Bio-Helix丨Bio-Helix艾美捷Ponceaus S染色液说明书

Bio-Helix丨Bio-Helix艾美捷Ponceaus S染色液说明书

Bio-Helix艾美捷Ponceaus S染色液是一种用于评估蛋白质印迹转移效率的现成膜染色剂。该染色剂适用于硝化纤维或PVDF膜上的快速可逆蛋白质染色。Ponceau S染色是可逆的，可以在0.1%NaOH中短时间培养去除。

图： Ponceau S溶液可用于评估硝化纤维和PVDF膜上的总蛋白质量或转移效率。PVDF膜将Ponceau S染色5分钟，并用ddH2O洗涤3分钟。它提供了可见的粉色条纹。

泳道1，13：预拉伸蛋白质梯#PM019-0500

泳道2-7：2X稀释的未染色蛋白质阶梯#PMU12-0500

泳道8-12:2000、1000、500、100、50 ng BSA

Bio-Helix艾美捷Ponceaus S染色液reaction setup：

SDS-PAGE凝胶转移到硝化纤维或PVDF膜上后，将转移的膜置于染色容器中。

将膜浸入适量的Ponceau S蛋白染色溶液中，该溶液足以覆盖整个膜。在室温下轻轻搅拌染色容器5至15分钟。蛋白质带将被染色，并在5至15分钟后开始可见。

用去离子水冲洗掉膜上多余的污渍，直到蛋白带清晰。

对于进一步的膜堵塞步骤，通过将膜置于20 ml 0.1%NaOH中1至2分钟，然后在DI水中冲洗1至2小时，从膜上去除Ponceau S染色溶液。

Bio-Helix艾美捷Ponceaus S染色液相关研究：

CCH321-B100ML CCH321 超敏ECL化学发光试剂盒(皮克级) 100 ml

CCH365-B100ML CCH365  极超敏ECL化学发光试剂盒(飞克级) 100 ml

CCH385-B100ML CCH385 Atto级ECL化学发光试剂盒(阿克级) 100 ml

PS002-B500ML 考马斯亮蓝超快蛋白染色液 500 ml

Bio-Helix专注于生命科学和分析领域的生物试剂，运用用在研究、诊断、生物科学、和教育领域。包括蛋白质/DNA marker、ECL化学发光试剂、预制蛋白凝胶、核酸纯化、PCR试剂等。艾美捷科技是Bio-Helix的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Bio-Helix.shtml

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Bio-Helix丨Bio-Helix艾美捷TMB ELISA底物说明书

Bio-Helix艾美捷TMB ELISA底物，被称为3,3'，5,5'-四甲基联苯胺，是一种检测辣根过氧化物酶（HRP）活性的显色剂，当被过氧化氢氧化时，会产生蓝色，在370和652nm处具有主要吸收率。基材以即用、弱酸性溶液的形式提供。未反应的基质外观应为无色或非常浅的黄色。可以使用合适的停止溶液（硫酸或磷酸）停止反应，并产生具有450nm吸光度的可溶性黄色反应产物。

Bio-Helix艾美捷TMB ELISA底物特点：

-TMB不含DMF

-现成的解决方案

-不需要过氧化氢

-无需过滤

-非致癌物质

-更敏感

Bio-Helix艾美捷Ponceaus S染色液相关研究：

BP001CU BluPAD LED照胶台，含迷你暗房 (认证: CE/ETL, 编号: M543442) Set

PMI09-0500 IRIS9 Plus 预染蛋白ladder(9条预染条带，15-180 kDa) 500 μl

PMI11-0500 IRIS11 预染蛋白ladder(11条预染条带，3-260 kDa) 500 μl

CCH321-B100ML CCH321 超敏ECL化学发光试剂盒(皮克级) 100 ml

CCH365-B100ML CCH365  极超敏ECL化学发光试剂盒(飞克级) 100 ml

CCH385-B100ML CCH385 Atto级ECL化学发光试剂盒(阿克级) 100 ml

PS002-B500ML 考马斯亮蓝超快蛋白染色液 500 ml

Bio-Helix专注于生命科学和分析领域的生物试剂，运用用在研究、诊断、生物科学、和教育领域。包括蛋白质/DNA marker、ECL化学发光试剂、预制蛋白凝胶、核酸纯化、PCR试剂等。艾美捷科技是Bio-Helix的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

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Bio-Helix丨Bio-Helix艾美捷100bp DNA ladder说明书

Bio-Helix艾美捷100bp DNA ladder (11条条带，100-1,500pb)背景：

PCR产物和许多专有质粒的独特组合，用适当的限制性酶消化，产生11个片段，适合用作琼脂糖凝胶电泳的分子量标准。DNA包括100-1500个碱基对的片段。500和1500个碱基对带具有增加的强度以用作参考点。每个带中DNA的近似质量（0.5μg负载）用于近似类似大小的相对强度样品中的DNA质量。

来源：用适当的限制性酶消化的PCR产物和双链DNA被苯酚提取并平衡至10mM Tris-HCl（pH 8.0）和10mM EDTA。

Bio-Helix艾美捷100bp DNA ladder (11条条带，100-1,500pb)参数：

反应设置：5μl/孔（**含有橙色G和二甲-苯-氰-基FF作为跟踪染料。）

范围：100-1500 bp

频带数：11

存储：

在25°C下稳定长达6个月。

在4°C下稳定长达12个月。

在-20°C下稳定长达24个月。

仅供研究使用。

图：DNA阶梯的琼脂糖凝胶电泳。这是对不同批次的DNA梯状样本的储存测试。自2016年、2017年、2018年、2019年和2021至测试日期，具体存储在-20°C下的编号。如照片所示，最古老和最新制作的DNA梯尽管保存时间很长，但仍能正常工作。照片证明该产品的保质期符合协议要求。

Bio-Helix艾美捷100bp DNA ladder (11条条带，100-1,500pb)相关研究：

DM003-R500 100bp H3 DNA ladder (12条条带，100-3,000pb) 500 μl

DM017-R500 150bp DNA ladder (17条条带，50-1,500pb) 500 μl

DM015-R500 1Kb DNA ladder (13条条带，100-10,000pb) 500 μl

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ImmunoChemistry丨ImmunoChemistry艾美捷MitoPT JC-1测定方案

ImmunoChemistry艾美捷MitoPT JC-1测定利用荧光染料JC-1检测线粒体膜去极化。当积聚在带负电的极化线粒体中时，JC-1发出橙色荧光。当线粒体膜电位在凋亡或代谢应激的细胞中崩溃时，JC-1试剂分散在细胞中并发出绿色荧光。使用流式细胞仪、荧光平板读取器或荧光显微镜分析结果。

线粒体膜电位的丧失表明细胞凋亡。ICT的MitoPT JC-1测定利用电位荧光染料JC-1检测线粒体膜通透性和膜去极化。JC-1染料具有分散在整个分子结构中的离域正电荷。此外，其亲脂性溶解性使其易于渗透膜并穿透活细胞。JC-1染料进入带负电荷的线粒体，在那里聚集并在激发时发出橙色荧光。当凋亡细胞中线粒体膜电位崩溃时，MitoPT JC-1分布在整个细胞溶胶中。使用流式细胞仪、荧光平板读取器或荧光显微镜分析结果。

ImmunoChemistry艾美捷MitoPT JC-1检测试剂盒化学性质：

试剂名称JC-1

靶向线粒体去极化

激发/发射488 nm/590 nm和527 nm

分析方法流式细胞术、荧光显微镜、荧光板读取器

样品类型细胞培养

储存-20°C

试剂盒组分：

Kit 911: 400 Tests

MitoPT JC-1 Reagent, 100 Tests, #6260

10X Assay Buffer, 125 mL, #6259

CCCP, 50 mM, 600 µL, #6258

Kit Manual

Kit 924: 100 Tests

MitoPT JC-1 Reagent, 100 Tests, #6261

10X Assay Buffer, 60 mL, #685

CCCP, 50 mM, 125 µL, #6257

Kit Manual

ImmunoChemistry艾美捷MitoPT JC-1检测试剂盒相关文献：

Funakoshi, A;Honda, T;Ito, T;Tokura, Y. Cholecystokinin receptor antagonist suppresses melanoma growth by inducing apoptosis of tumor cells. JID Innovations. 2022 September 1; doi: 10.1016/j.xjidi.2022.100153. Abstract

Yoshioka, H;Komura, S;Kuramitsu, N;Goto, A;Hasegawa, T;Amizuka, N;Ishimoto, T;Ozasa, R;Nakano, T;Imai, Y;Akiyama, H. Deletion of Tfam in Prx1-Cre expressing limb mesenchyme results in spontaneous bone fractures. Journal of bone and mineral metabolism. 2022 August 10; doi: 10.1007/s00774-022-01354-2. Publication

Zhong, G;Long, H;Zhou, T;Liu, Y;Zhao, J;Han, J;Yang, X;Yu, Y;Chen, F;Shi, S. Blood-brain barrier Permeable nanoparticles for Alzheimer's disease treatment by selective mitophagy of microglia. Biomaterials. 2022 August 8; doi: 10.1016/j.biomaterials.2022.121690. Full Text

ImmunoChemistry Technologies简称"ICT",提供各种细胞蛋白酶、细胞凋亡与细胞毒性检测试剂盒等研究工具，同时包含高质量高灵敏度的 ELISA开发试剂。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Immunochemistry.shtml

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ImmunoChemistry艾美捷Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒方案

膜联蛋白V是具有血管抗凝血活性的钙和磷脂结合蛋白家族的成员。体外实验结果表明，它可能通过与凝血酶原竞争磷脂酰丝氨酸（PS）结合位点而在抑制凝血中发挥作用。在健康细胞中，PS通常保存在细胞膜的内小叶（胞质侧）。当细胞发生凋亡时，最早的可检测指标之一是膜不对称性的丧失。PS不再局限于膜的胞质部分，而是转移到外小叶，并暴露在细胞表面。

通过ImmunoChemistry艾美捷Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒，免疫化学技术提供了一种经验证的方法，可以使用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）试剂快速、轻松地区分两种死亡细胞和活细胞。细胞凋亡早期，细胞膜完整，PS表面暴露，Annexin V-FITC染色呈阳性。PI包含在凋亡检测试剂盒中，用于识别晚期凋亡和坏死细胞，这些细胞已失去质膜完整性。这些细胞将被膜联蛋白V-FITC和碘化丙啶双重标记（绿色和红色荧光）。假设没有治疗或细胞周期相关事件暂时暴露正常内化的带负电荷的PS实体，则具有完整质膜的活细胞将排除PI并保持不被膜联蛋白V-FITC探针染色。该试剂盒还包括一种特殊配制的钙基结合缓冲液，这是发生膜联蛋白V结合所必需的。

ImmunoChemistry艾美捷Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒化学性质：

靶细胞凋亡，暴露的磷脂酰丝氨酸

激发/发射488nm/530 nm

分析方法流式细胞术

样品类型细胞培养

储存2-8°C

ImmunoChemistry艾美捷Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒组分：

Annexin V-FITC, 200X, 50 µL, 1 vial, #6340

10X Binding Buffer, 1.7 mL, 3 vials, #6341

Propidium Iodide, 250 µg/mL, 1 mL, 1 vial, #638

Kit Manual

协议：

准备样品和对照品

用diH2O稀释10X结合缓冲液1:10。

在冰冷的培养基或PBS中洗涤细胞，并重新悬浮在冰冷的1X结合缓冲液中。

在PBS中稀释膜联蛋白V-FITC 1:10。

在PBS中稀释碘化丙啶（PI）1:2。

将稀释的Annexin V-FITC以1:20的比例添加到每个样品中（每100µL培养细胞等分试样5µL）。

将稀释的PI以1:20的比例添加到每个样品中（每100µL培养细胞等分试样5µL）。

培养约10分钟，避光。

通过向每个样品中添加250µL 1X结合缓冲液来稀释样品。

用流式细胞仪分析。膜联蛋白V-FITC在494nm处最佳激发，在519nm处发射（通常在FL1中读取）。PI在536nm处最佳激发并且在617nm处具有峰值发射（通常在FL3中读取）。

ImmunoChemistry Technologies简称"ICT",提供各种细胞蛋白酶、细胞凋亡与细胞毒性检测试剂盒等研究工具，同时包含高质量高灵敏度的 ELISA开发试剂。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

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ImmunoChemistry艾美捷Annexin DNA损伤ELISA试剂盒方案

使用ImmunoChemistry艾美捷DNA损伤（8-OHdG）ELISA试剂盒定量尿液、细胞培养物、血浆和其他样品基质中的8-OHdG。该试剂盒提供了快速的培养时间、稳定的试剂和用户友好的方案。使用吸光度板读取器分析结果。

8-羟基-2-脱氧鸟苷（8-OHdG）由活性氧和氮物种对DNA的氧化损伤产生，并作为氧化应激的既定标志物。鸟苷的羟基化反应于正常代谢过程和各种环境因素（即任何增加活性氧和氮物种的物质）。8-OHdG水平的增加与衰老过程以及包括癌症、糖尿病和高血压在内的多种病理状况有关。使用ImmunoChemistry DNA损伤ELISA试剂盒定量尿液、细胞培养物、血浆和其他样品基质中的8-OHdG。ImmunoChemistry该试剂盒提供了快速的培养时间、稳定的试剂和用户友好的方案。ELISA使用8-羟基-2-脱氧鸟苷涂层板和HRP缀合的8-OHdG特异性检测抗体。这产生了有效范围为0.94–60 ng/mL，灵敏度为0.59 ng/mL的分析。使用吸光度板读取器分析结果。

ImmunoChemistry艾美捷DNA损伤ELISA试剂盒化学性质：

靶向8-羟基-2-脱氧鸟苷（8-OHdG）

分析吸收板读数器的方法

样本类型培养基、尿液、血浆/血清、细胞裂解物、组织样本、唾液

-20°C下储存8-OHdG，2-8°C下存储其他组件

ImmunoChemistry艾美捷DNA损伤ELISA试剂盒组分：

8-OHdG: BSA Coated 96-Well Plate, #270

2 Plate Covers, #271

8-OHdG, 100 µL at 3.06 µg/mL, #6646

8-OHdG HRP Conjugated Monoclonal Antibody, 75 µL, #6647

Sample and Standard Diluent, 50 mL, #6648

8-OhdG Antibody Diluent, 13 mL, #6649

10X Wash Buffer Concentrate, 50 mL, #6650

TMB Substrate, 13 mL, #6651

Stop Solution, 13 mL, #6652

Kit Manual

ImmunoChemistry Technologies简称"ICT",提供各种细胞蛋白酶、细胞凋亡与细胞毒性检测试剂盒等研究工具，同时包含高质量高灵敏度的 ELISA开发试剂。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。

来源：https://www.amyjet.com/brand/Immunochemistry.shtml

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艾美捷Cas9核酸酶应用说明及实例展示

Product Description:Recombinant Streptococcus pyogenes Cas9 (wt) protein expressed in an E. coli .

Form:Liquid

Preparation Method:E. coli expression system

Purity:≥ 95% by SDS-PAGE

Activity:20 nM CRISPR/Cas9-C-NLS nuclease incubated for 1 hour at 37℃ result in 90% digestion of the substrate DNA as determined by agarose gel electrophoresis.

Recommend Usage:CRISPR Genome editing

The optimal working dilution should be determined by the end user.

Storage Buffer:In 10 mM Tris, 300 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50% Glycerol PH 7.4

Storage Instruction:Store at -20°C.

Aliquot to avoid repeated freezing and thawing.

艾美捷Cas9核酸酶参数说明：

描述：在大肠杆菌中表达的重组化脓性链球菌Cas9（wt）蛋白。

形式：液体

制备方法：E。大肠杆菌表达系统

纯度：≥ SDS-PAGE显示95%

活性：20 nM CRISPR/Cas9-C-NLS核酸酶在37℃下孵育1小时，通过琼脂糖凝胶电泳测定，底物DNA的消化率为90%。

推荐用途：CRISPR基因组编辑

最佳工作稀释度应由最终用户确定。

储存缓冲液：在10mM Tris、300mM NaCl、0.1mM EDTA、1mM DTT、50%甘油PH 7.4中

储存说明：在-20°C下储存。

等分以避免反复冷冻和解冻。

艾美捷Cas9核酸酶的应用：

1.基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除；

2.基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入；

3.sgRNA剪切靶点DNA效率检测，降低体内筛选成本；

4.体外剪切靶DNA的特异位点。

艾美捷Cas9核酸酶应用实例：

Cas9蛋白做DNA片段切割活性检测。

带有靶位点的DNA片段为6100bp；

酶切后的片段为3900bp和2200bp。

来源：https://www.amyjet.com/products/P7051.shtml

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艾美捷nickases内切酶用途和应用实例分析

nickases内切酶背景：

CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统，改造后的 II 型 CRISPR/Cas9 系统在基因的定点修饰中展现出巨大的应用潜能。脱靶效应是目前 CRISPR/Cas9 技术应用的一个难题，在基因编辑应用中，可能会出现难以预测的后果。

Cas9 Nuclease 具有两个切割活性中心，从而实现在 sgRNA 靶序列特定位点引入 DNA 双链断裂（DSB）。NLS-Cas9（D10A）Nickase 在 Cas9 Nuclease 基础上突变其中一个切割活性中心，其能在与 sgRNA 靶序列互补的DNA 链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，并且通过在蛋白两端加了核定位序列(NLS),可把蛋白送到细胞核内进行基因组编辑， 配合一对 gRNA 使用，可实现 Cas9 Nuclease 相同的基因编辑效果，由于有效的识别序列由 20 bp 增加至 40 bp，可明显减少意外的脱靶基因修饰，从而显著提高 CRISPR/Cas9 技术基因修饰的特异性。

艾美捷nickases内切酶特点：

纯蛋白体系，避免 CRISPR 基因敲除时引入质粒或病毒干扰； 可显著降低脱靶效应。

艾美捷nickases内切酶用途：

1，基于蛋白与 sgRNA 转染的非病毒载体 CRISPR 基因敲除；

2，基于蛋白与 sgRNA 转染的非病毒载体 CRISPR 基因敲入；

3，sgRNA 剪切靶点 DNA 效率检测，降低体内筛选成本；

4，体外剪切靶 DNA 的特异位点。

艾美捷nickases内切酶应用实例：

带有靶位点的超螺旋 DNA（cccDNA）；

酶切产生切刻后的开环 DNA（ocDNA）；

50 -100 ng 酶可有效切割 cccDNA（>95%）。

来源：https://www.amyjet.com/products/P7057.shtml

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艾美捷nickases内切酶活性检测及相关研究

艾美捷nickases内切酶组分：

NLS-Cas9(D10A) Nickase(0.1 μg/μl) 500 μL

10×Reaction Buffer 1 ml

艾美捷nickases内切酶切割活性检测：

NLS-Cas9(D10A) Nickase(0.1 μg/μl) 500 μL

10×Reaction Buffer 1 ml

经多次柱纯化，SDS-PAGE 胶检测仅可见清晰单一的目的条带，纯度达 95%；内毒素含量< 0.1EU/μg；qPCR 方法检测无大肠杆菌基因组残留；无 RNase、核酸内、外切酶污染。

体外切割体系（20μL）：

Supercoiled DNA 200 ng

sgRNA 200 ng

NLS-Cas9(D10A) Nickase 50-100 ng

10×Reaction Buffer 2 μl

RNase Free Water To 20 μl

37 ℃保温 1 h、70℃保温 10 min

注：在反应体系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl，防止RNase 污染。

艾美捷nickases内切酶相关研究：

NLS-Cas9核酸酶

Cas9（D10A）镍基

Cas9（H840A）镍基

Cas9（D10A，H840A）核酸酶

sgRNA体外一步转录试剂盒

sgRNA筛选和基因型确认试剂盒

来源：https://www.amyjet.com/products/P7057.shtml

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艾美捷A型CpG DNA, 人/小鼠应用和化学性质说明

CpG-A ODN的特征在于在5'和3'端具有磷酸（PS）键的多-G基序（促进细胞摄取）和ODN中心含有PO回文CpG的序列。CpG-A ODN在PDC中诱导大量IFN-α（与CpG-B不同），导致NK细胞和γ-δT细胞中的强激活和IFN-γ产生，但不能激活B细胞。暴露于CpG-A引发的细胞因子环境的人单核细胞可以分化为树突状细胞。CpG-a的原型序列是20-mer ODN 2216，其模拟PDC的病毒感染，并能够调节人和小鼠的免疫应答。其序列如下：5'-gggGGGACGATCGTCgggggG-3'。小写字母表示PS连接，大写字母表示碱基的PO连接3'，粗体字母表示CpG二核苷酸。

艾美捷A型CpG DNA, 人/小鼠：

应用说明：CpG-A DNA可用于体外生物测定以激活细胞。此外，CpG-A DNA可以用作免疫调节剂。

用途：对于体外刺激，可使用0.05至3μM。建议用户测试试剂并确定自己的最佳浓度。

艾美捷A型CpG DNA, 人/小鼠化学性质：

类型：LPS和配体

规格：200 nmol

制剂约200 nmol冻干、纯化的20-mer CpG ODN。确切数量在标签上标明。内毒素水平无法检测。通过吸取蒸馏水或去离子水（体积取决于使用的浓度）重新配制小瓶。

使用对于体外刺激，可使用0.05至3μM。建议用户测试试剂并确定自己的最佳浓度。

储存和稳定性：冻干产品应在4°C下储存。将储备溶液储存在-20°C的等分试样中。反复的冷冻和解冻循环将导致活性丧失。

艾美捷A型CpG DNA, 人/小鼠化参考文献：

1.Krieg，A；细菌DNA中的CpG基序及其免疫效应。《免疫学年鉴》2002，20:709

2.Krug，A等人；CpG-A寡核苷酸诱导单核细胞衍生的树突状细胞样表型，其优先激活CD8T细胞。免疫学杂志2003，170:3468

3.Huijbregts，R等人；激素避孕与HIV-1感染：醋酸甲羟孕酮抑制先天性和适应性免疫机制。内分泌学2012，154:1282

4.Chen，J等人；CpG寡脱氧核苷酸诱导骨髓前体细胞成为髓系衍生抑制细胞。Mol Med Rep 2013，8:1149

5.Li，H等人；干扰素诱导的机械感受缺陷阻碍狼疮细胞凋亡的清除。临床杂志2015，125:2877

6.Michel，K等人；激素避孕对女性生殖道浆细胞样树突状细胞功能和免疫细胞群分布的影响。J Acquire Immune Defic Syndr 2015，68:511

仅供研究使用。不用于人类或动物或诊断。

来源：https://www.amyjet.com/products/HC4037.shtml