中性生物碱喜树碱丨艾美捷喜树碱(Camptothecin)方案
- 武汉艾美捷科技有限公司2022年12月30日 13:44 点击:501
中性生物碱喜树碱丨艾美捷喜树碱(Camptothecin)方案
喜树碱(Camptothecin,CPT)为吡咯喹啉细胞毒性生物碱,是除紫杉醇之外研究最多的天然抗肿瘤药物之一,存在于在我国特有的珙桐科植物喜树的果实或根中。《浙江民间常用草药》中记载,喜树的根皮具有清热解毒,散结消肿之功效,果实具有活血化瘀之功效,常用来煎汤内服或者是研末吞服,治疗牛皮癣、疮肿等症状。
1966年,美国国家癌症研究所的Monreoe E. Wall 和Mansukh C. Wani 从原产于中国中部的喜树树皮和树干中分离得到一种五环单萜生物碱,这是对喜树碱的最早研究。
1967年到1970年,研究者发现该五环单萜生物碱在体外对Hela细胞(宫颈癌细胞的细胞系)、L1210细胞(小鼠淋巴细胞白血病细胞)及啮齿类动物显示出较强的抗肿瘤活性,同时还表明对胃癌、直肠癌和白血病等多种恶性肿瘤均有一定的疗效,这引发了科学界对植物喜树和喜树碱类化合物的研究热潮,陆陆续续发现了更多的喜树碱类化合物。但因多种原因,喜树碱药物的临床应用却未取得有效推进。
1985年,Hsiang和其同事发现喜树碱及其衍生物是以拓扑异构酶I(Topoisomerase I,Topo I)为靶点,通过TopoI-DNA可裂解复合物可逆结合,形成的CPT-Topo I-DNA三元复合物可抑制DNA的复制和转录,进而导致癌细胞的死亡。相比TopoII抑制剂,Topo I抑制剂疗效高,抗瘤谱广,喜树碱对拓扑异构酶I有专一抑制性,引发了新一轮的关注。
经过多年的技术积累和发展,药物递送被广泛应用于抗肿瘤领域,提高药物有效性,降低药物毒性,改善药物安全性。已有多种技术应用于喜树碱药物的开发,例如脂质体、抗体偶联药物、树枝状大分子、胶束等技术。
喜树碱为不溶于酸不溶于水的中性生物碱,也很难溶于一般的有机溶剂。对光和热敏感,光照会影响喜树碱的吸光度,避光则保持稳定,而加热则会使喜树碱分解。室温下经稀碱处理,容易开环成水溶性羧酸盐,酸化则又重新内酯化成环。
喜树碱物化性质:
中文名:喜树碱
外文名:Camptothecin
别 名:(+)-喜树碱
化学式:C20H16N2O4
分子量:348.34
CAS登录号:7689-03-4
EINECS登录号:444-280-6
熔 点:260 °C (dec.)(lit.)
沸 点:757.0±60.0 °C at 760 mmHg
水溶性:极难溶于水
外 观:浅黄色针状结晶
闪 点:411.6±32.9 °C
应 用:抗癌药
艾美捷喜树碱是一种具有抗肿瘤特性的细胞毒性植物生物碱,是一种原型DNA拓扑异构酶I抑制剂。在凋亡检测实验中使用喜树碱创建阳性对照。
艾美捷喜树碱(Camptothecin)基本操作:
1、将喜树碱粉末溶解在组织培养级DMSO中,以获得2mg/mL喜树碱储备浓度。
2、制备50–100µL的DMSO增溶喜树碱等分试样,并将其冷冻保存在<-20°C。一瓶冷冻的喜树碱可在丢弃前再解冻2次。应标记已解冻1X的小瓶,以表明这一点,以便它们在丢弃前只经过一次解冻。
3、喜树碱浓度范围为2–4µg/mL的刺突细胞培养物,产生6–12µM的细胞培养物喜树碱浓度。该喜树碱浓度范围适用于诱导Jurkat或HL 60细胞悬浮液,其浓度范围通常为1 x 105–1 x 106细胞/mL。在此浓度范围内,培养4小时(37°C)后成功诱导凋亡。
4、对特定细胞系进行时间历程研究,以确定合适的喜树碱浓度和暴露时间,从而为实验实现良好的凋亡诱导水平。
喜树碱(Camptothecin)学术论文参考:
王洋,戴绍军,阎秀峰. 光强对喜树幼苗叶片次生代谢产物喜树碱的影响. 《 CNKI;WanFang 》 , 2004
阎秀峰,王洋,于涛,张玉红等. 喜树叶中喜树碱含量的高效液相色谱分析. 《 CNKI 》 , 2002
杨时成,朱家壁,梁秉文等. 喜树碱固体脂质纳米粒的研究. 《 药学学报 》 , 1999
刘键. 羟基喜树碱类药物作用机制及在合并治疗中机理的研究. 《 中国肿瘤临床 》 , 1998
张志荣,路伟. 肝靶向羟基喜树碱缓释毫微粒的研究. 《 CNKI 》 , 1997
来源:https://www.amyjet.com/products/ICT-6208.shtml
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有关星形孢菌素(Staurosporine) 的相关性质和答疑丨艾美捷解惑
星形孢菌素(Staurosporine) 是一种强效的、ATP竞争性激酶抑制剂,有效抑制PKC活性,在大鼠脑组织实验中,IC50为2.7 nM。星形孢菌素强效抑制PKC-α,其抑制活性比PKC-δ高100倍,比PKC-δ和PKC-ζ高1000倍。除此之外,星形孢菌素还抑制PKA,PKG,p60v-src酪氨酸蛋白激酶和钙调蛋白激酶II等。
星形孢菌素(Staurosporine) 抑制多种人癌细胞增殖,主要作用表现为诱导癌细胞G2/M期阻断,调整G1期阻断,并诱导细胞凋亡。另外,星形孢菌素具有多种生物学作用,如细胞毒性、松弛平滑肌和调节eNOS基因表达等。
艾美捷星形孢菌素(Staurosporine)是从stauro孢子链霉菌中分离出来的一种蛋白激酶抑制剂。Staurosporine在1µM的2 ~ 3 h内诱导DNA破裂和凋亡。
艾美捷星形孢菌素(Staurosporine)化学性质:
中文别名:抗生素AM-2282
英文别名:Antibiotic AM-2282, Stsp
化学名:
2,3,10,11,12,13-hexahydro-10R-methoxy-9S-methyl-11R-methylamino-9S,13R-epoxy-1H,9H-diindolo[1,2,3-gh;3’,2’,1’-lm]pyrrolo[3,4-j][1,7]benzodiazonin-1-one
靶点:PKC
CAS 号:62996-74-1
分子式:C28H26N4O3
分子量:466.53
外观:白色/浅黄色固体
纯度:≥98%
溶解性:溶于DMSO
结构式:
艾美捷星形孢菌素(Staurosporine) 生物活性:
星形孢菌素的主要生物活性是通过预防ATP与激酶的结合来抑制蛋白激酶。这是通过星形孢菌素对激酶上的ATP结合位点的更强亲和力来实现的。 Staurosporine是一种典型的ATP竞争性激酶抑制剂,因为它以高亲和力结合许多激酶,但选择性很小。激酶袋的结构分析表明,在与星形孢菌素相对位置保守的主链原子有助于星形孢菌素的杂乱。这种缺乏特异性已经排除了其临床应用,但使其成为一种有价值的研究工具。在研究中,星形孢菌素用于诱导细胞凋亡。它如何调解这种机制尚不清楚。已经发现,星形孢菌素诱导细胞凋亡的一种方法是通过激活胱天蛋白酶-3 。在较低浓度下,根据细胞类型,星形孢菌素诱导特定的细胞周期效应,阻止细胞在细胞周期的G1期或G2期。
星形孢菌素(Staurosporine) 有关答疑:
问:使用星形孢菌素(Staurosporine) 作为阳性对照来诱导细胞凋亡时,由于使用的细胞不是培养中的细胞系,它们实际上是从小鼠肺部排出的。那么应该如何使用Staurosporine来诱导细胞凋亡?有什么方法和建议可以帮助吗?
答:星形孢菌素(Staurosporine) 是一种有效的蛋白激酶抑制剂,在诱导多种细胞系和类型的细胞凋亡方面非常有效。你不是在研究一种特定的细胞系,而是在将细胞从小鼠肺中冲洗出来后进行培养。建议建立一个实验,评估一系列十字孢菌素浓度和暴露时间。作为一个起点,我们通常使用1µM浓度4小时来诱导90%以上的Jurkat细胞凋亡。我们发现,一些细胞系,如U-937细胞,可能需要长达6小时才能获得类似的结果。因此,最好用你的细胞建立一个滴定实验,并通过实验得出合适的星孢菌素浓度和暴露时间。
来源:https://www.amyjet.com/products/ICT-6212.shtml
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大鼠高灵敏C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒研究方案
C反应蛋白(CRP)是在血浆中发现的一种环状(环状)五聚体蛋白,其循环浓度随炎症反应而升高。它是肝起源的急性期蛋白,在巨噬细胞和T细胞分泌白介素6后增加。它的生理作用是与死细胞或垂死细胞(和某些类型的细菌)表面表达的溶血磷脂酰胆碱结合,以通过C1q激活补体系统。
肝脏响应巨噬细胞和脂肪细胞(脂肪细胞)释放的因子而合成CRP。它是pentraxin蛋白质家族的成员。它与C肽(胰岛素)或C蛋白(凝血)无关。C反应蛋白是xxx个被识别的模式识别受体(PRR)。
C反应蛋白的功能:
C反应蛋白与死细胞或垂死细胞和某些细菌表面表达的磷酸胆碱结合。这会激活补体系统,促进巨噬细胞的吞噬作用,从而清除坏死和凋亡的细胞和细菌。
这种所谓的急性期反应是由于巨噬细胞和脂肪细胞产生的IL-6浓度升高而引起的,该浓度是对各种急性和慢性炎症条件(例如细菌、病毒或真菌感染;风湿病和其他炎性疾病;恶性以及组织损伤和坏死。这些情况导致白介素6和其他细胞因子的释放,触发肝脏合成CRP和纤维蛋白原。
C反应蛋白与微生物上的磷酸胆碱结合。人们认为它有助于补体与外源和受损细胞的结合,并增强巨噬细胞的吞噬作用(调理素介导的吞噬作用),巨噬细胞表达CRP受体。它在先天免疫中起着抵抗感染的早期防御系统的作用。
艾美捷C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒是一种高度灵敏的双位点酶联免疫分析(ELISA),用于定量测定各种属生物样品中的CRP。仅供研究使用。
以大鼠高度敏感CRP酶联免疫吸附试验为例:
预期用途:
大鼠高灵敏C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒是一种高灵敏的双位点酶联免疫测定(ELISA),用于定量测定大鼠生物样品中的C-反应蛋白(CRP)。仅供研究使用。
艾美捷大鼠高灵敏C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒原则:
双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该测定中样品与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗体反应。之后通过洗涤去除未结合的蛋白质,结合辣根过氧化物酶(HRP)的抗-CRP抗体是补充。该HRP缀合的抗体与先前结合的CRP形成复合物。在另一洗涤步骤之后,通过添加显色底物3,3',5,5'来测定与免疫吸附结合的酶-TMB。结合酶的数量与样品中CRP的浓度成正比测试;因此,在450nm处的吸光度是测试样品中CRP浓度的量度。数量测试样品中的CRP可以从由校准品构建的校准曲线中插值,并根据样品稀释。
大鼠高灵敏C-反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒组分:
1.一瓶含有50mL 5X浓缩稀释液流动缓冲液。
2.一瓶含有50mL 20X浓缩洗涤液。
3.一个小瓶含有150µL的100X浓缩亲和纯化抗大鼠CRP抗体,该抗体与HRP结合
稳定缓冲液。
4.一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液(pH 3.3)。
5.一瓶含12 mL 0.3 M硫酸。(避免接触皮肤)
6.12个可拆卸的八孔微条,位于孔支架框架内。孔用亲和纯化的抗大鼠CRP包被。
7.一个装有冻干大鼠CRP校准品的小瓶。
8.一小瓶含有50µL血清和0.1%叠丨氮丨化钠。
来源:https://www.amyjet.com/featured/CRP-ELISA.shtml
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艾美捷Advanced Targeting Systems丨ZAP二级标记物
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio ZAP缀合物是非靶向saporin缀合物,可“携带”到主要靶向剂(生物素化材料或抗体)上。这些试剂盒将生物素化物质转化为靶向毒素,并允许评估试剂与受体结合后内化的能力。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio ZAP二级标记物相关研究:
链霉亲和素ZAP(Cat.#IT-27)将生物素化物质转化为靶向毒素。
FITC Streptavidin ZAP(Cat.#IT-85)消除被FITC标记的生物素化靶向剂识别的细胞
MonoBiotin ZAP(Cat.#BT-ZAP)消除链霉亲和素化靶向剂识别的细胞
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio ZAP抗体内化试剂盒(体外使用):
抗体Z试剂盒包含与皂素(ZAP)偶联的二级抗体、对照偶联物,以及筛选一级抗体进行内化所需的所有成分。
目标 推荐
alpaca/llama IgG
(VHH domain) Alpaca-ZAP
(IT-87, KIT-87)
chicken IgY Chick-ZAP
(IT-62, KIT-62)
goat IgG Goat-ZAP
(IT-36, KIT-36)
guinea pig IgG gPIG-ZAP
(IT-64, KIT-64)
human IgG Hum-ZAP
(IT-22, KIT-22) Fab-ZAP human
(IT-51, KIT-51) FabFc-ZAP human
(IT-65, KIT-65)
human IgM Hug-M-ZAP
(IT-43, KIT-43) FabFc-ZAP Hug-M
(IT-78, KIT-78)
mouse IgG Mab-ZAP
(IT-04, KIT-04) Fab-ZAP mouse
(IT-48, KIT-48) FabFc-ZAP mouse
(IT-89, KIT-89)
mouse IgM Anti-M-ZAP
(IT-30, KIT-30)
rabbit IgG Rab-ZAP
(IT-05, KIT-05) Fab-ZAP rabbit
(IT-57, KIT-57)
rat IgG Rat-ZAP
(IT-26, KIT-26) Fab-ZAP rat
(IT-55, KIT-55) FabFc-ZAP rat
(IT-88, KIT-88)
Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究领域包含神经靶向毒素,神经生物学研究方面的抗体/蛋白,靶向剂内化水平检测工具等。艾美捷科技是ATSbio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Advanced-Targeting-Systems.shtml
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艾美捷Advanced Targeting Systems Anti-V5-SAP标签靶向毒素
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio Anti-V5-SAP标签靶向毒素背景:
标签靶向毒素是一种强大而特异的损伤剂,用于分子技术外科手术核糖体失活蛋白saporin(来自植物皂荚)是该靶向剂识别表达细胞外V5标记的蛋白质的YOUR细胞。一旦缀合物被内化,saporin脱离靶向剂,并使核糖体失活这导致蛋白质抑制,最终导致细胞死亡。没有细胞表面标记的细胞影响V5标签来源于猴副粘病毒P和V蛋白上的一个小表位(Pk)病毒5(SV5)。其特征在于通常由14个氨基酸的短肽序列组成的表位标签酸(GKPIPNPLGLDLDST),并选择用于可能产生的高亲和力抗体V5标签通常被用作检测和纯化含有该标签的蛋白质的可靠方法。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio Anti-V5-SAP标签靶向毒素特异性和制备:
这种标记靶向毒素识别V5表位标记的细胞,以评估您感兴趣目标的表达。抗-V5-SAP是小鼠单克隆抗体与V5标签融合蛋白的化学缀合物核糖体失活蛋白,saporin。代表氨基酸残基95-108的合成肽将与KLH结合的猴病毒5的RNA聚合酶α亚基(GKPIPNPLGLDLDST)用作
产生抗体的免疫原。使用肽通过亲和层析分离抗体固定在固体载体上。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio Anti-V5-SAP标签靶向毒素使用和储存:
抗-V5-SAP特异性地消除了细胞外表达V5标记蛋白的细胞识别您的V5标记的重组蛋白。材料可能有很多不同;工作稀释度必须由最终用户确定。如果这是一个新的批次,您必须评估正确的工作在开始完整的实验方案之前进行稀释。使用前轻轻旋转材料;5-10秒的缩微胶片就足够了。将材料储存在未稀释的等分试样在-20°C下保存1-2个月。为了长期储存,将材料储存在–80°C。布料应等分至方便的体积和数量,以避免重复冷冻和解冻损害蛋白质含量。在这些条件下,该材料具有非常稳定的保质期。解冻应该是在室温或冰上进行。解冻的溶液在使用前应保持在冰上。
Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究领域包含神经靶向毒素,神经生物学研究方面的抗体/蛋白,靶向剂内化水平检测工具等。艾美捷科技是ATSbio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Advanced-Targeting-Systems.shtml
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Advanced Targeting Systems 艾美捷Fab pHast小鼠说明
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio Fab pHast小鼠用于定量检测一级抗体的特异性、结合和内化,1天内即可获得结果。Fab pHast小鼠通过与pH依赖性荧光报告子交联的二级抗体与您的主要小鼠抗体结合。这种荧光报告物会随着其周围环境的pH值变得更酸性而增加强度,这在暴露于细胞内的环境时很明显。成功的检测将通过荧光检测板读数器提供EC50,照亮您的潜在抗体。
艾美捷Advanced Targeting Systems /ATSbio Fab pHast小鼠可在1天内对小鼠主要抗体的特异性、结合性和内在化进行定量测试。该二级缀合物用于评估一级抗体内化的潜力。制作1.5毫升“Fab pHast加标溶液”将使用约43微克Fab pHast。这是假设500 nM的加标溶液,并在96孔板上进行测定,这是方案中的建议量。这足以在8种不同浓度的抗体下测试六份(6个数据点)的1种抗体。
图2:Fab pHast小鼠与192-IgG:HEK-293细胞,用p75神经营养素转染在96孔板中以20000个细胞/孔接种受体并允许其粘附过夜。10 nM的192 IgG抗体(Cat.#AB-N43)在室温下孵育图1:Fab pHast小鼠的pH响应:荧光(RFU)为显示为Fab pHast小鼠(Cat.pH-02). 酸性越强荧光,而碱性pH几乎没有荧光。将1µl或0.9µg添加到99µl 50mM中底部读数为96的不同pH值的磷酸钾-井板。在平板混合器上轻轻混合平板5分钟,并在Spectra Max上读取双子座EM(Ex:532nm/EM:560nm)。
温度与30nM Fab pHast小鼠(Cat.#PH-02)持续20分钟。Fab pHast结合抗体为然后加入细胞中,在平板上轻轻混合2分钟搅拌机。将细胞孵育过夜内部化,尽管可以检测到内部化几小时内。用PBS代替培养基更高的灵敏度,然后对细胞进行分析使用Y3放大20倍的荧光显微镜徕卡滤镜立方体。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio Fab pHast小鼠特异性和制备:
该二级缀合物识别小鼠抗体。Fab pHast是山羊抗鼠单价抗体和pH依赖性荧光报告物的化学偶联物。用于制造Fab pHast的抗体小鼠是针对小鼠IgG重链和轻链的亲和纯化的多克隆抗体。这个本品中使用的抗体将在免疫球蛋白类及其亚类之间发生交叉反应因为它们共享相同的轻链(kappa或lambda)。pHast荧光染料具有激发波长532nm,发射最大值为560nm。
使用和储存:
Fab pHast小鼠产生对您的初级细胞的特异性、结合性和内在化的定量测试小鼠抗体,结果在1天内。该次级共轭物用于评估初级抗体内化。材料可能有很多不同;工作稀释度必须由最终用户确定。如果是一个新的批次,您必须在开始完整的实验方案之前评估适当的工作稀释度。使用前轻轻旋转材料;5-10秒的缩微胶片就足够了。材料应为储存于2-6°C,避光。您可以添加稳定剂,如BSA(1-10 mg/ml)或甘油稳定性和/或防腐剂如叠氮化钠(2mM)。在这些条件下,材料具有稳定的保质期。
Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究领域包含神经靶向毒素,神经生物学研究方面的抗体/蛋白,靶向剂内化水平检测工具等。艾美捷科技是ATSbio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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艾美捷Advanced Targeting Systems Anti-V5-SAP标签靶向毒素
Streptavidin pHast是我们定量检测生物素化蛋白特异性、结合和内化的最快工具之一,可在1天内提供结果。Streptavidin pHast与生物素化蛋白结合,并含有pH依赖性荧光报告物(pHast)。这种荧光报告物会随着其周围环境的pH值变得更酸性而增加强度,这在暴露于细胞内的环境时很明显。
艾美捷Advanced Targeting Systems /ATSbio Streptavidin pHast能识别生物素化蛋白。链亲和素pHast是链亲和素和pH依赖性荧光报告物的缀合物。约17微克的链霉亲和素pHast足以在96孔板中以100nM的起始浓度测试1种生物素化蛋白(6次重复,8种不同浓度)。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio Streptavidin pHast特异性和制备:
此二级缀合物识别您的生物素化蛋白。Streptavidin pHast是链霉亲和素和pH依赖性荧光报告物。pHast荧光染料的激发波长为532nm,发射最大值为560nm。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio Streptavidin pHast使用和储存:
Streptavidin pHast通过测试特异性结合和内在化,在1天内产生结果生物素化蛋白。该二级缀合物用于评估生物素化蛋白对内化。材料可能有很多不同;工作稀释度必须由最终用户确定。如果是一个新的批次,您必须在开始完整的实验方案之前评估适当的工作稀释度。使用前轻轻旋转材料;5-10秒的缩微胶片就足够了。材料应为储存于2-6°C,避光。请勿使用还原剂(如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇或抗坏血酸)布料它会使缀合物失活。
图:荧光(RFU)显示为pH的函数,链霉亲和素pHast在50mM中稀释1:100不同pH值的磷酸钾。这个更酸性的pH显示出大量荧光,而碱性pH几乎不显示荧光。链亲和素pHast将在内体中发出荧光以及由于其酸性更强的pH而导致的细胞溶酶体。在Spectra Max Gemini EM(例如:532nm/EM:560nm)。
Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究领域包含神经靶向毒素,神经生物学研究方面的抗体/蛋白,靶向剂内化水平检测工具等。艾美捷科技是ATSbio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Advanced-Targeting-Systems.shtml
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ATSbio丨艾美捷ATSbio山羊IgG SAP说明书
控制是科学程序的重要组成部分;没有它们,很难隔离具体的影响来自非特定或虚构的。该控制分子具有相同的分子量,并且以与目标缀合物相同的方案合成。区别在于将细胞特异性靶向剂替换为“空白”、无特异性的抗体或肽,以及没有靶向细胞的能力。简而言之,它们是行为实验的完美控制分子高级靶向系统的靶向缀合物。
艾美捷Advanced Targeting Systems /ATSbio山羊IgG SAP是与二级缀合物一起使用的完美对照。二级抗体缀合物是与二价一级抗体(小鼠单克隆、兔多克隆、人单克隆、大鼠单克隆抗体或IgM小鼠单克隆抗体)以确定初级抗体是否能内化saporin和因此,将适合作为主要免疫毒素结合。山羊IgG SAP,用于代替二级抗体缀合物将为比较初级抗体的活性提供一个确定的基线抗体内化。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio山羊IgG SAP特异性和制备:
该对照缀合物没有已知的特异性;它可以与具有Fc受体的细胞反应。山羊IgGSAP是免疫前山羊IgG抗体和核糖体失活蛋白saporin的化学偶联物。该产品通过细胞毒性试验进行常规测试。
图:PC12细胞,一种表达Thy1的大鼠肿瘤细胞系以每孔5000个细胞的速度接种受体一夜适应。将细胞暴露于OX7-SAP,OX7 Ab(在50ng/孔MAB-ZAP中稀释)和山羊IgGSAP。月/月加入(Promega)混合物,在分子诊断Spectramax读板器SoftMax软件。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio山羊IgG SAP文献参考:
1. Tazzari PL, Bolognesi A, De Totero D, Falini B, Lemoli RM, Soria MR, Pileri S, Gobbi M, Stein H,
Flenghi L, et al. (1992) Ber-H2 (anti-CD30)-saporin immunotoxin: a new tool for the treatment of
Hodgkin's disease and CD30+ lymphoma: in vitro evaluation. Brit J Haemat 81:203-211.
2. Dinota A, Tazzari PL, Michieli M, Visani G, Gobbi M, Bontadini A, Tassi C, Fanin R, Damiani D, Grandi
M, et al. (1990) In vitro bone marrow purging of multidrug-resistant cells with a mouse monoclonal
antibody directed against Mr 170,000 glycoprotein and a saporin-conjugated anti-mouse antibody. Cancer Res 50:4291-4294.
3. Thorpe PE, Brown AN, Bremner JA Jr, Foxwell BM, Stirpe F (1985) An immunotoxin composed of
monoclonal anti-Thy 1.1 antibody and a ribosome-inactivating protein from Saponaria officinalis: potent antitumor effects in vitro and in vivo. J Natl Cancer Inst 75(1):151-159.
Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究领域包含神经靶向毒素,神经生物学研究方面的抗体/蛋白,靶向剂内化水平检测工具等。艾美捷科技是ATSbio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Advanced-Targeting-Systems.shtml
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ATSbio丨艾美捷ATSbio Orexin-B-SAP说明书
食欲素A和食欲素B受体(也称为下视黄蛋白1和2)位于穹窿周围区域/下丘脑后外侧,该区域的投射物覆盖了大脑的大部分区域。这些受体与各种神经生理和神经心理疾病有关,如嗜睡症、失眠、药物成瘾、焦虑和偏头痛。orexin-B-SAP缀合物由与saporin缀合的大鼠/小鼠orexin-B肽组成。Orexin-B与下视黄醇(HCRT)-2受体结合的亲和力约为HCRT-1受体的5倍。
艾美捷Advanced Targeting Systems /ATSbio Orexin-B-SAP是Orexin-B和核糖体失活蛋白saporin之间的化学偶联物。它消除了表达HCRT-2受体的细胞。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio Orexin-B-SAP特异性和制备:
这种靶向毒素识别表达食欲素2受体的细胞。Orexin-B-SAP是一种化学偶联物在orexin-B和核糖体失活蛋白saporin之间。
艾美捷Advanced Targeting Systems/ATSbio Orexin-B-SAP使用和储存:
食欲素-B-SAP消除了表达食欲素2受体的细胞。所有其他单元格保持不变。有可能材料的批次间差异;工作稀释度必须由最终用户确定。如果这是一个新的批次,在开始完整的实验方案之前,您必须评估适当的工作稀释度。使用前轻轻旋转材料;5-10秒的缩微胶片就足够了。将材料储存在-20°C下未稀释的等分试样。材料应按方便的体积和数量进行等分,以避免反复冷冻和解冻可能会损害蛋白质含量。在这些条件下,材料具有非常稳定的保质期。解冻应在室温或冰上进行。解冻的溶液应在使用前保持在冰上。
请勿将还原剂(如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇或抗坏血酸)用于此材料。
Advanced Targeting Systems/ATSbio Orexin-B-SAP文献参考:
1. Schwartz MD, Nguyen AT, Warrier DR, Palmerston JB, Thomas AM, Morairty SR, Neylan TC, Kilduff
TS. (2016) Locus Coeruleus and Tuberomammillary Nuclei Ablations Attenuate Hypocretin/Orexin
Antagonist-Mediated REM Sleep. eNeuro 3(2)
Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究领域包含神经靶向毒素,神经生物学研究方面的抗体/蛋白,靶向剂内化水平检测工具等。艾美捷科技是ATSbio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Advanced-Targeting-Systems.shtml
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ATSbio丨艾美捷ATSbio黑色素蛋白兔多克隆抗体说明
本质上光敏的视网膜神经节细胞(ipRGCs)含有黑素。ipRGC具有惊人的长过程,参与对光和暗的感知,是昼夜节律的决定因素。抗黑色素蛋白(UF006)对小鼠ipRGCs具有非常高的特异性。
抗黑色素蛋白(UF006)识别代表小鼠黑素胞外域15个最N端氨基酸的序列。抗黑色素蛋白(UF006)不会与其他物种的黑素蛋白发生交叉反应,它对小鼠非常特异。这种抗体通常通过免疫荧光检测。
图例:小鼠视网膜横截面染色。绿色的计数器标记是PKCalpha,一种双极细胞标记。抗黑色素染色为红色。图片由高静怡、刘晓蓉和伊格纳西奥·普罗旺西奥提供。
艾美捷Advanced Targeting Systems /ATSbio 黑色素蛋白兔多克隆抗体应用包括免疫荧光。这种抗体在横截面染色中起作用,但在平板染色中不起作用。这种抗体在免疫印迹中不起作用。
艾美捷Advanced Targeting Systems /ATSbio 黑色素蛋白兔多克隆抗体特异性和制备:
抗黑色素蛋白(UF006)识别代表小鼠黑素细胞外结构域。抗黑色素蛋白(UF006)不会与
其他物种,它对小鼠非常特异。这种抗体通常通过免疫荧光检测。
Advanced Targeting Systems/ATSbio 黑色素蛋白兔多克隆抗体文献参考:
1. Göz D, Studholme K, Lappi DA, Rollag MD, Provencio I, Morin LP (2008) Targeted destruction of
photosensitive retinal ganglion cells with a saporin conjugate alters the effects of light on mouse circadian rhythms. PLoS ONE 3(9):e3153.
2. Provencio I, Rollag MD, Castrucci AM (2002) Photoreceptive net in the mammalian retina. Nature
415:493.
Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究领域包含神经靶向毒素,神经生物学研究方面的抗体/蛋白,靶向剂内化水平检测工具等。艾美捷科技是ATSbio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
来源:https://www.amyjet.com/brand/Advanced-Targeting-Systems.shtml
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