Renilla Mulleri Luciferase，提供高灵敏度和稳定的检测结果

Renilla Mulleri Luciferase，提供高灵敏度和稳定的检测结果

海肾Mulleri荧光素酶（Renilla Mulleri Luciferase），也称为海肾荧光素酶，是一种从海肾（Renilla reniformis）中提取的生物发光酶。这种酶在生物研究中具有重要的应用价值，特别是在基因表达和细胞信号传导研究领域。

与传统的萤光素酶相比，Renilla Mulleri Luciferase发出的光波长更长，这使得它在生物体内的背景噪声更低，信号更容易被检测。此外，Renilla Mulleri Luciferase的发光效率较高，能够在较低的底物浓度下产生较强的信号，这对于灵敏度要求高的实验尤为重要。

检测方法：

检测原理：海肾Mulleri荧光素酶的活性可以通过化学发光法进行测定。在反应中，酶催化底物氧化，产生的光输出可以通过化学发光仪（luminometer）或液闪测定仪进行测量。

检测试剂盒：市场上提供了多种海肾Mulleri荧光素酶检测试剂盒，如艾美捷的CAT#312 Renilla Mulleri Luciferase，能够提供高灵敏度和稳定的检测结果。

艾美捷Renilla Mulleri Luciferase（312）：

化合物编号：Renilla Mulleri 荧光素酶

产品名称：Renilla Mulleri 荧光素酶 95%

生产过程：重组蛋白 通过 IPTG/卡那霉素 -> 离子交换色谱 -> 凝胶过滤

冻干粉末

EC 编号：1.13.12.5

CAS 编号：未注册

储存温度：在-20°C下干燥、避光保存，或长期储存于-80°C。

外观：白色至浅黄色蓬松粉末

溶解性：极易溶解，迅速溶解于生理缓冲盐水或蒸馏水，每毫升溶液中1毫克可形成清澈至微浑浊的溶液。

最大转化率：在300mM NaCl pH 7.6-7.8（海水）中为1.4 X 10^15 QPS

元素分析：14.5%至16.5% 氮

SDS 凝胶电泳：± 95% 考马斯亮蓝染色

https://www.amyjet.com/brand/NanoLight-Prolume.shtml

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地高辛/二硝基苯酚修饰的核苷酸Digoxigenin-11-dUTP

Digoxigenin-11-dUTP，通过PCR，Nick Translation等应用整合到DNA / cDNA中，用于DNA / cDNA探针的制备，测序等方面。

Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚修饰的核苷酸可通过以下方法整合到DNA/cDNA中：

1.用Taq聚合酶进行PCR

2.用DNAse I / DNA聚合酶I进行Nick Translation

3.用Klenow exo-进行引物延伸

4.用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）标记寡核苷酸3'末端

5.用MMLV逆转录酶进行逆转录

Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚修饰的核苷酸可通过以下方法整合到RNA中：

用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）标记3'末端

推荐的用于PCR和Nick Translation的Digoxigenin-11-dUTP / dTTP比例：35％地高辛-11-dUTP / 65％dTTP

请注意：Digoxigenin-11-dUTP的终浓度取决于应用和实验条件。为获得良好的产品收率和高掺入率，建议单独优化Digoxigenin-11-dUTP / dTTP比率

艾美捷Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚（NU-803-DIGXS）：

运输：通过凝胶包进行运输。

存储条件：应在-20°C的环境下保存。

短期（累计最多1周）暴露于室温下是可行的。

保质期：12个月。

分子式：C43H65N4O21P3（自由酸形式）。

分子量：1066.91克/摩尔（自由酸形式）。

精确质量：1066.34克/摩尔（自由酸形式）。

纯度：高于或等于95%（通过高效液相色谱法测定）。

形态：在10 mM Tris-HCl溶液中的过滤溶液，分子量截留30 kDa。

颜色：无色至淡黄色。

浓度：1.0 mM至1.1 mM。

pH值：7.5，误差范围±0.5。

光谱特性：zui大吸收波长λmax为290纳米，摩尔吸光系数ε为8.8 L·摩尔^-1·厘米^-1（Tris-HCl，pH 7.5）。

应用：

生物素-11-dUTP可以通过以下方法嵌入到DNA或cDNA中：

使用Taq聚合酶进行聚合酶链式反应（PCR）。

利用DNA酶I/DNA聚合酶I进行缺口翻译（Nick Translation）。

使用Klenow exo-进行引物延伸（Primer Extension）。

使用末端脱氧核苷酸转移酶（Terminal deoxynucleotidyl Transferase，简称TdT）进行3'端标记。

使用MMLV逆转录酶进行逆转录。

此外，生物素-11-dUTP还可以通过以下方法嵌入到RNA中：

使用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）进行3'-端标记。

Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚相关产品：

HighFidelity Digoxigenin PCR Labeling Kit, #APP-101-DIGX

Digoxigenin NT Labeling Kit, #PP-310-DIGX

https://www.amyjet.com/products/NU-803-DIGXS.shtml

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附文献丨Biotin-dC-puromycin，生物素-嘌呤霉素

Biotin-dC-puromycin，生物素-dC-嘌呤霉素是一种结合了生物素和嘌呤霉素两种分子的化合物，这种化合物在生物医学研究中具有特殊的应用价值。生物素（Biotin）是一种维生素B族的一部分，广泛用于生物分子的标记和检测。它能够与亲和素（Avidin）或链霉亲和素（Streptavidin）形成非常稳定的复合物。

艾美捷Biotin-dC-puromycin，生物素-嘌呤霉素（NU-925-BIO-S）：

运输：通过凝胶包运输。

存储条件：在-20°C下保存。

短期暴露（累计最多1周）于环境温度下是可能的。

保质期：自交货日期起12个月。

分子式：C47H69N13O16P2S（自由酸）。

分子量：1166.14 g/mol（自由酸）。

精确质量：1165.42 g/mol（自由酸）。

CAS号：436083-86-2。

纯度：≥ 95%（高效液相色谱法，HPLC）。

形态：水溶液。

颜色：无色至微黄色。

浓度：0.10 mM - 0.11 mM。

pH值：7.5 ± 0.5。

光谱性质：zui大吸收波长λmax 260 nm，摩尔吸光系数ε 19.0 L mmol^-1 cm^-1（Tris-HCl pH 7.5）。

Biotin-dC-puromycin，生物素-嘌呤霉素文献引用：

The 3’-untranslated regions of yeast ribosomal protein mRNAs determine paralog incorporation into ribosomes and recruit factors necessary for specialized functions

Singh Raman K., Crawford Robert A., ..., Gerst Jeffrey E.

Cysteine polysulfidation and mitochondrial bioenergetics regulated by cysteinyl-tRNA synthetase

Takaaki Akaike

Cellular targets and lysine selectivity of the HERC5 ISG15 ligase

Xu Zhao, Jessica M. Perez, ..., Jon M. Huibregtse

https://www.amyjet.com/products/NU-925-BIO-S.shtml

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Biotin-11-dUTP，生物素化核苷酸--DNA序列测定和核酸探针的制备

Biotin-11-dUTP，生物素化核苷酸是一种用于分子生物学实验的生物素标记的脱氧尿苷三磷酸。它主要用于DNA序列测定和核酸探针的制备。

生物素-11-dUTP，生物素化核苷酸是一种生物素化的三磷酸脱氧核苷酸类似物，可以通过酶的作用结合到DNA/DNA中，替代其天然对应物三磷酸脱氧胸苷（dTTP）。然后用链霉亲和素-辣根过氧化物酶（HRP）结合物、碱性磷酸酶（AP）、荧光染料或琼脂糖/磁珠检测产生的生物素标记的DNA/DNA探针。生物素-11-dUTP常用于PCR、缺口翻译以及逆转录。它也适用于细胞凋亡检测。

艾美捷Biotin-11-dUTP，生物素化核苷酸（NU-803-BIOX-S）：

运输：通过凝胶包进行运输。

存储条件：应在-20°C的环境下保存。

短期（累积不超过1周）暴露于环境温度下是允许的。

保质期：自交货之日起12个月。

分子式：C28H45N6O17P3S（自由酸形式）。

分子量：862.67克/摩尔（自由酸形式）。

精确质量：862.18克/摩尔（自由酸形式）。

纯度：高于或等于95%（通过高效液相色谱法测定）。

形态：在10 mM Tris-HCl溶液中的过滤溶液，分子量截留30 kDa。

颜色：无色至淡黄色。

浓度：1.0 mM至1.1 mM。

pH值：7.5，误差范围±0.5。

光谱特性：zui大吸收波长λmax为240/289纳米，摩尔吸光系数ε为10.7/7.1 L·摩尔^-1·厘米^-1（Tris-HCl，pH 7.5）。

Biotin-11-dUTP、生物素化核苷酸同类型产品：

Bio-11-dUTP(生物素化脱氧尿嘧啶核苷酸)

Bio-11-dUTP标记的特异性核酸探针

177Lu-DTPA-BIS-BIOTIN

Biotin-PEG4-DADPS-Picolyl-azide

PC DBCO-PEG3-Biotin

2'-O-炔丙基鸟苷的生物素标记

2-亚胺生物素-AH-琼脂糖凝胶

B-F127-PLA-87纳米粒子

Biotin-NH2

DADPS Biotin Alykne

Biotin-Dadps-azide

PC Biotin-PEG3-alkyne

B-F87-PLA纳米粒子

Bio-8-0kb探针和Bio-3.4kb探针

4-((Biotinoyl)amino)Butyric acid 生物素酰基-4-氨基丁酸

5-[3-(生物素酰氨基己酰)-胺基]-丙烯基-2'-去氧-5'-三磷酸胞嘧啶核苷(Ⅶ)

5-[3-(生物素酰氨基己酰)-胺基]-丙烯基-2'-去氧-5'-三磷酸脲嘧啶核苷(VI)

6-氨基己酸光生物素(EACA-Photobiotion)

https://www.amyjet.com/products/NU-803-BIOX-S.shtml

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更高光稳定性、更高荧光强度的异硫氰酸荧光素（FITC）

异硫氰酸荧光素 (FITC) 是荧光素的衍生物，可用于包括流式细胞术在内的广泛应用。首次描述于 1942 年，FITC 是用异硫氰酸酯反应基团 (-N=C=S) 功能化的原始荧光素分子，取代了结构底部环上的氢原子。它通常以异构体的混合物形式提供，即 5-异硫氰酸荧光素 (5-FITC) 和 6-异硫氰酸荧光素 (6-FITC)。 FITC 对亲核试剂（包括蛋白质上的胺和巯基）具有反应性。它由 Robert Seiwald 和 Joseph Burckhalter 于 1958 年合成。连接到荧光素核心的琥珀酰亚胺酯官能团形成“NHS-荧光素”，形成另一种常见的胺反应性衍生物，在其他亲核试剂存在下对伯胺具有更大的特异性。

异硫氰酸荧光素 (FITC)具有大约 495 nm 和 519 nm 的激发和发射光谱峰值波长，使其呈绿色。像大多数荧光染料一样，它容易发生光漂白。由于光漂白问题，Alexa 488 和 DyLight 488 等荧光素衍生物已针对需要更高光稳定性、更高荧光强度或不同附着基团的各种化学和生物应用进行了定制。此外，一些实验利用 FITC 的光漂白倾向，通过光漂白后的荧光恢复技术来测量蛋白质在膜中的横向迁移率。

艾美捷异硫氰酸荧光素相关参数：

产品编号：B-CHM100

规格：100毫克

存储条件：在避光的条件下，存放于-20°C。

分子式：C21H11NO5S

分子量：389.38

纯度：高于或等于95%（通过高效液相色谱法测定）

光谱特性：激发/发射波长 = 490 / 525 纳米

外观：黄色粉末

运输与储存

储存条件：在避光的条件下，存放于-20°C。稳定性：在适当的储存条件下，至少稳定12个月。

异硫氰酸荧光素标记抗体流程：

1. 将要进行交联的蛋白质（浓度为1 mg/mL）在4°C下对交联反应缓冲液进行三次透析，调整pH值至9.0。制备交联缓冲液：将7.56克碳酸氢钠、1.06克碳酸钠和7.36克氯化钠溶解在水中，最终体积为1升。

2. 将FITC在DMSO中溶解，浓度为1 mg/mL。为每次交联反应新鲜制备FITC溶液，并避免光照。

3. 以P:F（蛋白质：FITC）= 1 mg:150 μg的比例，缓慢地将FITC加入抗体溶液中。在加入FITC时轻轻搅拌溶液，以确保与抗体均匀混合。在4°C的暗处进行反应8小时。

4. 加入5 mol/L的氯化铵至最终浓度为50 mmol/L，以在4°C下停止反应2小时。

5. 将结合物对PBS溶液进行至少四次透析，直到透析液变清。

6. 交联材料的特征化：蛋白质浓度（mg/mL）= [A280 - 0.31 × A495] / 1.4；F/P比值：3.1 × A495 / [A280 - 0.31 × A495]。这个值应该在2.5 ~ 6.5之间。

7. 将FITC蛋白结合物在pH 7.4的PBS中保存，添加0.1%的亚硝酸钠和1%的牛血清白蛋白（BSA），在4°C的暗处保存。

https://www.amyjet.com/products/B-CHM100-100mg.shtml

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BODIPY 581/591 琥珀酰亚胺酯：高消光系数和荧光量子产率

BODIPY 581/591 琥珀酰亚胺酯是一种鲜艳的红色荧光染料，其激发和发射特性类似于罗丹明红和AF 568。它具有高消光系数和荧光量子产率，并且对溶剂极性和pH的变化相对不敏感。与AF 488染料和荧光素（FITC）等高度水溶性的荧光基团不同，BODIPY染料具有独特的疏水性质，使它们适合于染色脂质、膜和其他亲脂性化合物。

BODIPY 581/591 琥珀酰亚胺酯具有相对较长的激发态寿命（通常为5纳秒或更长），可用于基于荧光极化测量和具有大双光子截面的双光子激发。BODIPY 581/591的NHS酯（或琥珀酰亚胺酯）是将染料结合到蛋白质或抗体上极为常用的工具。NHS酯可用于标记蛋白质的主要胺基（R-NH2）、修饰胺基的寡核苷酸和其他含胺基的分子。

所得到的BODIPY 581/591结合物展现出明亮的荧光、窄的发射带宽以及相对较长的激发态寿命，使它们适合于荧光极化测量和双光子激发（TPE）显微镜检查。

艾美捷BODIPY 581/591 琥珀酰亚胺酯：

产品编号：B-CHM101

规格：5毫克

储存条件：在-20°C下避光保存。

分子式：C26H22BF2N3O4

分子量：489.28

光谱特性：激发/发射波长 = 581/591 纳米，摩尔吸光系数 ε = 136000

建议的储存条件：在-15°C至-30°C的温度范围内避光保存。

BODIPY 581/591 琥珀酰亚胺酯相关产品：

VIC 琥珀酰亚胺酯     B-CHM102-5mg

RPE-Cy7串联染料   B-CHM311-1mg

R-PE 链霉亲和素(0.5 mg/mL)   B-CHM318-1ml

ROX参比染料   B-CHM105-500uL

预活化，RPE-Cy7   B-CHM315-1mg

预活化的PE [R-藻红蛋白]   B-CHM305-1mg

预活化，APC-AF750   B-CHM317-1mg

https://www.amyjet.com/products/B-CHM101-5mg.shtml

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VIC 琥珀酰亚胺酯，提高生物分子检测灵敏度

VIC 琥珀酰亚胺酯旨在与一级胺基，如蛋白质N-末端或赖氨酸的ε-胺基，进行结合。VIC NHS酯琥珀酰亚胺酯可以溶解在二氯甲烷（DCM）、二甲基亚砜（DMSO）、乙酸乙酯（EtOAc）、乙腈（MeCN）或二甲基甲酰胺（DMF）中，并可以直接与胺基结合。如果肽序列中含有如赖氨酸这样的残基，它们提供了额外的一级胺基，可能会导致每个肽分子中多次结合VIC NHS酯。VIC NHS酯同样可以与修饰过的寡核苷酸进行结合。

艾美捷VIC 琥珀酰亚胺酯：

产品编号：B-CHM102

规格：5毫克

储存条件：在-20°C下避光保存。

分子式：C31H16Cl3NO9

分子量：652.82

光谱特性：激发/发射波长 = 526/543 纳米。

VIC 琥珀酰亚胺酯相关产品：

PerCP [多甲藻黄素-叶绿素-蛋白质复合物]    B-CHM304-1mg

PE [R-藻红蛋白]      B-CHM303-10mg

异硫氰酸荧光素      B-CHM100-100mg

Cy7.5, 琥珀酰亚胺酯      B-CHM205-1mg

BODIPY 581/591 琥珀酰亚胺酯      B-CHM101-5mg

AT 590 琥珀酰亚胺酯      B-CHM504-1mg

APC [别藻蓝蛋白]      B-CHM301-1mg

https://www.amyjet.com/products/B-CHM102-5mg.shtml

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ROX参比染料/ROX Reference Dye解决方案

ROX参比染料通常用于ABI和Stratagene等公司的实时PCR扩增仪上。它用于补偿由于PCR样品加载量变化而导致的PCR管之间的差异。所需的ROX参考染料浓度可能因具体仪器而异。Biogradetech提供了一种浓度为25 µmol/L的ROX参考染料储存解决方案。对于不同的仪器，推荐的最终浓度是50 nmol/L或500 nmol/L。用户可以根据他们仪器的推荐浓度添加ROX参考染料。

艾美捷ROX参比染料：

产品编号：B-CHM102

规格：5毫克

储存条件：在-20°C下避光保存。

分子式：C31H16Cl3NO9

分子量：652.82

光谱特性：激发/发射波长 = 526/543 纳米。

ROX参比染料相关产品：

Cy5-Alpha-Bungarotoxin       B-CHM402-100ug

Cy3-Alpha-Bungarotoxin       B-CHM401-100ug

AT 655 NHS Ester      B-CHM505-5mg

APC-Streptavidin      B-CHM302-10mg

RPE-Cy7 Tandem      B-CHM311-1mg

R-PE Streptavidin (0.5 mg/mL)      B-CHM318-1ml

ROX Reference Dye      B-CHM105-500uL

Preactivated RPE-Cy7      B-CHM315-1mg

Preactivated PerCP-Cy5.5      B-CHM313-10mg

Preactivated APC-AF750      B-CHM317-1mg

特定仪器上推荐的ROX最终浓度：

https://www.amyjet.com/products/B-CHM105-500uL.shtml