速、廉价

GloMelt热转移蛋白稳定性试剂盒：快速、廉价

GloMelt™染料在结合变性蛋白质的疏水区域后会发生荧光增强。因此，该染料可用于检测蛋白质的展开或通过进行热稳定性测定（也称为蛋白质热稳定性移动试验、差示扫描荧光测定或热荧光测定）来测量蛋白质的热稳定性。

艾美捷GloMelt热转移蛋白稳定性试剂盒（BTM-33021-T）：快速、廉价，可量化蛋白质变性温度的变化，因此可用于筛选影响蛋白质热稳定性的条件，如蛋白质突变、配体结合和缓冲剂配方（如pH值、盐类、洗涤剂和其他添加剂）。这些测定通常迅速（约30分钟）并在定量PCR系统上进行。热稳定性移动方法与高通量筛选兼容，并且需要的蛋白质比圆二色谱和差示扫描量热法等方法要少得多。

与其他环境敏感染料（如SYPRO® Orange和PROTEOSTAT® TS染料）相比，GloMelt™染料具有明显的优势。GloMelt™染料在SYBR® Green通道的定量PCR仪器中进行了优化，因此可以使用较低的反应体积和蛋白质浓度，产生强烈的信号。GloMelt™染料与高浓度的蛋白质稳定剂（如甘油和山梨醇）以及蛋白质不稳定剂（如DTT和咪唑）兼容。与SYPRO® Orange不同，GloMelt™染料在高洗涤剂浓度下表现出色。另一个优势是在热稳定性移动试验中可以与ROX染料一起使用，这可以通过增加qPCR仪器中重复一致性来改善结果，ROX染料是一种被动参考染料。

储存和处理：

将GloMelt™染料储存在-20°C的环境中，并避免光照。按照推荐的储存条件，GloMelt™染料在收到之日起可稳定保存2年。GloMelt™染料是一种潜在的有害化学物质，处理时请遵循一般实验室安全预防措施，并根据当地法规将其作为危险化学废物处理。GloMelt™染料以200倍浓度的水溶液和20%的二甲基亚砜(DMSO)供应。

将ROX参考染料储存在-20°C的环境中，并避免光照。按照推荐的储存条件，ROX可稳定保存2年。ROX以40 uM的浓度在10 mM Tris-HCL、0.1 mM EDTA中供应。

将山羊IgG对照蛋白储存在-20°C的环境中。解冻后，可在4°C条件下保存2年，或重新冷冻。避免多次冻融循环。山羊IgG对照蛋白以10 mg/mL的浓度在10 mM磷酸钠、0.15 M氯化钠、pH 7.2、0.05%偶氮二钠溶液中供应。

光谱特性：

GloMelt™染料吸收/发射波长：468/507 nm

图1：对环境敏感的荧光染料可用于监测蛋白质的温度依赖性展开。蛋白质的融化温度（Tm）是蛋白质热稳定性的一个指标

反应设置：

1. 准备1X GloMelt™工作溶液。将GloMelt™染料解冻并达到室温。轻轻摇晃和离心小瓶。使用您选择的缓冲液（如PBS、TE或水），新鲜制备足够的10X染料工作储备液，以供测定的样品数量。例如，为了准备足够的10X染料用于50个反应，每个反应体积为20 uL，将5 uL 200X染料加入95 uL PBS，每个管中使用2 uL 10X染料，以获得最终的1X染料浓度。

注意：我们建议在反应中使用1X染料的最终浓度，但可以测试0.5-2X的最终浓度以优化您的测定。我们还建议使用20 uL的反应体积以节约试剂，但可以使用多达100 uL的体积。

2. 在您选择的缓冲液中准备感兴趣的蛋白质。将蛋白质稀释至0.5-2.5 ug/uL的最终浓度进行测定。也可以使用高达5 ug/uL的浓度。对于含有IgG的测定，我们发现0.5-1 ug/uL的最终浓度效果良好。

注意：为了获得合适的结果，测试蛋白质的估计纯度应>80%，并且应无沉淀物。GloMelt™试剂盒包含可用于初始测定设置的IgG对照蛋白质。每次实验中不需要运行IgG对照样品。

3. 在qPCR管或qPCR板上设置反应，并使用光学密封。反应包含染料、测试蛋白质、缓冲液，还可以包含测试添加剂和ROX（如通用反应设置所示）。我们建议准备不含蛋白质的反应控制样品（NPCs），包含除了测试蛋白质以外的所有反应组分。应准备至少3个每个反应的重复样品，以测试一致性并获得统计学上显著的结果。

注意：如果您的蛋白质在室温下的稳定性未知，建议在冰上进行反应设置。如果您的蛋白质在室温下具有热稳定性，可以在室温下进行反应设置。

https://www.amyjet.com/products/BTM-33021-T.shtml

—— —— —— —— —— —— —— —— —— 

AIFM1(Ser-116),磷酸特异性：蛋白质磷酸化的新突破点

凋亡诱导因子（AIFM1，AIF，PDCD8）是一种广泛表达的黄素蛋白，对非半胱天冬酶依赖性凋亡起关键作用。AIFM1在表达时为一个66 kDa的前体蛋白，然后经N-末端剪切成62 kDa，并定位于线粒体内膜间隙。在凋亡刺激下，AIFM1以57 kDa的片段形式从线粒体内膜释放出来，并可以转位到细胞核。用重组AIFM1处理分离的细胞核会引发早期凋亡事件，如染色质凝聚和大规模DNA断裂。对AIFM1敲除小鼠的研究表明，AIFM1的凋亡活性是细胞类型和刺激因素依赖的。AIFM1已被认为参与了一种由氧化应激引起的非炎症性、非半胱天冬酶依赖性的细胞死亡途径，称为氧化性细胞死亡（oxeiptosis）。在oxeiptosis过程中，增加的活性氧物质导致磷酸酶PGAM5从KEAP1中释放出来，进而使AIFM1（Ser-116）去磷酸化并引发细胞死亡。因此，AIFM1在Ser-116位点的磷酸化状态可能是涉及oxeiptosis的细胞死亡的重要标志。

未处理（泳道1和3）或用calyculin A处理（100nM，30min）（泳道2和4）的人jurkat细胞的蛋白质印迹图像。用1:500的拉比多克隆抗AIFM1（C末端区）（泳道1和2）和1:1000的抗AIFM-1（Ser-116）磷酸特异性抗体（泳道3和4）探测印迹。

艾美捷AIFM1(Ser-116),磷酸特异性（AP5501）：

在用磷酸化AIFM1（Ser-116）肽进行亲和纯化之前，该抗体经过与未磷酸化的AIFM1（Ser-116）肽交叉吸附。该抗体可以在经过卡库林A处理的人类Jurkat细胞的SDS-PAGE免疫印迹中检测到一个三重带，分子量为66、62和57 kDa*。经过λ磷酸酶处理去磷酸化的AIFM1后，不再观察到这种反应。*所有分子量（MW）均通过与Bio-Rad彩虹标记物的比较以及与已知分子量相似的蛋白质的免疫印迹迁移性进行确认。

对应于人类AIFM1中Ser-116周围的氨基酸，合成了磷酸化AIFM1（Ser-116）合成肽（与载体偶联）。这个位点在大鼠和小鼠的AIFM1中是保守的，但是周围的氨基酸序列并不保守。在AIFM2和AIFM3中没有发现这个位点。

缓冲液和储存：兔多克隆亲和纯化抗体提供100µl磷酸盐缓冲盐溶液、50%甘油、1 mg/ml牛血清白蛋白和0.05%亚硝酸钠。储存在-20°C。稳定保存一年。

AIFM1(Ser-116),磷酸特异性相关研究：

BK6950 Bad Phospho-Regulation Antibody Sampler Kit

BP5111 Bcl-x Rabbit Polyclonal

CK6360 Caspase Family Antibody Sampler Kit

CM3771 Caspase-3 (N-terminal region) Mouse Monoclonal

CM4911 Caspase-3 (p17 subunit) Mouse Monoclonal

AIFM1(Ser-116),磷酸特异性参考文献：

Daugas, E. et al. (2000) FEBS Lett. 476:118.

Lipton, S.A. and Bossy-Wetzel, E. (2002) Cell 111:147.

Delavallee, L. et al. (2011) IUBMB Life. 63(4):221.

https://www.amyjet.com/products/AP5501.shtml

——————————————————————

UEV1A (UBE2V1), FLAG-tag重组蛋白在信号转导中的作用机制

重组人UEV1A(泛素结合酶E2V1),全长包含氨基酸2-170(结束)。这种蛋白质是用N端标记构建的。重组蛋白被亲和纯化.

艾美捷UEV1A (UBE2V1), FLAG-tag重组蛋白：

货号：BPS-80325

英文名称：UEV1A (UBE2V1), FLAG-tag Recombinant

同义词：CIR1, UEV1, CROC1, UBE2V, UEV-1, UEV1A, CROC-1, TRAF6-regulated IKK activator 1 beta Uev1A, ubiquitin-conjugating enzyme E2 variant 1

物种：人

表达系统：E. coli

纯度：≥90%

格式：水缓冲溶液

储存和使用：

储存/稳定性：在-80℃下至少6个月。

假设条件：反应是根据UBCH13的测定试剂盒进行的( BPS Bioscience#79741 ),并含有不同数量的UEV1A。

使用说明：冰面解冻,使用前轻轻混合。千万别是漩涡。打开前快速旋转。小容量和快闪冷冻长期存储。避免多重冻融循环。

应用程序：有利于酶动力学、筛选抑制剂和选择性分析的研究。

船舶温度：-80°C，避免冰冻/解冻循环

科学类别：异丁素标记酶(E2)

仅用于研究

产品数据：

UEV1A (UBE2V1), FLAG-tag重组蛋白相关研究:

UBCH4A(UB2D1),His-标签重组

UBCH6(UB2E1),重组

UBCH13(UB2N),His-标签重组

UBE2O,基因标记重组

相关服务:

蛋白质生产和标签

定制重组细胞系

https://www.amyjet.com/products/BPS-80325.shtml

————————————————————————————

SMURF1, FLAG-tag重组蛋白的表达与纯化技术研究

Human SMURF1（GenBank登录号NM_020429），氨基酸150至末端，带有N-末端FLAG标签，分子量为70 kDa，在Sf9细胞表达系统中通过杆状病毒感染表达。

艾美捷SMURF1, FLAG-tag重组蛋白：

货号：BPS-80402

英文名称：SMURF1, FLAG-tag Recombinant

同义词：SMOLF1,SMOLF1,细胞免疫蛋白酶1

物种：人

表达系统：Sf9昆虫细胞

纯度：≥85%

格式：水缓冲溶液

储存和使用：

储存/稳定性：在-80℃时至少6个月。避免冻融循环。在PBS+甘油中可将蛋白质稀释到100克/毫升,并在-80℃时储存。

假设条件：10UL反应混合物中含有50mm3,PH7.4,5mm2,0.01%之间,1mmDTT,0.2亚型UB[生物素],50纳米Ube1,1mm等离子体,以及各种不同量的SMORF1。反应开始时加入了三磷酸三磷酸酯,并在30度浓度下孵化3小时。在室温条件下,加入标记抗标记抗体供体和标记接受体XL665,并在室温条件下培养一小时。

使用说明：冰面解冻,使用前轻轻混合。千万别是漩涡。打开前快速旋转。小容量和快闪冷冻长期存储。避免多重冻融循环。

应用程序：用于酶动力学、筛选抑制剂和选择性分析的研究。

仅用于研究

产品数据：

相关服务:

蛋白质生产和标签

定制重组细胞系

SMURF1, FLAG-tag重组蛋白文献参考：

1. Narimatsu M. et al., Cell 137 (2), 295-307 (2009)

2. Fukunaga E. et al., J. Biol. Chem. 283 (51), 35660-35667 (2008).

https://www.amyjet.com/products/BPS-80402.shtml

—— —— —— —— —— —— —— —— —— 

CUL3/Rbx1, GST-tag重组蛋白的结构与功能解析

人类CUL3（Cullin-3）与人类RING box蛋白1（Rbx1）形成复合物，也被称为E3泛素-蛋白连接酶RBX1。CUL3（氨基酸2-768（末端）带有N-末端GST标签，分子量为117 kDa）与Rbx1（氨基酸1-108（末端），分子量为12 kDa）在通过杆状病毒感染的Sf9细胞表达系统中共同表达。其GenBank登录号分别为NM_003590（CUL3）和NM_014248（Rbx1）。

艾美捷CUL3/Rbx1, GST-tag重组蛋白：

货号：BPS-80409

英文名称：CUL3/Rbx1, GST-tag Recombinant

同义词：Cullin-3, RING box protein 1, RING box protein 1, E3 ubiquitin protein ligase 1

物种：人

表达系统：Sf9昆虫细胞

纯度：≥72%

格式：水缓冲溶液

储存和使用：

储存/稳定性：-80℃时至少6个月

使用说明：冰面解冻,使用前轻轻混合。千万别是漩涡。打开前快速旋转。小容量和快闪冷冻长期存储。避免多重冻融循环。

应用程序：有利于酶动力学、筛选抑制剂和选择性分析的研究。

船舶温度：-80°C，避免冰冻/解冻循环。如果必要的话,不建议使用载体蛋白(BSA0.1%-0.5%)来储存稀释酶。

科学类别：异丁基锡e3配体

仅用于研究

产品数据：

CUL3/Rbx1, GST-tag重组蛋白相关研究：

RNF20,重组基因

Wwp1,标记重组

SMURF2, FLAG-tag Recombinant

SMURF1, FLAG-tag Recombinant

相关服务；

蛋白质生产和标签

定制重组细胞系

CUL3/Rbx1, GST-tag重组蛋白文献参考：

1. Kaspar, J. et al., J. Biol. Chem. 2010; 285: 21349-21358

2. Kaspar, J. et al., J. Cell. Sci. 2012; 125: 1027-1038.

https://www.amyjet.com/products/BPS-80409.shtml

—— —— —— —— —— —— —— —— ——  

CBL-B, His-Avi-Tag重组蛋白的生物学特性和研究进展

环指E3-Ubi类素连接酶是细胞内检查点,也是细胞毒性淋巴细胞和NK细胞的调节剂。CBL-B结合了E2-UbiQIN以及诸如TAM受体型3等靶蛋白,迫使泰罗3的进一步降解。cbl-b调节先天免疫反应,在宿主对病原体的防御和抗肿瘤免疫方面发挥关键作用。针对Cbl-B是一种潜在的治疗策略,用于治疗与人体免疫有关的疾病,如自身免疫疾病、感染、肿瘤和过敏性气道炎症。由于其抑制癌症免疫的能力,它已成为免疫治疗领域的新目标。在细胞毒性和效应T细胞中,cbl-b能启动NK细胞的抗癌免疫反应,促进T细胞和NK细胞的激活。

重组人CBL-B（Cbl原癌基因B），包含氨基酸39-426。该构建物包含一个N-末端的His标签（6xHis），后跟一个Avi标签。重组蛋白经亲和纯化得到。

艾美捷CBL-B, His-Avi-Tag重组蛋白：

货号：BPS-80414

英文名称：CBL-B, His-Avi-Tag Recombinant

同义词：细胞免疫蛋白-B,B型淋巴瘤原癌基因B,无名指蛋白56,环型3型泛素转移酶CBL-B,S3型蛋白BL-B,信号转导蛋白BL-B,RNF56,NBLA00127

物种：人

表达系统：E. coli

纯度：≥90%

格式：水缓冲溶液

储存和使用：

储存/稳定性：-80℃时至少6个月

使用说明：冰面解冻,使用前轻轻混合。千万别是漩涡。打开前快速旋转。小容量和快闪冷冻长期存储。避免多重冻融循环。

船舶温度：-80°C，避免冰冻/解冻循环

科学类别：异丁基锡e3脂酶

仅用于研究

产品数据：

CBL-B, His-Avi-Tag重组蛋白相关研究：

生物标记重组(人类)

CBL-B(Y363F),his标签,生物标记重组(人类)

Cbl-B三溴二苯醚测定试剂盒

CRL-B(人)

相关服务：

蛋白质生产和标签

定制重组细胞系

CBL-B, His-Avi-Tag重组蛋白文献参考：

1. Jeon, M.S., et al., Immunity. 2004; 21(2): 167-177.

2. Chiang, Y.J. et al., Nature. 2000; 403: 216-220.

https://www.amyjet.com/products/BPS-80414.shtml

—— —— —— —— —— —— —— —— ——  

CARP2, SUMO-His-tags重组蛋白在信号转导中的作用机制

CAP2(卡氏蛋白酶8/10相关环型蛋白2)是一个环域EP(泛素蛋白连接酶),参与了泛素结合物目标底物,以及E1和E2酶。CAPS(CAP1和CAP2,77%的同一性)也属于具有抑制含有CAP酶蛋白(8和10)的DED(死亡效应域)激活的LD家族(凋亡蛋白抑制剂)。除了针对卡普西8和10之外,还表明卡普西以磷酸化P53为目标,以HDM2为独立的方式进行降解。此外,CAP2已被证明是一个消极的调节剂,通过靶向RIP进行降解诱导NF-KALB激活。

人CAP2重组蛋白(基因库加入编号。完整长度,并以N端的标签表示,以 E. coli .

艾美捷CARP2, SUMO-His-tags重组蛋白：

货号：BPS-81050

英文名称：CARP2, SUMO-His-tags Recombinant

同义词：RFFL, ring finger and FYVE-like domain containing 1

物种：人

表达系统：E. coli

纯度：≥95%

格式：水缓冲溶液

储存和使用：

储存/稳定性：在-80℃时,1以上年稳定。

使用说明：冰面解冻,使用前轻轻混合。千万别是漩涡。打开前快速旋转。小容量和快闪冷冻长期存储。避免多重冻融循环。

应用程序：可作为电子树脂酶,用于泛素共聚物反应,并分析电子酶的升聚/降溶。

仅用于研究

相关服务：

蛋白质生产和标签

定制重组细胞系

CARP2, SUMO-His-tags重组蛋白文献参考：

1. Yang, W., et al., CARPs are ubiquitin ligases that promote MDM2-independent p53 and phospho-p53ser20 degradation. J Biol Chem, 2007. 282:3273-81.

2. Yang, W. and W.S. El-Deiry, CARPs are E3 ligases that target apical caspases and p53. Cancer Biol Ther, 2007. 6:1676-83.

3. McDonald, E.R., 3rd and W.S. El-Deiry, Suppression of caspase-8- and -10-associated RING proteins results in sensitization to death ligands and inhibition of tumor cell growth. Proc Natl Acad Sci USA, 2004. 101:6170-5.

4. Liao, W., et al., CARP-2 is an endosome-associated ubiquitin ligase for RIP and regulates TNF-induced NF-kappaB activation. Curr Biol, 2008. 18:641-9.

https://www.amyjet.com/products/BPS-81050.shtml

—— —— —— —— —— —— —— —— ——  

c-CBL, GST-Tag重组蛋白的表达与纯化技术研究

人类c-CBL，也被称为CBL-2、Cbl原癌基因、信号转导蛋白CBL和Cbl原癌基因，E3泛素蛋白连接酶，GenBank登录号为NM_005188，氨基酸49-434，带有N-末端GST标签，在大肠杆菌表达系统中表达。分子量为71 kDa。

艾美捷c-CBL, GST-Tag重组蛋白：

货号：BPS-100370

英文名称：c-CBL, GST-Tag Recombinant

同义词：CBL-2,CBL原癌基因,信号转导蛋白cbl;cbL原癌基因,e3泛素蛋白配酶,c-cbl

物种：人

表达系统：E. coli

纯度：≥90%

格式：水缓冲溶液

储存和使用：

储存/稳定性：在-80℃时至少6个月。

假设条件：反应混合物的10升含有50mm三氧化硅、PH7.4、5mm三氧化硅、0.01%二氧化硅、0.2纳米二氧化硅(生物素)、50纳米三氧化硅、1mm三氧化硅、2毫米三氧化硅、以及各种浓度的氯代-B和C-氯。该反应是通过添加三磷酸三磷酸酯启动的,并在30℃时孵化3小时。加入结核病标记抗GST抗体供体和XL665标记受体,在室温下培养一个小时。

使用说明：冰面解冻,使用前轻轻混合。千万别是漩涡。打开前快速旋转。小容量和快闪冷冻长期存储。避免多重冻融循环。

船舶温度：-80°C，避免冰冻/解冻循环。

科学类别：异丁基锡

仅用于研究

产品数据：

c-CBL, GST-Tag重组蛋白相关研究：

生物标记重组(人类)

重组(人)

Cbl-B三溴二苯醚测定试剂盒

Cbll-c,标记重组

C-氯二氯三氯氟乙烷测定试剂盒

相关服务：

类似筛查和特征分析服务

c-CBL, GST-Tag重组蛋白文献参考：

Griffiths, E.K., Molec. and Cellular Bio. 2003; Oct. 23(21):7708-7718

Keane, M.M., Oncogene, 1999 June; 18: 3365-3375.

https://bpsbioscience.com/c-cbl-gst-tag-recombinant-100370