艾美捷FLIVO探针：用于细胞活体凋亡检测，助力科研！

艾美捷FLIVO探针：用于细胞活体凋亡检测，助力科研！

细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡，乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此，有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。

FLIVO®(荧光活体)是一种强大的无创检测体内半胱天冬酶活性的方法。NIR-FLIVO 690示踪剂是caspases的非细胞毒性、细胞透过荧光抑制剂，优化用于整个活体动物。ICT的NIR-FLIVO 690示踪探针包含大多数caspases (Val-Ala-Asp或VAD)的首选结合序列。

接下来咱就聊一聊艾美捷ImmunoChemistry（ICT）FLIVO探针——用于细胞凋亡活体检测，助力大家高精度检测。

一、艾美捷FLIVO探针活体凋亡检测之FAM-FLIVO®体内Poly Caspase检测试剂盒：

FLIVO®试剂盒提供了一种简单、准确的方法来检测体内caspase活性。类似于我们的FLICA®探针，但优化了整个活动物标记。为标记含有活性caspases的细胞，静脉注射FLIVO并让其循环约60分钟。由于试剂是细胞本身的，当它在体内循环时，它很容易在遇到的所有细胞内扩散或扩散。如果细胞内存在活跃的caspase酶，FLIVO会与caspase活性位点形成不可逆共价键。如果细胞膜完好，结合的FLIVO探针将留在细胞内。任何未绑定的FLIVO将在大约一个小时内从动物的循环中移除。组织中剩余的绿色荧光信号是注射试剂时发生的半胱天冬酶活性的直接测量。一旦多余的FLIVO从动物体内清除，组织就可以进行分析了。无需进一步染色。组织可以通过窗腔系统或其他可接近的腔直接观察。或者，目标组织可以被移除并进行分析。FLIVO非常敏感，会检测到自然发生的背景细胞凋亡。凋亡细胞的caspase活性高于对照细胞，因此它们在FLIVO作用下荧光更亮。

二、艾美捷FLIVO探针活体凋亡检测之FLIVO示踪剂：

准备样品和对照品。

用45 mL diH20按1:10稀释10X注射缓冲液。

用50μL DMSO重组NIR-FLIVO 690示踪剂。

用450μL 1X注射缓冲液稀释NIR-FLIVO 1:10。

静脉注射50μL。

让NIR-FLIVO循环4小时。

想象动物。NIR-FLIVO690示踪剂在690nm激发，在709nm发射。

如果不直接查看，则切除组织并处理样本以进行进一步分析。

可选：用其他染色剂（如Hoechst 33342或抗体）标记切除的样品。

如果需要，修复切除的样本。

用荧光显微镜或流式细胞仪分析切除的样品。

以上，是有关于艾美捷FLIVO探针活体凋亡检测的相关研究方案。

来源：https://www.amyjet.com/featured/in-vivo.shtml

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细胞凋亡活体检测—艾美捷FLIVO探针活体凋亡检测工具

Apoptosis plays an important role in embryonic development, hematopoiesis, maturation of immune system, maintenance of cell stability and growth balance of normal tissues and organs, and even aging of the body. Therefore, the research on apoptosis has been widely carried out in clinical and basic fields, and the detection method of apoptotic cells is very important.

FLIVO ® (Fluorescent in vivo) is a powerful non-invasive method to detect the activity of caspase in vivo. NIR-FLIVO 690 tracer is a non cytotoxic, fluorescent inhibitor of caspases, which is optimized for use in the whole living animal. ICT's NIR-FLIVO 690 tracer probe contains the preferred binding sequence for most caspases (Val Ala Asp or VAD).

Next, let's talk about the ImmunoChemistry (ICT) FLIVO probe, which is used for in vivo detection of apoptosis, to help you with high-precision detection.

FLIVO是细胞渗透性,无毒的caspase抑制剂,可在体内检测caspase介导的活体动物凋亡。

艾美捷ImmunoChemistry（ICT）FLIVO探针系列天冬氨酸蛋白酶(Caspases)活性检测试剂盒，及 FLIVO示踪剂，主要用于细胞凋亡活体检测，助力科研。

FLIVO探针是什么？

FLIVO(FLuorescence in vIVO)探针是细胞渗透性、无毒性的天冬氨酸蛋白酶(Caspases)荧光抑制剂，FLIVO可以用于检测活体动物体内Caspase介导的细胞凋亡、焦亡。FLIVO非常敏感，自然发生的低水平细胞凋亡也会被检测到。  

艾美捷 FLIVO探针活体凋亡检测之FAM-FLIVO®体内Poly Caspase检测试剂盒：  

1. FAM FLIVO In vivo Poly Caspase Assay * * * Green carboxyl fluorescein (# 980, 6T; # 981, 24T)

Samples: living animals, isolated tissues

2. SR-FLIVO In vivo Poly Caspase Assay * * * Red sulfonylrhodamine B (# 982, 6T; # 983, 24T)

Samples: living animals, isolated tissues

艾美捷ICT FLIVO探针活体凋亡检测之FLIVO示踪剂：

9112  NIR-FLIVO 690 Tracer In vivo Assay ***Fluorescent label Dylight690 living animals and tissues in vitro 20T  

9113  NIR-FLIVO 690 Free Dye Control Assay ***Fluorescent label Dylight690 living animals and tissues in vitro 20T

9114  NIR-FLIVO 747 Tracer In vivo Assay ***Fluorescent label Dylight747 Living animals and tissues in vitro 20T

9115  NIR-FLIVO 747 Free Dye Control Assay***荧光标签Dylight747 Fluorescent label Dylight747 Living animals and tissues in vitro 20T  

* 仅供科研使用，不得用于医疗.

FLIVO探针的活体使用对药物测定研究很有价值，因为通过活体动物的荧光成像可测定药物反应性所引起的凋亡水平升高或降低。凋亡水平的升高使得粘附的探针更多，因此荧光强度增加。此外，活体技术避免了从动物上取出细胞和组织的需要，这会进一步诱导凋亡。

来源：https://www.amyjet.com/featured/in-vivo.shtml

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使用方法丨艾美捷Caspase-1活性分析试剂盒介绍

如何动态检测活细胞内的Caspase-1的活性，做更真实的实验？艾美捷推荐Immunochemistry Tech（ICT）的FLICA系列科研工具，轻松检测活细胞Caspase-1 活性。  

艾美捷Immunochemistry Caspase-1活性分析试剂盒原理：

FLICA试剂FAM-YVAD-FMK（Ex/Em = 488nm/530nm），是无细胞毒性的，细胞膜渗透抑制剂。进入每个细胞，并不可逆地与活化的caspase-1结合。任何未结合的FAM-YVAD-FMK-FLICA试剂扩散出细胞并被冲走。因此留在细胞内的绿色荧光直接体现了活性caspase-1酶活性的。荧光结果可通过荧光酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪进行分析。

艾美捷Immunochemistry Caspase-1活性分析试剂盒组分：

推荐的材料：

•DMSO，每小瓶50µL，用于重建FLICA

•DiH20，135-540 mL，稀释10X凋亡洗涤缓冲液

•磷酸盐缓冲盐水（PBS）pH 7.4，最高100mL，稀释FLICA并处理细胞

•处理细胞时，将FBS和/或BSA添加到缓冲液中

•在实验条件下处理的培养细胞或组织可随时标记

•诱导胱天蛋白酶活性并产生对照品如星孢菌素（#6212），喜树碱（#6210）或尼格瑞林（#6698)

•90%乙醇或3%甲醛，产生活/死碘化丙啶染色对照

•黑色96孔微量滴定板，平底，未处理，非无菌（ICT目录#266）。如果使用底部读数仪器，使用黑色板墙壁和透明的底部。如果在使用无菌黑色组织培养板。

•血细胞仪

•200 x g离心

•15 mL聚丙烯离心管（每个样品）

Caspase-1活性分析试剂盒检测设备：

可通过以下方法分析分析：

•荧光显微镜

•荧光板读取器

•流式细胞仪

使用最接近这些设置的过滤器对：

•FAM-FLICA最佳激发波长为488-492 nm，峰值发射波长为515-535纳米。

•在长通滤波器下观察碘化丙啶（PI）488-492nm，发射>610nm；核结合PI在617nm处具有最大发射。

•使用365 nm激发的紫外滤光片可以看到Hoechst 33342以及480nm的发射。

实验准备：

用FLICA染色细胞可以在几个小时内完成。然而FLICA用于活细胞，需要定期维护和提前几天栽培。此外，一旦正确的数字已经培养了个细胞，必须为实验分配时间治疗或半胱天冬酶激活过程。创建细胞群，例如：

a、 暴露于实验处理的细胞

b、 接受安慰剂的阴性对照细胞群

当FLICA检测到催化活性形式的胱天蛋白酶时酶，计划实验，以使FLICA在细胞中预期胱天蛋白酶被激活时被稀释和给药。30X FLICA的推荐体积为每300µL细胞10µL3-5 x 105细胞/mL，但数量可能因实验而异条件和用于分析的仪器。每位研究者应调整FLICA的量以适应特定细胞系研究条件。将细胞培养至适合特定实验条件的最佳密度或凋亡诱导方案。细胞密度不应超过106细胞/超过此浓度培养的细胞可开始自然生长进入凋亡。可能需要进行初步实验来确定何时以及使用多少FLICA作为产生的正信号是培养过程中caspase活性的直接测量。

来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-97.shtml

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Caspase-1活性分析：艾美捷FAM-FLICA试剂盒解决方案

艾美捷FAM-FLICA Caspase-1 (YVAD) Assay Kit FAM-FLICA Caspase-1 活性分析试剂盒检测方案：

1、凋亡诱导：

在开始实验之前，确定可重复的方法用于通过触发胱天蛋白酶活性获得阳性对照。此过程随每个细胞系而显著变化。例如，细胞凋亡可能是用2-4µg/mL喜树碱或1-2µM星形孢霉素诱导>4小时。  

2、焦下垂诱导：

最佳的焦下垂/胱天蛋白酶-1诱导方案将有显著差异在细胞系之间。在开始实验之前，确定获得caspase-1阳性对照的可重复方法。例如在细胞培养基中使用5-10ng/mL肉豆蔻酸佛波酯（PMA）12-24小时（直到细胞粘附），然后暴露于100 ng/mL脂多糖（LPS）和5mM三磷酸腺苷（ATP）混合24小时。或者，在37°C下，在1-20µM的细胞培养基中使用尼格瑞金，可在细胞中诱导2-24小时。每个研究者应调整Nigericin的浓度和治疗期，以适应特定的细胞系和研究条件。

3、FLICA的制备：

FLICA以冻干粉形式提供小瓶内的虹彩光泽。避免光线照射，并在以下情况下使用手套处理。因为必须立即使用30X FLICA溶液，所以在染色前准备好。1.用50µL DMSO重新配制每小瓶FLICA，形成150X股票储备溶液应为无色至黄色或橙色。一旦复原，可将其储存在≤-20°C，保护6个月在此期间解冻不超过两次。2.在加入样品和对照品之前，立即稀释通过向每个小瓶中添加200µL PBS，形成30X FLICA 1:5解决方案在稀释到水溶液中30分钟内使用30X FLICA

缓冲区。

4、1X凋亡洗涤缓冲液的制备：

ICT的细胞凋亡洗涤缓冲液（目录#634和#635，AWB）是一种等渗溶液，用于在暴露于FLICA后洗涤细胞。它含有哺乳动物蛋白质，可稳定用FLICA染色的细胞和叠丨氮化钠细菌生长（1X凋亡洗涤缓冲液含有0.01%w/v钠叠丨氮化物）。可以使用含有FBS和其他添加剂的细胞培养基以洗涤细胞而不是细胞凋亡洗涤缓冲液。

10X细胞凋亡洗涤缓冲液在冷藏期间可能形成沉淀。如果发生这种情况，轻轻加热，直到所有晶体溶解。不要煮沸。

在diH2O中以1:10稀释10X凋亡洗涤缓冲液。例如，添加15mL 10X细胞凋亡洗涤缓冲液至135mL diH2O，总共150mL。

•1X凋亡洗涤缓冲液可储存在2-8°C，或冷冻并在6个月内使用。

图：Jurkat细胞用阴性对照DMSO（左）或凋亡诱导剂星孢霉素（右）处理4小时，然后用ICT染色绿色聚半胱天冬酶抑制剂探针FAM-VAD-FMK（试剂盒#92）1小时。细胞洗涤两次并在流式细胞仪上读取。阴性对照仅在3.3%的细胞群中表现出半胱天冬酶活性（P3，左侧直方图），而星孢霉素治疗诱导的caspase活性为94.8%（P3，右直方图）。这是28:1的比率。数据特蕾西·墨菲女士提供，ICT，10G5。

艾美捷Immunochemistry Caspase-1活性分析试剂盒组分：

The test size kit contains:

• 1 bottle of FAM-FLICA cystatin reagent

• 1 bottle of 10X apoptosis washing buffer (15 mL), # 635

• 1 bottle of fixative (6 mL), # 636

• 1 vial of iodopropyl, 250 µ g/mL (1 mL), # 638

• 1 vial Hoechst 33342200 µ g/mL (1 mL), # 639

The standard size kit contains:

• 4 bottles of FAM-FLICA cystatin reagent

• 1 bottle of 10X apoptosis washing buffer (60 mL), # 634

• 1 bottle of fixative (6 mL), # 636

• 1 vial of iodopropyl, 250 µ g/mL (1 mL), # 638

• 1 vial Hoechst 33342200 µ g/mL (1 mL), # 639.

将未开封的套件和每个未开封的组件储存在2-8°C，直到到期日期。一旦用DMSO重新配制，立即使用FLICA，或在≤-20°C的温度下储存6个月，避光，解冻时间不超过在这段时间内两次。

艾美捷Immunochemistry Caspase-1活性分析试剂盒实验准备:

用FLICA染色细胞可以在几个小时内完成。然而FLICA用于活细胞，需要定期维护和提前几天栽培。此外，一旦正确的数字已经培养了个细胞，必须为实验分配时间治疗或半胱天冬酶激活过程。创建细胞群，例如：

a、 暴露于实验处理的细胞

b、 接受安慰剂的阴性对照细胞群治疗

当FLICA检测到催化活性形式的胱天蛋白酶时酶，计划实验，以使FLICA在细胞中预期胱天蛋白酶被激活时被稀释和给药。30X FLICA的推荐体积为每300µL细胞10µL3-5 x 105细胞/mL，但数量可能因实验而异条件和用于分析的仪器。每位研究者应调整FLICA的量以适应特定细胞系研究条件。

将细胞培养至适合特定实验条件的最佳密度或凋亡诱导方案。细胞密度不应超过106细胞/

超过此浓度培养的细胞可开始自然生长进入凋亡。可能需要进行初步实验来确定何时以及使用多少FLICA作为产生的正信号是培养过程中caspase活性的直接测量时期.

来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-97.shtml

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艾美捷RPMI-1640培养基含L-谷氨酰胺的功能和研究

Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 培养基起初是为了悬浮培养人白血病单层细胞而开发的。RPMI 1640 培养基被发现适用于多种哺乳动物细胞，包括 HeLa 细胞、Jurkat 细胞、MCF-7 细胞、PC12 细胞、PBMC 细胞、星形胶质细胞和癌细胞。针对广泛的细胞培养应用，艾美捷的 RPMI-1640培养基，含L-谷氨酰胺，使用培养基选择工具查找适合的配方。

艾美捷RPMI-1640培养基含L-谷氨酰胺相比其他培养基，具有特别的效果让我们一起来看看吧！

艾美捷RPMI-1640培养基含L-谷氨酰胺化学性质：

外观：粉色至橙色均匀、自由流动的粉末

SolubleMagenta，清晰、完整

pH：7.9±0.9

内毒素：≤1EU/ml

每升说明将10.4g溶解在900ml ddH2O中，搅拌直至完全溶解。不要加热。如果需要，在搅拌下加入2g碳酸氢钠。将培养基的pH值调整至低于所需pH值0.1-0.3个pH单位。添加额外的水，使溶液达到最终体积。使用0.22um膜过滤消毒。等分到无菌容器中。

注：可能需要用1N HCl将pH值降至4.0，以完全溶解本产品。在其完全溶解后，可在加入碳酸氢钠之前用1N NaOH将pH值升高至7.2。

储存和稳定性在室温下储存粉状介质。收到后可稳定12个月。打开的瓶子应盖紧盖子，并保持在黑暗、低湿度的环境中。准备好的培养基应保持在4°C，并在短时间内使用。

供体外诊断使用。注意：不可用于人类或动物的治疗。

艾美捷RPMI-1640培养基含L-谷氨酰胺相关研究：

R8999-01 RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine (Powder)   10L

R8999-17 RPMI 1640 Medium ATCC Modification (Powder)   10L

R9003 RPMI 1640 w/o L-Proline (Powder)   10L

R8999 RPMI 1640 Medium w/L-Glutamine (Powder)   10L

R9001 RPMI 1640 w/o L-Glutamine |(Powder)   10L

R8998-07 RPMI 1640 Medium w/MOPS (Powder)   10L

R9001-01 RPMI 1640 w/o L-Glutamine, Glycine (Powder)   10L

R9000-01 RPMI 1640 Medium w/L-Glutamine w/o L-Phenylalanine (Powder)   10L

R8999-06 RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine, Methionine (Powder)   10L

R8998-01A  RPMI 1640 Medium w/Glutamax, 25mM HEPES (Powder)   10L

R8998 RPMI 1640 Medium w/L-Glutamine, 25mM HEPES (Powder)   10L

R8998-04 RPMI 1640 Medium w/L-Glutamine, 20mM HEPES (Powder)   10L

R8998-03 RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine, Inositol (Powder)   10L

R8999-03 RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine, Leucine (Powder)   10L

R8999-05 RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine w/Hepes (Powder)   10L

来源：https://www.amyjet.com/products/MBS652870.shtml

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含L-谷氨酰胺，艾美捷RPMI-1640培养基研究说明

RPMI是洛斯维·帕克纪念研究所研发的一类细胞培养基，1640是培养基代号。其中含有10%胎牛血清。RPMI1640培养基与其他培养基不同，因为它含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。RPMI-1640培养基含有生物素，维生素B12和PABA，这些在Eagle'sMinimalEssentialMedium或Dulbecco'sModifiedEagleMedium中均未发现。

RPMI-1640培养基在悬浮培养中可支持淋巴母细胞样细胞，但也证实可支持众多锚定依赖性细胞。最初设计为需要补充血清，但在无血清条件下，RPMI1640也表现出可支持多种细胞系的生长。它还广泛用于细胞融合和杂交细胞的生长。

RPMI-1640培养基已用于培养人正常和肿瘤白细胞。当适当补充RPMI-1640时，已证明其广泛适用于支持多种类型的培养细胞的生长，包括72小时植物血凝素（PHA）刺激试验中的新鲜人淋巴细胞。

艾美捷RPMI-1640培养基含L-谷氨酰胺和25mMHEPES，不含碳酸氢钠，粉末形式。

英文名字：RPMI 1640, With L-glutamine and 25 mM HEPES. Without sodium bicarbonate.

外观：粉色至橙色均匀、自由流动的粉末

pH：7.9±0.9 

内毒素：≤1EU/ml

等级：细胞培养等级

储存温度：室温/4℃

艾美捷RPMI-1640培养基含L-谷氨酰胺文献参考：

1. Moore, G.E., Gerner, R.E., Franklin, H.A., JAMA 199: 519-524 (1967). 2. Moore, G.E., Woods L.K., Tissue Culture Association Manual 3: 503-508. (1976). 3. Moore, G.E. Gerner, R.E., Minowada, J., Twenty-First Annual Symposium on Fundamental Cancer Research 41-63. (1967, February). 4. Moore, G.E. Gerner, R.E., Kitamura,H., NY State Journal of Medicine 68: 2054-2060 (1968).

艾美捷RPMI-1640培养基含L-谷氨酰胺相关研究：

R8998-02  RPMI 1640 Medium w/L-Glutamine, HEPES, w/o Leucine   10L

R8998-02A  RPMI 1640 Medium w/L-Glutamine, HEPES, w/o Lysine   10L

R8999-15 RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine, L-Serine, HEPES (Powder)   10L

R9000-02 RPMI 1640 Medium w/o Sodium Cloride, Glutamine (Powder)   10L

R8999-03A RPMI 1640 Medium w/o L-Arginine, L-Leucine, L-Lysine (Powder)   10L

R8999-04   RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine, Sodium Phosphate (Powder)   10L

R8999-08  RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine, Phenol Red (Powder)   10L

R8999-02A  RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine, Calcium Free (Powder)   10L

R8999-12  RPMI 1640 Medium w/o L-Glutamine, Leucine, Phenol Red (Powder)   10L

R8999-04A  RPMI 1640 Medium w/o Amino Acids, Sodium Phosphate (Powder)   10L

R9010-07  RPMI 1640 Medium Modified w/o L-Glutamine, Vitamins and Glucose (Powder)   10L

R9000 RPMI 1640 Medium w/L-Glutamine w/o L-Histidine (Powder)   10L

R8998-05 RPMI 1640 Medium w/L-Glutamine, HEPES [Low Sodium] (Powder)   10L

R9011 RPMI 1640 Medium Modified w/o L-Glutamine, Glucose (Powder)   10L

R8999-13  RPMI 1640 Medium w/L-Glutamine, w/o Glucose (Powder)   10L

来源：https://www.amyjet.com/products/MBS652870.shtml

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艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯说明书来啦！

艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯名称：

中文名：肉豆蔻酸胆固醇

英文名：Cholesteryl Myristate

中文别名：豆蔻酸胆固醇酯 |肉豆蔻酸胆固醇 | 胆固醇肉豆蔻酸酯 | 胆甾醇豆蔻酸酯

编号：26439-1

规格：1g

艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯生物活性：

描述：Cholesterol myristate 是中药中天然类固醇。

相关类别：

信号通路 >> 细胞凋亡 >> 细胞凋亡

研究领域 >> 癌症

天然产物 >> 类固醇

靶点：Human Endogenous Metabolite

体外研究：由Id1启动子报道构建体转染的间充质干细胞（MSC），肉豆蔻酸胆固醇增加Id1启动子的活性。胆固醇肉豆蔻酸酯抑制无血清诱导的MSCs凋亡。胆固醇肉豆蔻酸酯增加无血清MSCs中Id1及其靶基因bcl-x / 1的表达。此外，Bog拮抗剂noggin可降低肉豆蔻酸胆固醇的抗细胞凋亡作用。胆固醇肉豆蔻酸酯抑制无血清条件下诱导的PC12细胞凋亡。胆固醇肉豆蔻酸酯显着增加BMP4，BMPRIA，p-Smad1 / 5/8，Id1及其抗凋亡靶基因Bcl-xL在无血清条件下处理的PC12细胞中的表达。

细胞实验：将MSC与或不与血清一起在96孔板中培养，并用不同浓度（0,30和300μg/ mL）的肉豆蔻酸胆固醇处理3天。在五个独立的孔中重复每个样品并孵育72小时。温育后，加入20μLMTT（5mg / mL）并将培养物再温育4小时。弃去培养基并用150μLDMSO替换。测量490nm处的吸光度。

艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯化学性质：

密度 0.95 g/cm3

沸点 630.7ºC at 760 mmHg

熔点 84 °C

分子式 C41H72O2

分子量 597.00900

闪点 334.8ºC

精确质量 596.55300

PSA 26.30000

LogP 12.64070

外观性状 白色粉末

蒸汽压 8.15E-16mmHg at 25°C

折射率 1.506

储存条件 密封、在 -20ºC下保存

稳定性 如果遵照规格使用和储存则不会分解，未有已知危险反应，避免氧化物

来源：https://www.amyjet.com/products/26439-1.shtml

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中药中天然类固醇—艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯

艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯相关参数说明：

CAS Registry No.: 1989-52-2

Formal Name: (3β)-cholest-5-en-3-ol 3-tetradecanoate

Synonyms: Cholesterol Myristate, Cholesteryl Tetradecanoate, Myristic Acid cholesteryl ester, NSC 226867

MF: C41H72O2

FW: 597.0

Purity: ≥98%

Supplied as: A crystalline solid

Storage: -20°C

Stability: ≥2 years

艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯实验室程序：

Cholesteryl myristate is supplied as a crystalline solid. A stock solution may be made by dissolving the cholesteryl myristate in the solvent of choice. Cholesteryl myristate is soluble in the organic solvent chloroform, which should be purged with an inert gas, at a concentration of approximately 10 mg/ml.

艾美捷胆固醇肉豆蔻酸酯相关描述：

Cholesteryl myristate is a cholesterol ester.1 Levels of cholesteryl myristate are increased in the serum, liver, and aorta in rabbits fed a high-cholesterol diet and positively correlate with development of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). Plasma levels of cholesteryl myristate also positively correlate with the presence of unstable atherosclerotic plaques in coronary artery disease.2 Cholesterol myristate has been used in the composition of lipid nanoparticles (LNPs) as a drug carrier systems for drugs with low water solubility.3

文献参考：

1.Kim, E.J., Kim, B.H., Seo, H.S., et al. Cholesterol-induced non-alcoholic fatty liver disease and atherosclerosis aggravated by systemic inflammation. PLoS One 5(6), e97841 (2014).

2.Meikle, P.J., Wong, G., Tsorotes, D., et al. Plasma lipidomic analysis of stable and unstable coronary artery disease. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 31(11), 2723-2732 (2011).

3.Rosenblatt, K.M. and Bunjes, H. Evaluation of the drug loading capacity of different lipid nanoparticle dispersions by passive drug loading. Eur. J. Pharm. Biopharm. 117, 49-59 (2017).

来源：https://www.amyjet.com/products/26439-1.shtml

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活性检测丨艾美捷魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒

Elevated cathepsin enzyme activity in serum or the extracellular matrix can signify a number of pathological conditions. ICT’s Magic Red assay kits are used by researchers seeking to quantitate and monitor cathepsin activity in cultured cells and tissues. This assay kit detects cathepsin-B activity. To use Magic Red, add the substrate directly to the cell culture media, incubate, and analyze. Because it is cell permeant, it easily penetrates the cell membrane and the membranes of the internal cellular organelles – no lysis or permeabilization steps are required. If cathepsin enzymes are active, the Magic Red substrate is cleaved and the cresyl violet fluorophore will become fluorescent upon excitation. As enzyme activity progresses and more Magic Red substrate is cleaved, the signal will intensify, allowing researchers to watch the color develop over time. Samples can be analyzed by fluorescence microscopy or with a fluorescence plate reader. Hoechst 33342 and Acridine Orange are included in the kit to detect nuclear morphology and lysosomal organelle structure, respectively.

血清或细胞外基质中组织蛋白酶活性升高可表示多种病理状况。艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒被研究人员用来定量和监测培养细胞和组织中的组织蛋白酶活性。

该试剂盒检测组织蛋白酶B活性。要使用魔力红，将基质直接添加到细胞培养基中，孵育并分析。因为它是细胞渗透性的，它很容易穿透细胞膜和内部细胞器的膜——不需要裂解或渗透步骤。如果组织蛋白酶是活性的，魔红底物被裂解，甲酰紫荧光团将在激发时变为荧光。随着酶活性的进展和更多魔红底物的裂解，信号将增强，使研究人员能够观察颜色随时间的变化。样品可通过荧光显微镜或荧光板读取器进行分析。试剂盒中包括Hoechst 33342和吖啶橙，分别用于检测核形态和溶酶体细胞器结构。

艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒：

试剂名称MR-RR2

靶向组织蛋白酶B

激发/发射592 nm/628 nm

荧光板读数器、荧光显微镜的分析方法

样品类型细胞培养

储存2-8°C

艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒注意事项：

准备样品和对照品

通过加入DMSO重新配制魔力红。

通过加入diH2O稀释魔力红1:10。

向每个样品中加入20µL魔红（约500µL培养细胞等分试样）。

避光培养。

观察颜色在15分钟内开始显现。

如果需要，用其他污渍标记，如Hoechst、DAPI或抗体。

如果需要，修复单元格。

用荧光显微镜或荧光板读取器进行分析。魔力红的最佳激发波长为592nm，发射波长为628nm。

如果使用贴壁细胞，请参阅手册了解其他方案。

来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-937.shtml

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艾美捷魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒研究手册

艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒包含：

套件937:25测试

魔红基质（MR-RR2），1 25测试小瓶，#6133

Hoechst 33342，1毫升，#639

吖啶橙，0.5 mL，#6130

工具包手册

套件938:100测试

魔红基质（MR-RR2），1 100测试小瓶，#6134

Hoechst 33342，1毫升，#639

吖啶橙，0.5 mL，#6130

工具包手册

艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒相关研究：

Acridine Orange Staining Solution

Magic Red® Cathepsin L Assay Kit

Antigen Coating Buffer, 5X

Magic Red® Cathepsin K Assay Kit

Block Buffer Optimization Pack

Magic Red® Caspase-3/7 Assay Kit

NIR-FLIVO 690 Tracer In vivo Assay

Annexin V-FITC Apoptosis Assay Kit

FAM-FLICA® Caspase-1 (YVAD) Assay Kit

FAM FLICA Poly Caspase Assay Kit

MitoPT JC-1 Assay

艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒部分文献参考：

Tanno, T;Zhang, P;Bailey, C;Wang, Y;Ittiprasert, W;Devenport, M;Zheng, P;Liu, Y. A novel aptamer-based small RNA delivery platform and its application to cancer therapy. Genes & Diseases. 2022 May 1; doi: 10.1016/j.gendis.2022.05.004. Full Text

Zhong, W;Rao, Z;Xu, J;Sun, Y;Hu, H;Wang, P;Xia, Y;Pan, X;Tang, W;Chen, Z;Zhou, H;Wang, X. Defective mitophagy in aged macrophages promotes mitochondrial DNA cytosolic leakage to activate STING signaling during liver sterile inflammation. Aging Cell. 2022 May 22; doi: 10.1111/jcpe.13647. Abstract

Browning, CL;Green, A;Gray, EP;Hurt, R;Kane, AB. Manganese dioxide nanosheets induce mitochondrial toxicity in fish gill epithelial cells. Nanotoxicology. 2021 Jan 27; 1-18. doi: 10.1080/17435390.2021.1874562. Article

来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-937.shtml