Advanced BioMatrix人纤维连接蛋白溶液在细胞实验中的应用潜力

Advanced BioMatrix人纤维连接蛋白溶液在细胞实验中的应用潜力

纤维连接蛋白是一种广泛存在的天然细胞粘附因子，以二聚体形式存在于血浆中，并以多聚体形式存在于细胞外基质和细胞表面。纤维连接蛋白是一种糖蛋白，在两个二硫键连接的220-250 kD亚基上发现。纤维连接蛋白用于促进各种细胞的附着和粘附。除了其细胞附着功能外，纤维连接蛋白还可能与胶原蛋白、肝素和其他细胞表面糖胺聚糖发生相互作用。Advanced BioMatrix的人源纤维连接蛋白浓度为0.5 mg/ml，每1.0 mg纤维连接蛋白溶解在2.0 ml的0.45M NaCl、20mM Tris-HCl和12%甘油中。纤维连接蛋白是通过Ruoslahti等人（1）的方法从人类血浆中纯化，使用凝胶亲和柱进行灭菌处理，通过0.2µ过滤器过滤。

艾美捷人纤维连接蛋白溶液，0.5 mg/ml，1 mg #ABM-5050-1MG应用领域：

纤维连接蛋白可用作薄涂层。不同细胞类型的合适附着和培养浓度可能有所不同。可能需要进行一些实验来确定各个细胞培养系统的最佳条件。纤维连接蛋白不适用于人类。

人纤维连接蛋白溶液特性描述：

来源：人类血浆

纯度：纤维连接蛋白的纯度>95%，基于7% SDS-PAGE的考马斯亮蓝染色。

浓度：纤维连接蛋白的浓度为0.5 mg/ml，每1.0 mg纤维连接蛋白溶解在2.0 ml缓冲液中。

(1) Ruoslahti, E., E.G. Hayman M. Pierschbacher, and E.Engvall (1982) Fibronectin: Purification, immunochemicalproperties, and biological activities. Meth. Enzymol. 82 Pt A:803-831.

细胞附着活性：24孔板在PBS中（每孔0.3毫升）中涂覆纤维连接蛋白，于37°C孵育过夜。经BSA阻断后，TIG-3细胞（JCRB 0506）（每孔5 X 104细胞/1 ml DMEM）被加入，并在37°C孵育90分钟。附着的细胞通过库仑计数器进行计数。

pH：纤维连接蛋白溶解在pH约为7的缓冲液中。

储存：建议将纤维连接蛋白存放在-20°C以下，并避免重复冻结和解冻。

人纤维连接蛋白溶液使用说明：

请按照以下建议作为指南，确定您培养系统的合适的涂层条件。

1. 解冻纤维连接蛋白，并使用无血清培养基或PBS（不含Ca++，Mg++）稀释至所需浓度。最终溶液应该足够稀释，使添加的体积能够均匀覆盖表面。

2. 向培养表面添加适量稀释后的材料。

3. 在室温孵育约1小时。

4. 吸去剩余材料。

5. 用双蒸馏水仔细冲洗培养皿，避免刮伤底部表面。

6. 培养皿已经可以使用。如果保持无菌性，它们也可以在2-8°C潮湿存放或风干。

注意事项：用于生产本产品的人源原料已经检测为乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒（HCV）、人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）和2型（HIV-2）以及梅毒均为阴性。请像处理潜在传染源一样小心处理。

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

https://www.amyjet.com/products/ABM-5050-1MG.shtml

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Advanced BioMatrix人玻连蛋白溶液的优化涂层条件

维龙蛋白是存在于血浆和组织中的一种糖蛋白。在血液中循环时，维龙蛋白以75 kD和65 kD多肽的混合物形式存在。维龙蛋白被用于促进各种正常和肿瘤细胞的细胞附着、粘附、扩散、增殖、迁移和分化。除了其细胞扩散功能外，维龙蛋白还能结合肝素和胶原蛋白。Advanced BioMatrix的人源维龙蛋白浓度为0.5 mg/ml，每0.1 mg维龙蛋白溶解于0.2 ml的0.15M氯化钠、0.005M HEPES缓冲液中，pH约为7.4。维龙蛋白通过Hayman等人的方法（1）从人类血浆中纯化，使用抗维龙蛋白单克隆抗体亲和柱进行纯化，并通过0.2µ过滤灭菌。

艾美捷人玻连蛋白溶液，0.5 mg/ml，0.1 mg #ABM-5051-0.1MG应用领域：

Vitronectin被用作薄涂层。细胞附着和培养的合适浓度可能因不同的细胞类型而异。可能需要一些实验来确定单个细胞培养系统的最佳条件。Vitronectin不适用于人类。

人玻连蛋白溶液特性来源：

人类血浆纯度：维龙蛋白的纯度>95%，基于7.5% SDS-PAGE的考马斯亮蓝染色。根据免疫印迹，纤连蛋白污染物含量低于0.04%。

浓度：维龙蛋白浓度为0.5 mg/ml，每0.1 mg维龙蛋白溶解于约pH 7.4的0.2 ml缓冲液中。

细胞附着活性：24孔板用PBS中的维龙蛋白（每孔0.3 ml）在37°C孵育过夜。经BSA阻断后，TIG-3细胞（JCRB 0506）（5 X 104个细胞/每1 ml DMEM/孔）加入并在37°C孵育90分钟。用库仑计数器计数附着的细胞。

pH：维龙蛋白溶解于pH约为7.4的缓冲液中。

储存：建议将维龙蛋白储存在-20°C以下，避免重复冻结和解冻。

(1) Hyaman E.G., M.D. Pierschbacher, Y. ohgren, and E.Ruoslahti (1983) Serm spreading facor (Vitronectin) ispresent at the cell surface and in tissues. Proc. Natl.Acad. Scie. U.S.A. 80 (13): 4003-4007

使用说明：请按照以下建议作为指导，确定您培养系统的合适的涂层条件。

1. 解冻维龙蛋白并使用无血清培养基或PBS稀释至所需浓度。最终溶液应稀释到足够使添加的体积均匀覆盖表面。

2. 将稀释后的适量物质加入培养表面。

3. 在室温下孵育1-2小时。

4. 吸掉剩余物质。

5. 用蒸馏水仔细冲洗培养皿，避免刮伤底部表面。

6. 培养皿已经可以使用。如果保持无菌，它们也可以湿润存放在2-8°C，或者晾干存放。

注意事项：用于生产本产品的人源原料已经检测为乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒（HCV）、人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）和2型（HIV-2）以及梅毒均为阴性。请像处理潜在传染源一样小心处理。

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

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Advanced BioMatrix人重组原弹性蛋白粘附实验&制备步骤

弹性蛋白前体物Tropoelastin是弹性蛋白分子的前体。Tropoelastin通常不以其原生状态存在，因为它在细胞合成后立即发生交联，并在被导出到细胞外基质期间发生交联。弹性蛋白存在于身体的许多组织中，包括皮肤、动脉壁和韧带。弹性蛋白聚集体负责皮肤、动脉壁和韧带的伸展特性，弹性蛋白与几种遗传疾病有关，包括松弛皮肤症（皮肤弹性丧失）和弹性皮肤症（类似于松弛皮肤症，但皮肤真皮层中有葡萄状弹性蛋白聚积）。弹性蛋白赋予组织和器官强度和弹性。这种蛋白质的异常和高度特征性的氨基酸组成使其具有很强的疏水性。它含有三分之一的甘氨酸氨基酸和几种赖氨酸衍生物，这些赖氨酸衍生物用作蛋白单体之间的共价交联。因此，弹性蛋白是一个三维网络，两个交联点之间有60-70个氨基酸。这种分子结构对其弹性特性、不溶性和抗蛋白水解作用起决定作用。Advanced BioMatrix的人源Tropoelastin是通过重组加工方法获得的。该产品以无菌、冻干粉末的形式提供，每支含1毫克。

艾美捷人重组原弹性蛋白，1 mg #ABM-5052-1MG特性鉴定/纯度：

使用电泳（SDS-PAGE）定性评估弹性蛋白的身份和纯度。

数量：弹性蛋白以1毫克装在冻干粉末瓶中供应。

无菌性：无生长 - 最终产品通过低剂量电子束辐射终端灭菌。

内毒素：<10 EU/ml存储：该产品在溶解前存储在-20°C，并在冷冻胶冰包装中发货。建议在重新溶解后将产品存储在2-10°C。

稳定性：产品在-20°C存储时的货架寿命为24个月。在重新溶解后，产品在2-10°C存储时的货架寿命为3个月。

人重组原弹性蛋白细胞粘附实验：

为展示生物活性，将人体真皮成纤维细胞播种在涂有弹性蛋白的表面上，在无血清条件下。所有表面都用含有1%牛血清白蛋白（BSA）的溶液阻断。细胞然后被允许在37°C下附着一个小时。结果显示弹性蛋白具有显著的细胞附着生物活性。对照表面只显示出极少的细胞附着。

注意事项和免责声明：本产品仅供研发使用，不适用于人类或其他用途。请查阅材料安全数据表以获取有关危害和安全操作规范的信息。

人重组原弹性蛋白制备步骤：

1. 向含1毫克弹性蛋白的血清瓶中加入1毫升无菌0.25%冰醋酸溶液。

2. 轻轻混合至物质完全溶解。溶液可能仍然略显混浊。

3. 如有需要，将所需量的溶液从血清瓶转移到稀释容器。使用无菌0.25%冰醋酸溶液进一步稀释至所需浓度。典型的工作浓度范围可从1到50 μg/ml不等。注意：将这些建议作为指导，确定您培养系统的最佳涂层条件。

4. 向培养表面加入适量稀释后的弹性蛋白物质。

5. 在室温或37°C下覆盖孵育1-2小时。

6. 孵育后，吸去任何剩余物质。

7. 用无菌dH2O小心冲洗涂层表面，避免划伤表面。

8. 涂层表面已经可以使用。如果保持无菌性，也可以在2-10°C湿润或风干保存。注意：为保持无菌性，在层流罩中采用无菌技术进行所有操作。

人重组原弹性蛋白文献参考：

J. Holst, S. Watson, M. Lord, S. Eamegdool, D. Bax, L. Nivison-Smith, A.Kondyurin, L. Ma, A. Oberhauser, A. Weiss & J. Rasko, “Substrate elasticityprovides mechanical signals for the expansion of hemopoietic stem andprogenitor cells”, Nature Biotechnology Volume 28, Number 10, October2010, Pages 1123-1130.

Beth A. Kozel , Hiroshi Wachi§, Elaine C. Davis¶, and Robert P. Mecham,Domains in Tropoelastin That Mediate Elastin Deposition in Vitro and in Vivo,J. Biol. Chem., Vol. 278, Issue 20, 18491-18498, May 16, 2003

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Advanced BioMatrix鼠尾胶原溶I型（2D细胞培养）涂层步骤说明

用于 2D 涂层的 RatCol 是 20 mL 的 4 mg/ml I 型鼠尾端胶原溶液，用于 2D 涂层。 RatCol 采用 0.2M 乙酸溶液 (pH 3.0) 制成，经过无菌过滤，可供使用。鼠尾胶原蛋白是可溶性端胶原蛋白。该产品经过无菌过滤，以即用型溶液形式提供。该产品非常适合表面涂层或为培养细胞提供薄层的制备。 RatCol 胶原蛋白适用于使用多种细胞系的应用，包括肝细胞、成纤维细胞和上皮细胞。

艾美捷鼠尾胶原溶I型（2D细胞培养），4 mg/ml, 20 mL#ABM-5056-20ML：

储存/稳定性：该产品存储在2-10°C，并在冷冻胶冰包装中发货。请勿冷冻。产品标签和每个特定批次的分析证书上列有有效期限。有效期适用于按指示处理和存储产品时。注意事项和免责声明：本产品仅供研发使用，不适用于人类或其他用途。请查阅材料安全数据表以获取有关危害和安全操作规范的信息。

鼠尾胶原溶I型（2D细胞培养）涂层步骤注意：

采用无菌实践方法在整个胶原蛋白和其他溶液的制备和处理过程中保持产品的无菌性。

1. 如有需要，将所需量的胶原溶液从瓶子转移到稀释容器。使用无菌0.1%冰醋酸溶液进一步稀释至所需浓度。典型的工作浓度范围可从50到100 μg/ml不等。注意：将这些建议作为指导，确定您培养系统的合适涂层条件。

2. 向培养表面加入适量稀释后的鼠尾胶原。

3. 在室温或37°C下覆盖孵育1-2小时。

4. 孵育后，吸去任何剩余物质。

5. 用无菌培养基或PBS小心冲洗涂层表面，避免划伤表面。

6. 涂层表面已经可以使用。如果保持无菌性，也可以在2-8°C湿润或风干保存。

鼠尾胶原溶I型（2D细胞培养）文献参考：

1. Tanzer, M. L., Cross-linking of collagen. Science,180(86), 561-566 (1973).

2. Bornstein, P., and Sage, H., Structurally distinctcollagen types. Ann. Rev. Biochem., 49, 957-1003(1980).

3. Tomasek, J.J., and Hay, E.D., Analysis of the roleof microfilaments in acquisition and bipolarity andelongation of fibroblasts in hydrated collagen gels.J. Cell Biol., 99, 536-549 (1984).

4. Karamichos, D., et al., Regulation of cornealfibroblast morphology and collagen reorganizationby extracellular matrix mechanical properties.Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 48, 5030-5037(2007).

5. Sato, M., et al., 3-D Structure of extracellular matrixregulates gene expression in cultured hepatic stellate cells to induce process elongation. CompHepatol., Jan 14;3 Suppl 1:S4 (2004)

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Advanced BioMatrix乙酸溶液参数和用途说明

乙酸，20毫摩尔，经配制和准备，可与Advanced BioMatrix提供的其他产品一起使用，如I型甲基丙烯酰化胶原。

该产品经过无菌处理，作为一种即用溶液供应。

艾美捷乙酸溶液，20 mM，50 mL#ABM-5079-50ML：

参数、测试和方法 乙酸，20毫摩尔 #5079

形态 溶液

包装规格 50 毫升

储存温度 室温

灭菌方法 过滤

pH 3.2-3.5

无菌性 - 美国药典修改版 无生长

保质期 自收到日期起至少6个月

渗透压（mOsmo H20/kg） 15-25

乙酸溶液相关研究：

盐酸（HCl）0.01M #5077

Nutragen® 溶液，6 毫克/毫升（牛源）#5010

氢氧化钠（NaOH）0.1M #5078

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Advanced BioMatrix人纤维连接蛋白相关特性及文献参考

用于 2D 涂层的 RatCol 是 20 mL 的 4 mg/ml I 型鼠尾端胶原溶液，用于 2D 涂层。 RatCol 采用 0.2M 乙酸溶液 (pH 3.0) 制成，经过无菌过滤，可供使用。鼠尾胶原蛋白是可溶性端胶原蛋白。该产品经过无菌过滤，以即用型溶液形式提供。该产品非常适合表面涂层或为培养细胞提供薄层的制备。 RatCol 胶原蛋白适用于使用多种细胞系的应用，包括肝细胞、成纤维细胞和上皮细胞。

艾美捷人纤维连接蛋白，冻干 5.0 mg#ABM-5080-5MG应用领域：

Fibronectin用作5 µg/cm2的薄涂层。对于细胞附着和培养，最佳浓度可能因不同细胞类型而异。可能需要一些实验来确定个体细胞培养系统的合适条件。

人纤维连接蛋白特性：

来源：人类血浆

纯度：通过SDS-PAGE测定，Fibronectin的纯度>95%。

包装规格：5毫克/瓶

pH：Fibronectin配制在pH约为7的缓冲液中。

过滤：通过0.2 µ过滤器过滤

存储：在重新溶解之前存储于2至10°C - 建议重新溶解后将Fibronectin存储在-20°C。避免重复冻结和解冻。

人纤维连接蛋白使用说明：

请按照以下建议作为指导，确定您培养系统的合适涂层条件。

1. 加入5毫升无菌水，使浓度达到1毫克/毫升。

2. 在37°C孵育30-60分钟以溶解。不要搅动。

注意：重新溶解后，溶液可能含有少量不溶性聚集物质。这种现象是Fibronectin固有的特性，不会影响产品性能。

3. 将1毫克/毫升的溶液进一步稀释至所需的工作浓度，可用PBS或细胞培养培养基稀释。

4. 对于细胞培养塑料器皿的涂层，5 µg/cm2是典型的用量。

5. 在15至25°C孵育约45分钟。

6. 吸掉剩余物质，注意不要触碰涂层表面。

7. 可以用PBS或培养基冲洗涂层表面，但不是必需的。

8. 培养皿已经准备就绪。涂层的培养容器应立即使用，并且不应让其干燥。

人纤维连接蛋白文献参考：

1. VUENTO, M. & VAHERI, A. (1979) BIOCHEM. J. 183, 331-337.

2. Proctor, R.A. (1987) Rev. Inf. Dis. 9, 317-321.

3. Mosher, D.F. (1984) Ann. Rev. Med. 35, 561-575.

4. Hynes, R. (1985) Ann. Rev. Cell Biol. 1, 67-90.

5. Frinnel, F. (1981) In: Tissue Growth Factors (Baserga, R., ed.) Springer Verlag. Berlin, Heidelberg, NY, PP. 277-299.

6. Ruoslahti, E. et al. (1982) Methods of Enzymol. 82, 803-831.

7. Kleinman, H. K. Klebe, R.J. & Martin, G.R. (1981) J. Cell Biolo. 88, 473-485.

8. Yamada, K. M. (1993) Ann. Rev. Biochem. 52, 761-799.

9. Kleinman, H.K. et al. (1987) Anal. Biochem. 166, 1-13.

10. McKeown-Longo, P.J. (1987) Rev. Inf. Dis. 9, 322-334.

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Advanced BioMatrix人E-钙粘重组蛋白使用说明

人E-钙粘重组蛋白（CDH1）是一个由882个氨基酸组成的蛋白质（1-23 = 信号结构域），属于cadherin超家族的一员。编码的蛋白质是一种依赖钙的细胞间粘附糖蛋白，由五个细胞外cadherin重复序列、一个跨膜区域和高度保守的细胞质尾部组成。该基因的突变与胃癌、乳腺癌、结肠癌、甲状腺癌和卵巢癌相关。功能丧失被认为通过增加增殖、侵袭和/或转移来促进癌症的进展。该蛋白质的外域介导细菌粘附到哺乳动物细胞，细胞质域对内吞作用是必需的。丁胜小组最近的发表指出，涂覆的重组人E-Cadherin蛋白质（细胞外域）单独有益于人类ES细胞培养。

重组人E-钙粘重组蛋白基因（155-710氨基酸片段）经密码子优化构建，并以非融合蛋白形式在大肠杆菌中表达为包含体。最终产品通过独特的“温度转移包含体重折叠”技术重新折叠，并经过色谱纯化。

艾美捷人E-钙粘重组蛋白 0.5 mg/ml，0.1 mg #ABM-5085-0.1MG应用范围：

本产品仅供研发使用，不适用于人类或其他用途。请参阅有关危害和安全操作规范的物质安全数据表。

人E-钙粘重组蛋白使用说明：

请按照以下建议作为指导，确定您培养系统的合适的涂层条件。

1. 解冻E-Cadherin并用无血清培养基或PBS稀释至所需浓度。最终溶液应稀释足够，使添加的体积能够均匀覆盖表面。

注意：在6孔板中每孔使用1毫升PBS。

2. 向每个孔中添加5-10微克蛋白质，并在2至10°C下孵育过夜。

3. 孵育后，吸去剩余物质。

4. 板已准备就绪。如果保持无菌状态，它们也可以存放在2-8°C的潮湿环境或干燥环境中。

E-Cadherin已被用作涂层基质蛋白，用于1）维持长期ES或iPS细胞培养，然后与适当的ES细胞培养基结合，2）作为涂层基质材料用于具有极低水平非特异性相互作用的11R标记重组TF蛋白内源递送iPS方案，以及3）作为抗体生产的天然抗原。

人E-钙粘重组蛋白文献参考：

(1) Yue Xu, et al. Revealing a core signalingregulatory mechanism for pluripotent stem cellsurvival and self-renewal by small molecules. PNASMay 4, Vol 107, No.18. 8129-8134 (2010).

(2) Yamauchi,C., et al. E-cadherin expression onhuman carcinoma cell affects trastuzumab-mediatedantibody-dependent cellular cytotoxicity through killercell lectin-like receptor G1 on natural killer cells. Int. J.Cancer 128 (9), 2125-2137 (2011)

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Advanced BioMatrix人重组CD2在体外T细胞分化研究中的应用研究

CD2是人类T淋巴细胞系的表面抗原，在所有外周血T细胞上表达。它是最早的T细胞标记物之一，在超过95%的胸腺细胞上表达；它也在一些自然杀伤细胞上发现，但不在B淋巴细胞上。针对CD2的单克隆抗体抑制了与羊红细胞形成花环的现象，表明CD2是红细胞受体或与之密切相关。重组CD2蛋白可以用作研究体外扩增人类T细胞的涂层基质蛋白。人类CD2基因的全长细胞外结构域（25-209个氨基酸）带有31个N-末端T7/His标记，以包涵体形式在大肠杆菌中表达。最终产品通过独特的“温度转变包涵体再折叠”技术进行再折叠，并经过色谱纯化。

艾美捷人重组CD2 0.5 mg/ml，0.1 mg #ABM-5086-0.1MG应用：

本产品仅用于研发目的，不适用于人类或其他用途。请查阅物质安全数据表，了解有关危害和安全操作规程的信息。

人重组CD2使用说明：

请将以下建议作为指导，确定您培养系统的合适涂层条件。

1. 解冻CD2并用无血清培养基或PBS稀释至所需浓度。最终溶液应稀释足够，使添加的体积能够均匀覆盖表面。

注意：在T细胞特异培养基中，每孔（6孔板）涂抹1-10微克的这种重组蛋白，可用于体外人类T细胞分化研究。

2. 向培养表面添加适量稀释后的材料。

3. 在室温下孵育约1-2小时。

4. 吸去剩余物质。

5. 小心用蒸馏水冲洗板，避免划伤底部表面。

6. 板已准备就绪。如果保持无菌状态，它们也可以存放在2-8°C的潮湿环境或干燥环境中。

人重组CD2文献参考：

(1) Schraven,B., et al. Association of CD2 and CD45 onhuman T lymphocytes. Nature 345 (6270), 71-74 (1990)

(2) Baecher-Allan,C.M., et al. CD2 costimulationreveals defective activity by human CD4+CD25(hi)regulatory cells in patients with multiple sclerosis. J.Immunol. 186 (6), 3317-3326 (2011)

(3) Kim,E.O., et al. Homotypic cell to cell cross-talkamong human natural killer cells reveals differential andoverlapping roles of 2B4 and CD2. J. Biol. Chem. 285(53), 41755-41764 (2010)

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

https://www.amyjet.com/products/ABM-5086-0.1MG.shtml