艾美捷Cell Biolabs Anoikis(锚定依赖性细胞死亡)方案
- 武汉艾美捷科技有限公司2023年10月12日 4:07 点击:344
艾美捷Cell Biolabs Anoikis(锚定依赖性细胞死亡)方案
对牙韶状基质的粘附对于许多贴壁细胞的存活和繁殖至关重要。由于失去对ECM的粘附而导致的细胞凋亡被称为肛门。Anoikis参与组织更新和细胞稳态的生理过程。
艾美捷代理Cell Biolabs Anoikis检测试剂盒允许您使用预包被板定量和监测细胞中的 Anikis。活细胞可以在显微镜下观察,并通过MTT(比色法)或钙黄绿素AM(荧光法)在酶标仪上定量;两种试剂都包含在试剂盒中。使用红色 EthD-1 试剂检测死细胞,也包括在内。检测试剂盒提供 24 孔和 96 孔两种规格。
艾美捷Cell Biolabs 24-Well Anoikis Assay(CBA-080):
粘附至髓外基质对于许多粘附细胞的存活和繁殖至关重要。因失去对ECM的粘附而导致的凋亡被称为anoikis。Anoikis参与组织更新和细胞稳态的生理过程。Cell Biolabs的CytoSelectAnoikis分析试剂盒可让您使用预涂板定量和监测细胞中的Anoikis。可以在显微镜下观察活细胞,并通过MTT(比色法)或Calcein AM(荧光法)在酶标仪上进行定量。试剂盒中均包含两种试剂。用红色EthD-1试剂(也包括在内)检测死细胞。
艾美捷Cell Biolabs 96-Well Anoikis Assay(CBA-081):
与细胞外基质(ECM)的粘附对于许多粘附细胞的存活和繁殖至关重要。细胞与ECM失去粘附或不适当粘附导致的细胞凋亡被定义为“失巢”。Anoikis来自希腊语,意思是无家可归,参与组织更新和细胞稳态的生理过程。
癌症发展和生长的一个共同特征是转化细胞在“非锚定”或“球状”生长条件下存活的能力。这种对失巢细胞的抵抗已被证明与细胞稳态的丧失、癌症的生长和转移有关。ECM上细胞粘附、扩散和生长的抑制是细胞愈合过程的障碍,使其成为可能的治疗靶点。在细胞移植技术的发展中,包括生殖细胞的治疗用途,预防失巢和增强细胞粘附和铺展是一个主要目标。旨在控制失巢细胞耐药性分子机制的进一步研究将有助于确定治疗许多人类恶性肿瘤的有效疗法
细胞选择™ 96孔失巢细胞测定试剂盒提供了一种比色和荧光测定形式,用于测量锚定无关生长和监测失巢细胞驱动的细胞死亡。该试剂盒包含用于评估Hydrogel涂层96孔板中96个样品的有效试剂。用MTT或Calcein AM检测活细胞。用Ethdium同源二聚体(EthD-1)检测细胞死亡。
试剂盒组成:
1.96-well Anchorage Resistant Plate (Part No. 108101): One 96-well Hydrogel coated plate.
2. Calcein AM (500X) (Part No. 108002): One vial – 50 µL in DMSO.
3. Ethidium Homodimer (EthD-1) (500X) (Part No. 108003): One vial – 50 µL.
4. Detergent Solution (Part No. 108004): One bottle – 25.0 mL.
5. MTT Solution (Part No. 113502): Three tubes – 1.0 mL each
检测原理:
细胞在水凝胶包被板或对照板中培养。细胞活力通过MTT或Calcein AM测定。Anoikis推动的细胞死亡通过Ethdium同源二聚体(EthD-1)测定。EthD-1是测量死细胞的优良标记物。EthD-1是一种红色荧光染料,只能穿透受损的细胞膜。EthD-1在结合ssDNA、dsDNA、RNA、寡核苷酸和三链DNA时会发出40倍增强的荧光。背景荧光水平非常低,因为染料在与细胞相互作用之前实际上是非荧光的。
相关研究:
1. CBA-080: CytoSelect™ 24-Well Anoikis Assay
2. CBA-230: Cellular Senescence Detection Kit (SA-β-Gal Staining)
3. CBA-231: 96-Well Cellular Senescence Assay (SA β-Gal Activity)
4. CBA-232: Quantitative Cellular Senescence Assay (SA β-Gal)
5. CBA-240: CytoSelect™ Cell Viability and Cytotoxicity Assay
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艾美捷Cell Biolabs自噬ELISA检测试剂盒(LC3-II定量)方案
自噬是细胞质物质的溶酶体降解途径,在细胞应激期间被激活。在被病毒感染或氨基酸饥饿等应激信号诱导后,自噬的第一步是形成自噬体。发表最多的自噬体标记蛋白是MAP LC3,它与自噬体的内限制膜和外限制膜相关。
蛋白质印迹法可以看到两种形式的LC3:LC3I存在于可溶性级分中,LC3II存在于膜级分中。这两种形式都可见于健康细胞,但在自噬过程中LC3II的比例急剧增加。
LC3是一种16-18kDa的小蛋白,在细胞内以3种形式存在。125个氨基酸的前体被切割成120个氨基酸的形式,称为LC3-I。在与磷脂酰乙醇胺(PE)结合后,产生LC3-II形式。LC3-I主要存在于胞质溶胶中,而LC3-II主要存在于膜部分中。
在通过应激信号(如氨基酸饥饿)诱导自噬后,第一步是形成自噬体。LC3-I和LC3-II都存在于健康细胞中,但在自噬诱导后,LC3-II的比例随着与自噬体膜的结合而增加。
艾美捷代理Cell Biolabs自噬ELISA检测试剂盒(LC3-II定量)使用选择性透化程序来去除胞浆pro-LC3和LC3-I,并保留自噬体膜结合的LC3-II。未知裂解物中LC3-II的量通过与已知LC3标准曲线进行比较来确定。特点如下:
1、在耗尽胞质LC3-I后定量细胞裂解物中的LC3-II
2、包含重组LC3标准品
艾美捷Cell Biolabs的细胞自噬ELISA试剂盒(LC3-II Quantation)是一种用于检测和定量培养细胞中LC3的酶免疫分析。该试剂盒利用选择性渗透程序去除胞浆前LC3和LC3-I,并保留自噬体膜结合的LC3-II(图1)。在固定和透化后,用抗LC3抗体探测含有LC3-II的细胞,然后用HRP缀合的第二抗体探测。每个试剂盒提供足够的试剂来进行多达48次测定。
图1:LC3的处理。在自噬过程中,前-LC3经历C末端蛋白水解形成LC3-I(胞浆)。LC3-I蛋白与磷脂酰乙醇胺(PE)结合并易位到自噬体膜(LC3-II)。选择性透化程序用于去除胞质前LC3/LC3-I并保留自噬体结合的LC3-II。LC3-II被用作自噬的特异性标记
试剂盒组成:
1. 100X Cytosolic LC3 Removal Reagent (Part No. 51171A): One 100 µL tube.
2. 2X Fixing Solution (Part No. 51172B): One 10 mL bottle containing 8% paraformaldehyde.
3. Quenching Solution (Part No. 51173B): One 10 mL bottle.
4. Anti-LC3 Antibody (Part No. 51174C): One 10 µL tube.
5. Secondary Antibody, HRP Conjugate (1000X) (Part No. 231009): One 20 µL tube.
6. Assay Diluent (Part No. 310804): One 50 mL bottle.
7. 10X Wash Buffer (Part No. 310806): One 100 mL bottle.
8. Substrate Solution (Part No. 310807): One 12 mL amber bottle.
9. Stop Solution (Part. No. 310808): One 12 mL bottle.
10. Cell Stain Solution (Part No. 11002): One 10 mL bottle.11. Extraction Solution (Part No. 11003): One 10 mL bottle
相关研究:
1.CBA-401: GFP-LC3 Expression Vector
2.CBA-5115: Autophagy Immunoblot Kit (LC3-II Detection)
3. CBA-5116: Autophagy ELISA Kit (LC3-II Quantitation)
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Cell Biolabs丨艾美捷代理WST-1细胞增殖检测试剂方案
监测细胞增殖对于各种应用至关重要,包括优化细胞培养条件以及确定细胞因子和生长因子的活性率。细胞增殖测量也可用于评估细胞介导的细胞毒性、治疗化合物在药物筛选中的功效以及毒理学测试中抗癌化合物的细胞抑制性质。
艾美捷代理Cell Biolabs细胞增殖检测试剂提供了通过比色或荧光检测监测细胞增殖速率的便捷方法。
艾美捷Cell Biolabs WST-1 细胞增殖检测为测量和监测细胞增殖提供了一种比色形式。10 mL 体积足以评估 960 个 96 孔板中的 192 个测定或 24 个 1 孔板中的 <> 个测定。细胞可以铺板,然后用影响增殖的化合物或试剂处理。然后用增殖试剂检测细胞,该试剂在细胞NADH和电子介质存在下在活细胞中从WST-<>转化为甲臜形式。
细胞增殖的增加伴随着信号的增加,而细胞增殖(和信号)的减少可能表明化合物的毒性作用或次优培养条件。该测定原理是基本的,可应用于大多数真核细胞系,包括贴壁和非贴壁细胞以及某些组织。该细胞增殖试剂可用于检测细菌、酵母、真菌、原生动物以及培养的哺乳动物和双鱼细胞中的增殖。
人HEK 293细胞密度。 将HEK 293细胞以上述各种密度接种并使其生长24小时。加入 CytoSelect™ WST-1 细胞增殖测定试剂后,将细胞在 2ºC 和 37% CO 5 下孵育 2 小时。
艾美捷Cell Biolabs WST-1 细胞增殖检测特点:
1、包含足够的试剂,用于评估 960 个 96 孔板中的 192 个检测或 24 个 <> 孔板中的 <> 个检测
2、可应用于大多数真核细胞系,包括贴壁和非贴壁细胞以及某些组织
3、细胞增殖试剂可用于检测细菌、酵母、真菌、原生动物以及培养的哺乳动物和双鱼细胞中的增殖
文献参考:
1、Durmaz, B. et al. (2021). Antileukemic Effects of Anti-miR-146a, Anti-miR-155, Anti-miR-181a, and Prednisolone on Childhood Acute Lymphoblastic Leukemia. Biomed Res Int. doi: 10.1155/2021/3207328.
2、Menini, S. et al. (2020). Diabetes promotes invasive pancreatic cancer by increasing systemic and tumour carbonyl stress in KrasG12D/+ mice. J Exp Clin Cancer Res. 39(1):152. doi: 10.1186/s13046-020-01665-0.
3、Harada, H. et al. (2020). Prediction of Efficacy of Postoperative Chemotherapy by DNA Methylation of CDO1 in Gastric Cancer. J Surg Res. 256:404-412. doi: 10.1016/j.jss.2020.07.001.
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关于Cell Biolabs细胞衰老测定的常见问题解答
Cell Biolabs的细胞衰老测定提供了测量衰老相关(SA)β-半乳糖苷酶的有效方法。SA-β-Gal催化X-gal的水解,在衰老细胞中产生蓝色。使用我们的细胞衰老染色试剂盒可视化结果,使用荧光酶标仪量化衰老活性,或通过流式细胞术或落射荧光显微镜测量衰老。
艾美捷代理Cell Biolabs细胞衰老流式细胞术测定提供了一种有效的方法来测量衰老相关(SA)β-半乳糖苷酶活性。将荧光底物直接添加到35mm培养皿中的衰老细胞中。结果可以通过流式细胞术或落射荧光显微镜测量。特点如下:
1、使用荧光底物测量衰老相关β-半乳糖苷酶活性
2、在标准 35 mm 培养皿中进行检测
关于艾美捷Cell Biolabs细胞衰老测定的常见问题解答:
问:Cell Biolabs的任何细胞衰老检测都可以自动化吗?
答: 为了自动化衰老测定筛选,Cell Biolabs建议使用#CBA-231,它有96孔格式,可以用荧光酶标仪读取。这是一种通过使用荧光底物测量SA-β-gal活性来定量衰老的活性测定。#CBA-230 和 #CBA-232 都是 SA-β-gal 染色测定,可检测活细胞中的 SA-β-gal。 #CBA-232使用可以通过流式细胞术或荧光显微镜分析的荧光底物,并且比#CBA-230更灵敏,但是#CBA-230和#CBA-232都不适合高通量分析。Cell Biolabs所有的衰老测定都适用于任何衰老细胞。
文献参考:
1、Viganò, L. et al. (2022). Modulation of the estrogen/erbB2 receptors crosstalk by CDK4/6 inhibition triggers sustained senescence in estrogen receptor and erbB2 positive breast cancer. Clin Cancer Res. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-21-3185.
2、Okawa, R. et al. (2022). The effects of continuous exposure to low-dose chlorine dioxide gas on the characteristics of induced pluripotent stem cells. Regen Ther. 21:250-257. doi: 10.1016/j.reth.2022.07.014.
3、Cho, E. et al. (2021). Reelin Alleviates Mesenchymal Stem Cell Senescence and Reduces Pathological α-Synuclein Expression in an In Vitro Model of Parkinson’s Disease. Genes. 12(7):1066. doi: 10.3390/genes12071066.
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Cell Biolabs丨艾美捷代理乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒
通过确定总细胞样品中活细胞和死细胞的数量来测量细胞活力。细胞活力的增加伴随着细胞生长,而细胞活力的降低可能表明化合物的毒性作用或次优培养条件
细胞毒性的测量和监测是任何专注于细胞研究的实验室的基本技术。暴露于细胞毒性化合物的细胞可以通过多种方式做出反应。
艾美捷代理Cell Biolabs乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒提供了一种用于测量和监测细胞毒性的比色形式。该试剂盒包含足够的试剂,可用于评估 960 孔板中的 96 种检测。细胞可以铺板,然后用影响细胞活力的化合物或试剂处理。细胞死亡后,乳酸脱氢酶(LDH)(一种在细胞质中发现的可溶性酶)被释放到生长培养基中。然后将生长培养基转移到另一个平板上,然后用细胞毒性试剂检测释放的LDH。在乳酸底物(包含在乳酸脱氢细胞毒性试剂中)存在下,乳酸乳酸转化为丙酮酸并生成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)。WST-1分子也存在于LDH细胞毒性试剂中,从WST-1转化为橙色甲臜形式。细胞毒性的增加伴随着LDH释放的增加和比色信号的增加。该测定原理是基本的,可应用于大多数真核细胞系,包括贴壁和非贴壁细胞以及某些组织,具体取决于LDH表达水平。
艾美捷Cell Biolabs乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒特点:
1、可用于检测真核细胞的细胞毒性
2、细胞可以铺板,然后用影响细胞活力的化合物或试剂处理
3、比色试剂盒包含足够的试剂,用于评估 960 孔板中的 96 种检测
相关文献参考:
1、Eller, K.A. et al. (2023). Photoactivated antibiotics to treat intracellular infection of bacteria. Nanoscale Adv. 5(7):1910-1918. doi: 10.1039/d2na00378c.
2、Yu, Z. et al. (2022). UVA induces retinal photoreceptor cell death via receptor interacting protein 3 kinase mediated necroptosis. Cell Death Discov. 8(1):489. doi: 10.1038/s41420-022-01273-1.
3、Faist, A. et al. (2022). Inhibition of p38 signaling curtails the SARS-CoV-2 induced inflammatory response but retains the IFN-dependent antiviral defense of the lung epithelial barrier. Antiviral Res. doi: 10.1016/j.antiviral.2022.105475.
4、Tanas, A. et al. (2022). In Vitro and In Vivo Neuroprotective Effects of Sarcosine. Biomed Res Int. doi: 10.1155/2022/5467498.
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Cell Biolabs 细胞迁移、侵袭、Boyden室检测方案
博伊登室是研究细胞迁移和细胞侵袭的有用工具。它由嵌套在细胞培养板孔内的圆柱形细胞培养插入物组成。插入物底部包含一个聚碳酸酯膜,具有确定的孔径。
将细胞接种在无血清培养基中的插入物顶部,而将血清或类似的化学引诱剂放置在下面的孔中。迁移细胞通过孔隙向下面的化学引诱剂移动,可以在酶标仪中进行染色或定量。侵袭性细胞可以通过在膜顶部放置细胞外基质蛋白涂层来类似地测量。
艾美捷代理Cell Biolabs CytoSelect™ Boyden室检测可用于测量细胞侵袭以及各种类型的细胞迁移:
1、趋化性描述了基于细胞周围环境中化学物质的细胞迁移。细胞趋化性可以指示向特定化学信号迁移或远离特定化学信号。
2、趋同性被定义为细胞沿细胞外基质结合的化学引诱剂梯度的细胞迁移。在这些测定中,Boyden室插入物在底部涂有胶原蛋白I或纤连蛋白。
3、迁移描述了细胞(通常是白细胞或肿瘤细胞)通过血管内皮向化学引诱剂的迁移。
艾美捷Cell Biolabs CytoSelect™ Boyden室检测方案:
一、细胞侵袭检测
24孔细胞侵袭测定,基底膜
24孔细胞侵袭测定,胶原蛋白I
96孔细胞侵袭测定,基底膜
96孔细胞侵袭测定,胶原蛋白I
二、趋化性/细胞侵袭组合试剂盒
24孔趋化性/细胞侵袭检测组合试剂盒
96孔趋化性/细胞侵袭检测组合试剂盒
三、趋化性测定
12 μm 趋化性测定,24 孔形式
5 μm 趋化性测定,24 孔形式
8 μm 趋化性测定,24 孔形式
3 μm 趋化性测定,24 孔形式
3 μm 趋化性测定,96 孔形式
5 μm 趋化性测定,96 孔形式
8 μm 趋化性测定,96 孔形式
四、趋触性测定
24孔趋同性测定,胶原蛋白I
24孔趋同性测定,纤连蛋白
五、迁移检测
白细胞迁移测定
肿瘤经内皮迁移测定
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艾美捷Crystal Chem超灵敏大鼠胰岛素ELISA试剂盒方案
Crystal Chem大鼠胰岛素 ELISA(超灵敏)用于仅使用 5 μL 样品体积定量血清、血浆、细胞培养物和液体中的大鼠胰岛素水平。
艾美捷代理Crystal Chem超灵敏大鼠胰岛素ELISA试剂盒(90060)规格:
样本量 5 微升
样品类型 血清、血浆、细胞培养或液体
测试 96 孔(12 x 8 孔条)
试剂 液体形式(标准品除外)
敏感性 0.05 纳克/毫升
检测范围 低范围检测:0.1 - 6.4 ng/mL
宽范围检测:0.1 - 12.8 ng/mL
高范围检测:1 - 64 ng/mL
精度 测定内精密CV≤ 10.0% 测定间精密CV≤ 10.0%
存储 2-8°C
仅供研究使用
艾美捷Crystal Chem超灵敏大鼠胰岛素ELISA试剂盒特点:
1、试剂盒仅使用 5 μL 样品
2、动态范围为 0.1- 64 ng/mL
3、高灵敏度(50 pg/mL),使用 5 μL 样品
4、样品体积小:仅需 5 μL 样品,非常适合少量大鼠样品。
5、高灵敏度和精确性:该测定法使用 CV ≤ 0.05% 的 5 μL 样品时的灵敏度为 10.0 ng/mL。
6、宽动态范围:范围为 0.1 - 64.0 ng/mL,仅使用 5 μL 样品。使用相同的试剂盒运行低胰岛素和高胰岛素测定。
7、具体且快速:这是一种易于使用的试剂盒,对大鼠胰岛素具有高度特异性,可在 3.5 小时内获得结果。
典型标准曲线:
文献参考:
Wojnacki, José, et al. “Tetraspanin-8 Sequesters Syntaxin-2 to Control Biphasic Release Propensity of Mucin Granules.” Nature Communications 2023; 14: 3710.
Yang, Jiufang, et al. “Intestinal Farnesoid X Receptor Modulates Duodenal Surface Area but Does Not Control Glucose Absorption in Mice.” International Journal of Molecular Sciences 2023; 24: 4132.
Frühbeck, Gema, et al. “Increased Aquaporin-7 Expression Is Associated with Changes in Rat Brown Adipose Tissue Whitening in Obesity: Impact of Cold Exposure and Bariatric Surgery.” International Journal of Molecular Sciences 2023; 24: 3412.
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艾美捷Crystal Chem Egg(卵清蛋白)ELISA试剂盒方案
Crystal Chem用于量化生食和加工食品中的卵清蛋白水平,并使用创新的提取方法来更准确地检测过敏原水平。仅供实验室使用。
艾美捷代理Crystal ChemEgg(卵清蛋白)ELISA试剂盒(M2101)规格:
样本量 1 克
测试 96 孔
敏感性 LOD / LOQ: 0.31 ppm
检测范围 0.31 – 20 ppm。
存储 2-8°C
方法论 三明治 ELISA,定量
特 异性 卵白蛋白
仅供研究使用
艾美捷Crystal ChemEgg(卵清蛋白)ELISA试剂盒特点:
1、改进生食和加工食品中过敏原的检测
2、高灵敏度 (0.31 ppm)
3、该套件可检测的动态范围为 0.31 – 20 ppm。
4、所有试剂盒中的通用提取解决方案
5、过敏原的高回收率
文献参考:
Fste, Christiane K., et al. "Extractability, stability, and allergenicity of egg white proteins in differently heat-processed foods." Journal of AOAC International 90.2 (2007): 427-436
FDA Evalution by Garber, Eric A.E. and Brewer, Vickery A. "Evaluation of Commercial ELISA Assays for the Detection of Egg in Food."
Canadian Food Inspection Agency Evaluation by Marceau, Eric, et al. "Evaluation and Validation of a Commercial ELISA-Based Method for the Determination of Egg Protein in Foods."
Crystal Chem成立于1989年,Crystal Chem为科学研究提供高质量的研究产品和技术服务。例如:糖尿病和肥胖疾病相关产品及服务,食物过敏原检测,化学、生物、物理毒理学研究,心血管疾病相关产品和服务,内分泌疾病相关产品和服务,以及其他疾病研究相关的工具和服务。
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