艾美捷—如何选择合适的SAM甲基转移酶活性分析试剂盒？

艾美捷—如何选择合适的SAM甲基转移酶活性分析试剂盒？

SAM，也称为 AdoMet，充当修饰蛋白质和 DNA 所需的甲基的供体。SAM 的异常水平与许多异常有关，包括阿尔茨海默氏症、抑郁症、帕金森氏症、多发性硬化症、肝功能衰竭和癌症。

市面上，SAM甲基转移酶酶活性分析试剂盒非常少，而且很多都是贴牌而来。如何选择更加可靠的SAM甲基转移酶活性分析试剂盒？

艾美捷G-Biosciences SAM510系列——SAM甲基转移酶活性分析试剂盒，提供一种连续动力学酶偶联测定方法，可连续监测纯化的SAM依赖性甲基转移酶，而无需使用放射性标记或终点测量。 这是用于蛋白SAM甲基转移酶的灵敏的酶偶联试验。  

1.SAM510: SAM Methyltransferase AssaySAM甲基转移酶活性分析试剂盒（比色法）【GBS-786-430】 100T 样本：纯化的SAM甲基转移酶

2.SAM-fluoro: SAM Methyltransferase Assay SAM甲基转移酶活性分析试剂盒（荧光法）【GBS-786-431】100T 样本：纯化的SAM甲基转移酶

说明：

1.试剂盒需干冰运输，-80℃保存

2.可替代长货期产品：Sigma，CBA096

3.仅供科研使用，不得用于医疗.

艾美捷SAM甲基转移酶活性分析试剂盒原理：

从SAM中去除甲基会产生S-腺苷同型半胱氨酸，通过所含的腺苷同型型半胱氨酸核苷酶将其快速转化为S-核糖同型半胱氨酸和腺嘌呤。这种快速转化阻止了腺苷同型半胱氨酸的积累及其对甲基化反应的反馈抑制。最后，腺嘌呤脱氨酶将腺嘌呤转化为次黄嘌呤，然后转化为尿酸盐和过氧化氢。过氧化氢的产生速率通过510nm处吸光度的增加用比色法测定。由于腺苷高半胱氨酸核苷酶的特异性，该测定法可适用于任何纯化的SAM依赖性甲基转移酶或产生5-腺苷高半胱氨酸或5“-甲硫腺苷的纯化酶。

艾美捷SAM甲基转移酶活性分析试剂盒特色：

1.纯化甲基转移酶的动力学分析或筛选甲基化抑制剂。

2.用于动力学研究的连续酶偶联试验。

3.比色法，非放射性测定。

4.与所有试剂一起提供，包括阳性对照。

5.适用于产生S-腺苷高半胱氨酸或5 '-甲硫腺苷的酶。

SAM甲基转移酶活性分析试剂盒-Nature文章鉴赏：

IF=69, 《MMSET regulates histone H4K20 methylation and 53BP1 accumulation at DNA damage sites》,Nature

体外组蛋白甲基转移酶测定。

用血凝素（HA）标记抗体从293T细胞中表达并纯化了HA-MMSET和HA-53BP1。 重组组蛋白4蛋白来自Upstate。 根据制造商的说明进行体外组蛋白甲基转移酶测定（SAM510：SAM甲基转移酶测定试剂盒，G-Biosciences）。 简而言之，所有蛋白质都用0.1M Tris-HCl，pH 8.0透析。 20mM HA-MMSET（或HA-MMSET（S102A）突变体）和20mM H4（或HA-53BP1）用于每个反应。 在37 ℃下每10 - 30秒测量510nm处的吸光度，直到增加的吸光度达到平台或通过在SDS缓冲液中煮沸终止反应，通过15% SDS-PAGE分离它们的内容物，并通过用抗H4K20Me2抗体（Upstate）进行免疫印迹来观察H4的甲基化。  

来源：https://www.amyjet.com/featured/SAM.shtml

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艾美捷SAM甲基转移酶活性分析试剂盒使用前准备方案

关键生物分子和蛋白质的甲基化在许多生物系统，包括信号转导、生物合成、蛋白质修复、基因沉默和染色质调节。S-腺苷甲硫氨酸（SAM）依赖性甲基转移酶使用SAM ATP后最常用的酶辅因子。SAM，也称为AdoMet作为修饰蛋白质和DNA所需的甲基的供体。SAM的异常水平与许多异常有关，抑郁症、帕金森氏症、多发性硬化症、肝衰竭和癌症。SAM510:SAM甲基转移酶测定是一种连续的酶偶联测定可以连续监测SAM依赖性甲基转移酶（3），无需使用放射性标签或终点测量。

艾美捷G-Biosciences SAM510系列——SAM甲基转移酶活性分析试剂盒，提供一种连续动力学酶偶联测定方法，可连续监测纯化的SAM依赖性甲基转移酶，而无需使用放射性标记或终点测量。 这是用于蛋白SAM甲基转移酶的灵敏的酶偶联试验。  

艾美捷SAM甲基转移酶活性分析试剂盒使用前准备：

1.解冻SAM甲基转移酶测定缓冲液和SAM甲基转移蛋白测定室温下的缓冲添加剂溶液。添加SAM的整个卷SAM甲基转移酶测定缓冲液添加剂缓冲并充分混合。将SAM甲基转移酶测定缓冲液储存在室内添加添加剂后，不要冻结。

2.阳性对照：腺苷同型半胱氨酸：小瓶中含有200µl的1mM腺苷同型半胱氨酸（AdoHcy）溶液。在冰上解冻小瓶。

3.SAM酶混合物，以300µl小瓶提供。每个小瓶适用于36次分析。解冻在冰上只需要您进行化验所需的小瓶数量。不建议SAM酶混合物的重复冷冻/解冻。

4.S‐腺苷蛋氨酸（SAM），冻干供应。重新构成用100µl HCl测定试剂[20mM]的小瓶，产生6.9mM SAM。每个小瓶适用于36次测定。不建议重复冷冻/解冻腺苷蛋氨酸溶液。

5.冻干的SAM比色混合物。添加1ml SAM甲基转移酶测定向SAM比色混合物小瓶中加入添加剂的缓冲液。等待5分钟，然后直到溶解。如果没有使用所有SAM色度混合，建议等分成更小的小瓶，并在-70°C下储存。

6.样品制备：准备含有纯化SAM的测试样品根据您自己的标准，检测依赖性甲基转移酶协议避免使用还原剂和金属螯合剂，因为它们具有对反应的抑制作用。如果存在这些试剂，建议使用O型管分析仪™ 针对0.1M Tris透析样品的微型装置盐酸，pH8.0。

7.使用SAM甲基转移酶测定缓冲液或您自己选择的缓冲液。避免使用还原剂和金属螯合剂，因为它们对反应。

艾美捷SAM甲基转移酶活性分析试剂盒协议：

注：提供的阳性对照是SAM甲基转移酶对照化验一些受体底物、抑制剂、活化剂或缓冲组分可能干扰测定。强烈建议测试以下各项的兼容性使用阳性对照进行SAM甲基转移酶测定的试剂将可疑的不相容试剂替换到阳性对照反应中。有必要滴定测定中的每个酶/底物系统，以确定最佳条件。

注意：SAM甲基转移酶测定中的脱氨酶需要存在于SAM甲基转移酶测定缓冲液中的二价金属离子。这个螯合剂（如EDTA）的存在会耗尽二价金属离子并抑制脱氨酶。如果需要EDTA，则补充额外的锰离子进入反应。

注：还原剂，包括DTT、β-巯基乙醇和TCEP，具有对测定的抑制作用。如果存在，建议对0.1M Tris进行透析盐酸，pH8.0。

SAM甲基转移酶活性分析试剂盒测定范围：

测定的检测范围为0.013‐0.133µmol/min/ml甲基转移酶其相当于每分钟0.01至0.1的吸光度。

图1：SAM510测定定量测定阳性对照：50μM腺苷同型半胱氨酸（AdoHcy）。 

图2：  人赖氨酸特异性组蛋白甲基转移酶SET7/9 20µM TAF‐10作为受体底物。

参考文献：

1. Cheng, X. and Blumenthal, R.M. (1999) S‐Adenosylmethionine Dependent

Methyltransferases: Structures and Functions, World Scientific, Singapore.

2. Schubert, H.L. et al. (2003) Trends Biochem. Sci 28: 329‐335.

3. Dorgan, K.M. et al. (2006) Anal. Biochem. 350:249‐255.

来源：https://www.amyjet.com/featured/SAM.shtml

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艾美捷Relia Tech内皮细胞生长添加剂解决方案

内皮细胞生长添加剂（ECGS/ECGF）是一种培养基补充剂，是一种牛脑提取物，能够促进哺乳动物血管内皮细胞生长的因子。近年来，ECGF作为细胞生长添加物在科研中被广泛应用，也有报道称ECGF对用于单克隆抗体生产的杂交瘤细胞的融合和生长有一定的辅助作用，一起来看看艾美捷Relia Tech内皮细胞生长添加剂解决方案。

以无疯牛病的牛脑提取粗提物，制备内皮细胞生长因子的方法是根据Maciag等的方法（1979）修改过的，内皮细胞生长因子以无菌冻干粉（从含有氯化钠和硫酸链霉素的溶液中无菌冻干）的形式供应，每瓶含有6 mg蛋白质。  

艾美捷Relia Tech内皮细胞生长添加剂:

1.Cat# 300-090：纯ECGF。 由于肝素增强了ECGF粗制剂的有丝分裂活性：

2.Cat#300-090H：补充了带肝素的ECGF (2.5 mg肝素/mg ECGF)。

3.Cat# 300-090-B：是ECGF pro 1，用于血液及微血管内皮细胞（BECs、HMEC）的培养，ECGF pro 1补充重组人VEGF 165（终浓度:10ng/ml）。本品也可补充肝素（Cat# 300-090H-B）。  

含VEGF 165用于微血管内皮细胞培养：

ECGFpro1  300-090-B 6mg

ECGFpro1 +Heparin(肝素) 300-090H-B 6mg

含VEGF-C用于淋巴内皮细胞培养：

ECGFpro2  300-090-L 6mg

ECGFpro2 +Heparin/肝素 300-090H-L 6mg

ECGF用于人微血管内皮细胞（HMEC）培养的合适浓度范围是100-300 μg/ml，加入肝素（50 μg/ml）后的合适浓度范围是10-20 μg/ml。ECGF pro 1因子和牛ECGF pro 2因子对小鼠细胞，牛细胞和人细胞起作用。

*每瓶中含有足够多的生长因子添加物和VEGF-A或VEGF-C，可以为血液或者淋巴内皮细胞提供合适生长环境。  

艾美捷Relia Tech内皮细胞生长添加剂引文赏析：

纯ECGF（Cat# 300-090）   

Pharmacological Characterization of the Microsomal Prostaglandin E2 Synthase-1 Inhibitor AF3485 In Vitro and In Vivo. L. Di Francesco et al., Front Pharmacol. 2020; 11: 374.

PDGFRA defines the mesenchymal stem cell Kaposi’s sarcoma progenitors by enabling KSHV oncogenesis in an angiogenic environment. J. Naipauer et al., PLoS Pathog. 2019 Dec; 15(12): e1008221.

Platelet extracellular vesicles induce a pro-inflammatory smooth muscle cell phenotype. T. Vajen et al., J Extracell Vesicles. 2017; 6(1): 1322454.

Endothelial progenitor cells are differentially impaired in ANCA-associated vasculitis compared to healthy controls. B. Wilde et al., Arthritis Res Ther. 2016; 18: 147.

Mouse lung contains endothelial progenitors with high capacity to form blood and lymphatic vessels. J. Schniedermann et al., BMC Cell Biol. 2010; 11: 50.   

含肝素ECGF（Cat 300-090H）   

Kaposi’s sarcoma herpesvirus activates the hypoxia response to usurp HIF2α-dependent translation initiation for replication and oncogenesis. O. Méndez-Solís et al., Cell Rep. 2021 Dec 28; 37(13): 110144.  

来源：https://www.amyjet.com/featured/ECGF.shtml

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艾美捷内皮细胞生长添加剂参数说明和相关研究

内皮细胞生长因子（ECGF）或内皮细胞生长补充物（ECGS）是一个术语，也用于含有促进内皮细胞生长和维持活性的牛（或猪）脑提取物（T.Maciag，1972和1982）。在早期，这种提取物与胎牛血清一起用作细胞培养补充物，以促进人和阿尼拉内皮细胞的长期连续繁殖。它的使用可以减少对血清的需求，肝素已被证明可以增强提取物的促分裂活性（PB Gordon，1983；Glassberg等人，1982）。

艾美捷Relia Tech内皮细胞生长添加剂也可用于培养没有饲养细胞的杂交瘤细胞（Pintus，1983）。这些脑提取物中的活性因子已被鉴定为aFGF的变体（Burgesse，1985）。该ECGF产品补充了生理浓度的人rec.VEGF-A，以支持培养中血管内皮细胞的生长和分化。

艾美捷Relia Tech内皮细胞生长添加剂相关参数说明：

目录号：300-090-B

规格：6 mg

来源：牛

冻干制剂（冻干）

纯化：粗提取物

生物活性：人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的最佳浓度范围为50-200µg/ml，肝素的最佳浓度（30µg/ml）约为12µg/ml。

物种反应性：人细胞、小鼠细胞、大鼠细胞、牛细胞、猪细胞

重新配制在2 ml预热（37°C）无菌PBS或水中重新配制小瓶内容物。轻轻旋转小瓶，直到内容物溶解。该储备溶液可在无菌组织培养基中进一步稀释以获得所需的工作浓度。建议在使用前对含有稀释产品的培养基进行无菌过滤。

稳定性和储存：在4°C下也稳定数周，建议储存在0°C以下。重组后，应将产品储存在-20°C至-70°C的等分试样中。

应用备注可用于血液内皮细胞培养。

同义词内皮细胞生长因子（ECGF）；内皮细胞生长补充剂（ECGS）

含VEGF 165用于微血管内皮细胞培养：

ECGFpro1  300-090-B 6mg

ECGFpro1 +Heparin(肝素) 300-090H-B 6mg

含VEGF-C用于淋巴内皮细胞培养：

ECGFpro2  300-090-L 6mg

ECGFpro2 +Heparin/肝素 300-090H-L 6mg

ECGF用于人微血管内皮细胞（HMEC）培养的合适浓度范围是100-300 μg/ml，加入肝素（50 μg/ml）后的合适浓度范围是10-20 μg/ml。ECGF pro 1因子和牛ECGF pro 2因子对小鼠细胞，牛细胞和人细胞起作用。

*每瓶中含有足够多的生长因子添加物和VEGF-A或VEGF-C，可以为血液或者淋巴内皮细胞提供合适生长环境。  

艾美捷Relia Tech内皮细胞生长添加剂相关研究：

RET-300-090 ECGF (Crude Extract, cell culture grade) 6ug

RET-300-090-5 ECGF (Crude Extract, cell culture grade) 5x6mg

RET-300-092 ECGF (Crude Extract, cell culture grade) 6ug

RET-300-092-5 ECGF (Crude Extract, cell culture grade) 5x6mg

RET-300-090H ECGF (Crude Extract, cell culture grade) + Heparin 6mg

RET-300-090H-5 ECGF (Crude Extract, cell culture grade) + Heparin 5x6mg

RET-300-092H ECGF (Crude Extract, cell culture grade) + Heparin 6mg

RET-300-092H-5 ECGF (Crude Extract, cell culture grade) + Heparin 5x6mg

RET-300-090-B ECGFpro1 (complete for blood ECs) 6mg

RET-300-090H-B ECGFpro1 + Heparin (complete for blood ECs) 6mg

RET-300-090-L ECGFpro2 (complete for lymphatic ECs) 6mg

RET-300-090H-L ECGFpro2 + Heparin (complete for lymphatic ECs) 6mg  

来源：https://www.amyjet.com/featured/ECGF.shtml

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艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA试剂盒检测原理

1939年，Sorensen等在牛乳的乳清中发现了一种红色的蛋白质，之后陆续有研究人员在人乳和牛乳中纯化出这种红色的蛋白质。直到1960年，Groves针对这种红色蛋白质进行了理化性质的鉴定，发现该蛋白与铁转运蛋白具有相似的性质，之后被称为乳转铁蛋白，现在也称乳铁蛋白（LF）。   

乳铁蛋白是一种天然铁结合糖蛋白，广泛分布于哺乳动物的乳清和大部分生物体液中。人体摄入的乳铁蛋白经蛋白酶水解后，主要以肽的形式被消化吸收，从而发挥其生理功能。近年来，国内外研究报道了乳铁蛋白不仅参与铁的转运，而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能，被认为是一种新型抗菌、抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。  

艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA试剂盒：用于体外定量测量人血清和血浆中的乳铁蛋白的浓度。

艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA试剂盒检测原理：

该试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术。在该测定中，样品中存在的乳铁蛋白与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗乳铁蛋白抗体反应。通过洗涤除去未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的抗乳铁蛋白抗体。这些酶标记抗体与先前结合的乳铁蛋白形成复合物。在又一个洗涤步骤之后，通过加入显色底物3，3 '，5，5'- TMB测定与免疫吸附剂结合的酶。结合的酶的量直接随测试样品中乳铁蛋白的浓度而变化；因此在450 nm处的吸光度是测试样品中乳铁蛋白浓度的量度。测试样品中乳铁蛋白的量可以从标准品构建的标准曲线中计算，并针对样品稀释度进行校正。  

艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA试剂盒引用文章：

Mucosal lactoferrin response to genital tract infections is associated with iron and nutritional biomarkers in young Burkinabé women. European Journal of Clinical Nutrition. 73, pages1464–1472 (2019)   Kamiya Biomedical Company于1983年成立于美国加利福尼亚，1996年公司迁至华盛顿。

来源：https://www.amyjet.com/products/KT-489.shtml

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艾美捷人乳铁蛋白ELISA试剂盒预期用途&注意事项

艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA试剂盒预期用途：

人乳铁蛋白ELISA是一种高度灵敏的双位点酶联免疫测定（ELISA）人类生物样品中乳铁蛋白的测定。仅供研究使用。不用于诊断程序。

引言

乳铁蛋白（LF）是一种具有抗菌活性的多功能铁结合蛋白。它存在于牛奶和其他粘膜中分泌物。众所周知，乳铁蛋白是抵抗感染和炎症的先天防御的一部分，也具有功能调节铁吸收。

艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA试剂盒组分：

1.浓缩稀释剂

一瓶含有50mL 5X浓缩稀释液流动缓冲液。

2.浓缩洗涤液

一瓶含有50mL 20X浓缩洗涤液。

3.酶抗体结合物浓缩物

一个含有150µL 100X浓缩亲和纯化抗人乳铁蛋白抗体的小瓶，该抗体与稳定缓冲液中的HRP。

4.TMB基板溶液

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液（pH 3.3）。

5.停止解决方案

一瓶含12 mL 0.3 M硫酸。

警告：避免接触皮肤。

6.微量滴定板

12个可拆卸的8个井条，位于井支架框架内。孔涂有亲和纯化的抗人乳铁蛋白。

7.人乳铁蛋白校准仪

一个装有冻干人乳铁蛋白校准品的小瓶。

艾美捷Kamiya人乳铁蛋白ELISA试剂盒注意事项：

1.开始化验前仔细阅读说明书。

2.本试剂盒仅供研究使用。

3.我们非常小心地确保了产品的质量和可靠性。然而，在某些情况下

在某些情况下，由于高水平的干扰因素，可能会获得不寻常的结果。

4.不需要任何添加剂或防腐剂来保持试样的完整性。避免叠-氮化物污染。

5.浓度高于0.1%的叠-氮和硫-柳-汞-抑-制-酶反应。

6.其他注意事项：

不要互换不同批次的套件组件。

不要使用过期的套件组件。

保护试剂免受阳光直射。

不要用嘴吸移。

不要在使用试剂的地方食用、饮用、吸烟或涂抹化妆品。

使用手套避免与试剂接触。

停止溶液含有稀硫酸。可能会刺激眼睛和皮肤。接触后用水冲洗。  

来源：https://www.amyjet.com/products/KT-489.shtml

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艾美捷低内毒素CpG ODN寡聚脱氧核苷酸全家族系列

免疫佐剂，是一类可以增强抗原免疫原性的免疫调节分子、化合物或大分子复合物。大多数佐剂可以通过启动先天免疫系统来辅助抗原应答。先天免疫系统通过模式识别受体（pattern recognition receptor，PRR）来感知各种微生物表达的病原体相关分子模式（PAMPs）的存在，激活对病原体的先天性免疫信号通路并调节适应性免疫应答。添加天然或人工合成的佐剂分子有助于恢复或改进纯化抗原的免疫原性，调节免疫应答类型，在现代疫苗学研究中具有重要意义。含 CpG 序列的寡脱氧核苷酸（oligonucleotide，ODN）可模拟哺乳动物免疫系统的“危险信号”，参与机体免疫应答的调节，增强疫苗的免疫原性。

一起来了解一下艾美捷Enzo Life Sciences低内毒素的CpG ODN，寡聚脱氧核苷酸全家族系列：

ALX-746-001-C100 ODN 1668 (TLRGRADE) (synthetic) 100ug B型。小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-051-M001 ODN 1668 (TLRGRADE) (synthetic) (BULK) 1mg B型。小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-200-T100 ODN 1720 (TLRGRADE) (synthetic) (Control) 100tests ODN 1668的阴性对照

ALX-746-002-C100 ODN 1826 (TLRGRADE) (synthetic) 100ug B型。小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-052-M001 ODN 1826 (TLRGRADE) (synthetic) (BULK) 1mg B型。小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-201-C100 ODN 1982 (TLRGRADE) (synthetic) (Control) 100ug ODN 1826的阴性对照

ALX-746-003-C100 ODN 1585 (TLRGRADE) (synthetic) 100ug A型。小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-053-M001 ODN 1585 (TLRGRADE) (synthetic) (BULK) 1mg A型。小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-006-C100 ODN 2006 (TLRGRADE) (synthetic) 100ug B型。人和小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-056-M001 ODN 2006 (TLRGRADE) (synthetic) (BULK) 1mg B型。人和小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-206-C100 ODN 2137 (TLRGRADE) (synthetic) (Control) 100ug ODN 2006的阴性对照

ALX-746-005-C100 ODN 2216 (TLRGRADE) (synthetic) 100ug A型。人TLR9的特异性配体

ALX-746-055-M001 ODN 2216 (TLRGRADE) (synthetic) (BULK) 1mg A型。人TLR9的特异性配体

ALX-746-020-C100 ODN 2395 (TLRGRADE) (synthetic) 100ug C型。人和小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-070-M001 ODN 2395 (TLRGRADE) (synthetic) (BULK) 1mg C型。人和小鼠TLR9的特异性配体

ALX-746-250-C200 iODN 2088 (class I) (endotoxin-free) (synthetic) 200ug 抑制性iODN，可能影响TLR7与TLR8通路

ALX-746-251-T050 iODN (ttaggg)4 (class II) (endotoxin-free) (synthetic) 50tests 抑制性iODN，基于ODN A151，抑制STAT通路

ALX-505-007-L010 ddWater (endotoxin-free) (sterile) 10ml 内毒素<0.0002EU/mg

ALX-505-007-L010 PBS (endotoxin-free) (sterile) 10ml 内毒素<0.0002EU/mg

艾美捷Enzo CpG ODN，寡聚脱氧核苷酸全家族系列特点：

1、无内毒素水，ddWater

2、除对照产品外，产品内均已提供阴性对照

3、无菌，冻干粉，内毒素<0.002EU/?g

4、BULK：可用于体内实验  

艾美捷Enzo CpG ODN，寡聚脱氧核苷酸全家族系列Cell文章鉴赏：

IF=66.8, 《Systematic discovery of TLR signaling components delineates viral-sensing circuits 》,Cell

来源：https://www.amyjet.com/featured/CpG-ODN.shtml

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艾美捷寡聚脱氧核苷酸CpG ODN：ODN 1668

艾美捷CpG ODN：ODN 1668：具有硫代磷酸酯骨架的CpG寡脱氧核苷酸（B型）。小鼠TLR9（Toll样受体9）的特异性配体。

艾美捷Enzo CpG ODN：ODN 1668详细信息：

序列：5'-tccatgtgtcctgatgct-3'（小写字母表示硫代磷酸酯键）。

数量：100µg（~15nmol）。当在200µl测定体积（即96孔微量滴定板）中进行时，足以以0.1-0.5µg/孔进行至少100次细胞活化测定。

配方：冻干。

纯度详情：活性和内毒素测试-TLRGRADE®。

内毒素含量：<0.002EU/µg（LAL试验；BioWhittaker）

重组：对于100µM储备溶液，将小瓶总含量溶解在150µl无内毒素水（包括在内）或PBS（单独订购）中。为了获得合适的溶解，建议采用以下步骤：

-加入50%的溶剂并溶解10分钟。

-加入剩余50%的溶剂并充分混合。

-适度加温可能有助于溶解。

运输：环境

长期储存：+4°C

使用/稳定性：当储存在+4°C时，水储备溶液稳定1天。

处理：避光。为了在解冻后最大限度地回收产品，请在打开瓶盖之前离心小瓶。重构后，制备等分试样并储存在-20°C下。

技术信息说明：包括1瓶ddWater（不含内毒素）

RUO-仅供研究使用

图：ODN 1668（TLRGRADE®）（合成）（编号ALX-746-001）对小鼠巨噬细胞的TLR9依赖性激活。方法：添加指定浓度的ODN后，在无血清条件下每200µl孔培养5x105个细胞。通过IL12-p40诱导测定细胞活化。只有CpG ODN 1668（编号ALX-746-001），而不是相应的GpC对照ODN 1720（产品号ALS-746-200）激活野生型小鼠巨噬细胞。激活完全依赖于TLR9的存在，如用源自TLR9缺陷小鼠的细胞处理的。注意x轴和y轴的对数刻度以及活性ODN的高活性：每200µl孔0.010-0.100nmol（10-100nM，对应约0.5-5µg/ml）已达到最大刺激。

艾美捷Enzo CpG ODN：ODN 1668文献参考：

Distinct effects of different adjuvants in the mouse model of allergic airway inflammation: H.S. Shin, et al.; Asian Pac. J. Allergy Immunol. 40, 111 (2022),

Paneth Cells Regulate Lymphangiogenesis under Control of Microbial Signals during Experimental Portal Hypertension: M. Hassan, et al.; Biomedicines 10, 1503 (2022),

Ly6C+ monocyte efferocytosis and cross-presentation of cell-associated antigens: S.R. Larson, et al.; Cell Death Differ. 23, 997 (2016), Application(s): Efferocytosis assay, in vivo studies, Abstract;

Activation of murine macrophages via TLR2 and TLR4 is negatively regulated by a Lyn/PI3K module and promoted by SHIP1: S. Keck, et al.; J. Immunol. 184, 5809 (2010), Abstract;

来源：https://www.amyjet.com/featured/CpG-ODN.shtml

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艾美捷CMRL-1066培养基背景和化学性质分析

艾美捷CMRL-1066培养基背景：

CMRL-1066是20世纪60年代后期在康诺医学研究实验室开发的一种化学定义的培养基。CMRL-1066最初设计用于非补充培养物中的小鼠L细胞。虽然CMRL-1066是为无血清培养而开发的，但它可以补充血清并用于支持多种细胞类型的生长。适合生长多种细胞类型，特别是成纤维细胞样细胞。

艾美捷CMRL-1066培养基化学性质：

外观：淡粉色至橙色，均匀，自由流动的粉末

溶解度：黄色至橙色，清澈，完全

pH：3.4±0.5

内毒素：≤1单位/毫升

每升说明：将9.7g溶解在800-900ml ddH2O中，轻轻搅拌直至完全溶解。搅拌时加入2.2g碳酸氢钠。将培养基的pH值调整至低于所需水平的0.1-0.3 pH单位。添加额外的水，使溶液进入1L过滤器，使用0.22微米的膜过滤器进行消毒。等分到无菌容器中。不要高压釜。含有不稳定的化合物，可能会因高压灭菌而损坏。

储存和稳定性：在室温下储存粉状介质。收到后可稳定12个月。打开的瓶子应盖紧盖子，并保持在黑暗、低湿度的环境中。准备好的培养基应保持在4°C，并在短时间内使用。

艾美捷CMRL-1066培养基配方：

无机盐：

Calcium Chloride, anhydrous 0.20

Magnesium Sulfate, anhydrous 0.09769

Potassium Chloride 0.40

Sodium Acetate, anhy 0.05

Sodium Phosphate Monobasic, anhy 0.122

Sodium Chloride 6.80

氨基酸：

L-Alanine 0.025

L-Arginine 0.05787

L-Aspartic Acid 0.03

L-Cysteine•HCl•H2O 0.26

L-Cystine 0.02

L-GlutamicAcid, Sodium 0.0862

L-Glutamine Absent

Glycine 0.05

L-Histidine•HCl•H2O 0.02

trans-4-Hydroxy-L-Proline 0.01

L-Isoleucine 0.02

L-Leucine 0.06

L-Lysine•HCl 0.07

L-Methionine 0.015

L-Phenylalanine 0.025

L-Proline 0.04

L-Serine 0.025

L-Threonine 0.03

L-Tryptophan 0.01

L-Tyrosine 0.04

L-Valine 0.025

维生素：

PABA 0.00005

L-Ascorbic Acid•Na 0.05

D-Biotin 0.00001

Choline Chloride 0.0005

Coenzyme A•Na 0.0025

Cocarboxylase 0.001

2'-Deoxyadenosine 0.01

2'-Deoxycytidine•HCl 0.0116

2'-Deoxyguanosine 0.01

Folic Acid 0.00001

myo-Inositol 0.00005

5-Methyldeoxycytidine 0.0001

ß-NAD 0.007

ß-NADP•Na 0.001

Nicotinic Acid 0.000025

Niacinamide 0.000025

D-PantothenicAcid•Ca 0.00001

Pyridoxal•HCl 0.000025

Pyridoxine•HCl 0.000025

Riboflavin 0.00001

Flavine Adenine Dinucleotide•2Na 0.000106

Thiamine•HCl 0.00001

来源：https://www.amyjet.com/brand/Usbiological-china-distributor.shtml

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艾美捷NCTC-135培养基化学性质和基本配方

艾美捷NCTC-135培养基背景：

NCTC培养基，由马里兰州贝塞斯达国家癌症研究所（NCI）生物实验室组织培养科开发，用于建立和维持L929小鼠细胞株。

艾美捷NCTC-135培养基化学性质：

外观：白色至浅粉色，均匀，自由流动的粉末

溶解度：无色至微黄色，清澈，完整

pH：5.5±1.0

每升说明：将7.89g溶解在800-900ml ddH2O中，轻轻搅拌直至完全溶解。如果需要，添加2.2g/L碳-酸-氢-钠。将培养基的pH值调整至所需水平。添加额外的水，使溶液达到1L。使用0.22微米膜过滤器进行过滤消毒。等分到无菌容器中。不要高压釜。含有不稳定的化合物，可能会因高压灭菌而损坏。

储存和稳定性：在室温下储存粉状介质。收到后可稳定12个月。打开的瓶子应盖紧盖子，并保持在黑暗、低湿度的环境中。准备好的培养基应保持在4°C，并在短时间内使用。

艾美捷NCTC-135培养基配方：

矿物质和辅酶毫克/升：

Calcium Chloride, anhydrous 200.00

Coenzyme A•Na 2.50

Cocarboxylase 1.00

Ferric Nitrate•9H2O 0.10

Magnesium Sulfate 100.00

beta-NAD 7.00

beta-NADP•Na (NADP) 1.00

Potassium Chloride 400.00

Flavin Adenine Dinucleotide•2Na (FAD) 1.00

Sodium Chloride 6600.00

Sodium Phosphate, Mono, anhydrous 50.00

Uridine-5’-Triphosphate (UTP) 1.00

维生素：

p-Aminobenzoic acid 0.125

Ascorbic acid (Vitamin C) 50.00

Biotin (Vitamin H) 0.025

Choline chloride (Vitamin B7 ) 1.25

Cyanocobalamin 0.25

Calciferol (Vitamin D2) 0.25

Folic acid (Vitamin B9) 0.025

myo-Inositol 0.125

Menadione (Vitamin K) 0.025

Niacinamide (Vitamin B3) 0.0625

D-Pantothenic Acid, Calcium Salt 3.025

Pyridoxal HCl 0.0625

Riboflavin (Vitamin B2) 0.025

Thiamine (Vitamin B1) 0.25

Tocopherol (Vitamin E) 0.025

Retinol (Vitamin A) 0.25

氨基酸：

L-Amino-n-butyric acid 6.00

L-Alanine 32.00

L-Arginine 31.00

L-Asparagine 8.00

L-Aspartic acid 10.00

L-Cystine 10.00

L-Glutamic acid 8.00

L-Glutamine 136.00

Glycine 14.00

L-Histidine 20.00

L-Hydroxyproline 4.00

L-Isoleucine 18.00

L-Leucine 20.00

L-Lysine 31.00

L-Methionine 4.00

L-Ornithine 7.00

L-Phenylalanine 17.00

L-Proline 6.00

L-Serine 11.00

Taurine 4.00

L-Threonine 19.00

L-Trytophan 18.00

L-Tyrosine 16.00

L-Valine 25.00

来源：https://www.amyjet.com/brand/Usbiological-china-distributor.shtml