sGAG检测试剂盒，Blyscan染料来助攻！

艾美捷sGAG检测试剂盒，Blyscan染料来助攻！

硫酸氨基葡萄糖 Glucosamine Sulfate，用于预防和治疗各种类型的骨性关节炎，如膝关节、髋关节、脊柱、肩、手、手腕和踝关节等部位的及全身性的骨性关节炎。本药可直接抗炎，缓解骨性关节炎的疼痛症状，改善关节功能，并阻止骨性关节炎病程的发展。且不会出现因前列腺素受抑制而引起的不良反应。

接下来小编给大家说的这个艾美捷sGAG检测试剂盒——专门用于检测样本中的硫酸氨基聚糖，它采用常规生化方法，通过标准曲线和比色，可定量分析总硫酸化多糖（氨基聚糖和蛋白聚糖）的含量，亦可测定O端和N端硫酸氨基多糖的比值。主要起作用的是Blyscan染料，它可以特异性的与氨基聚糖和蛋白聚糖上的硫酸多糖组分结合，该方法不适于检测已经降解的硫酸化双糖片段。

艾美捷sGAG检测试剂盒的特点：

可检测广泛的蛋白多糖，可检测的氨基多糖包括硫酸软骨素、硫酸角质素、硫酸皮肤素、硫酸肝素，不适合检测包含海藻酸的样品，因为它们含有糖醛酸。该试剂盒也不能对透明质酸定量，但透明质酸并不会对硫酸化氨基多糖的检测产生干扰。细胞培养基中20%的胎牛血清也不会干扰实验。该方法检测灵敏度为5ug，所需时间为1小时。

艾美捷sGAG检测试剂盒检测样本：

可来自软骨组织、动脉组织、肺组织、皮肤组织、肿瘤组织、细胞核组织提取物、细胞培养液、羊水和尿液

Blyscan检测流程图：

艾美捷sGAG检测试剂盒实验步骤 ：

1. 绘制标准曲线

2. 待测样品的处理：

取50ul待测样品进行实验。如果反应物在656nm初的吸收峰大于1.5，则对样品进行稀释，待测样样品浓度落入标准曲线中段时，准确度较高。

3. 硫酸氨基聚糖—染料复合物的获得

加1.0ml的Blyscan染料溶液到待测样本中，充分混匀，待不溶物出现，离心，弃上清，则获得紫色的硫酸氨基聚糖—染料复合物

4. 硫酸氨基聚糖—染料复合物中染料的释放

加入1.0ml的染料释放剂，充分混匀。溶解5min以上，使染料充分释放

5. 测定

用分光光度计于波长656nm处测定，或使用colorimeter红色滤光片测定

sGAG检测试剂盒已发表文章，超500篇，仅摘录展示部分：

1、Ahn, G., Min, K., Kim, C., Lee, J., Kang, D., reports, J. W.-S., & 2017 Precise stacking of decellularized extracellular matrix based 3D cell-laden constructs by a 3D cell printing system equipped with heating modules. Nature.com.

2、Makris, E., & Responte, D. (2014). Developing functional musculoskeletal tissues through hypoxia and lysyl oxidase- induced collagen cross-linking. PNAS 111, E4832 E4841.

3、Prewitz,M.C., Seib,F.P., von Bonin,M., Friedrichs,J., Sti+ el,A., Niehage,C., M++ller,K., Anastassiadis,K., Waskow,C. and Hoflack,B. (2013) Tightly anchored tissue-mimetic matrices as instructive stem cell microenvironments. Nature Methods 10, 788 794

4、Song,J.J., Guyette,J.P., Gilpin,S.E., Gonzalez,G., Vacanti,J.P. and Ott,H.C. (2013) Regeneration and experimental orthotopic transplantation of a bioengineered kidney. Nature medicine, 19, 646-651.

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Nature，PNAS都在用的艾美捷胶原蛋白检测试剂盒，超1k文献验证

胶原蛋白是生物高分子，动物结缔组织中的主要成分，也是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白，占蛋白质总量的25%～30%，某些生物体甚至高达80%以上。胶原蛋白的定量检测对于某些疾病的诊断尤为重要。

接下来小编给大家说的这个艾美捷胶原蛋白检测试剂盒——超过1000+文献验证，Nature，PNAS，ACS Nano都在用，分为可溶性胶原检测试剂盒和不可溶性胶原检测试剂盒两种类型。

1、可溶性胶原检测试剂盒（Sircol Soluble Collagen Assay，cat#：S1000）

该试剂盒采用与胶原特异性结合的Sircol染料，主要用于定量检测哺乳动物组织中抽提的酸溶性胶原和体外培养哺乳动物细胞释放到培养基中的胶原。

可溶于酸、胃蛋白等的可溶性胶原均可检测，具体可检测的胶原类型为I-V型，VI-XIV型胶原也可检测，但由于难以制备标准曲线，还无法定量。Sircol染料不能区分不同类型的胶原，但可与胶原的[Gly-X-Y]n螺旋结构特异性地结合。随着胶原变性为凝胶，该染料与胶原的结合力减弱。非脊椎动物与胶原由于变性温度较低、羟脯氨酸残基较少等原因，结合染料的能力较弱，需要制备种属特异性的纯化标准品，以绘制标准曲线。

2、不可溶性胶原检测试剂盒（Sircol Insoluble Collagen Assay，cat#：S2000）

这种检测方法能用于评估因快速生长，发育，组织修复，重塑和创伤愈合而新近沉积的胶原纤维的产生速度。适用的样本包括组织，骨骼和钙化的组织。

艾美捷胶原蛋白检测试剂盒特点：

它替代了常规羟脯氨酸分析方法。无需操作浓酸和浓碱。

Sircol不溶性胶原检测方法使用温和的酸和温度处理，耗时2到3小时。

经溶解性转换为变性胶原，后续检测在一天内完成。

可溶性和不溶性胶原比例可使用同一Sircol染色试剂完成。

灵敏度：10 μg

那么，选择S1000还是选择S2000？

艾美捷胶原蛋白检测试剂盒相关研究：

S1010 Sircol Bovine Collagen Reference Standard (0.5 mg/ml) 3x 5 ml

S1500 Sircol Dye & Dye Release Reagents 2x 110 ml, 2x 150 ml

S1005 Sircol Dye Reagent 3x 110 ml

S1007 Sircol Dye Release Reagent 3x 150 ml

S6000 Sircol Insoluble Collagen Assay (Large Economy Kit) 400 assays (1 kit)

S2000 Sircol Insoluble Collagen Assay, Bovine Collagen (Standard Kit Size) 100 assays (1 kit)

S1011 Sircol Rat Collagen Reference Standard (0.5 mg/ml) 3x 5 ml

S5000 Sircol Soluble Collagen Assay (Large Economy Kit) 440 assays (1 kit)

S1000 Sircol Soluble Collagen Assay, Bovine Collagen (Standard Kit Size) 110 assays (1 kit)

S1111 Sircol Soluble Collagen Assay, Rat Collagen (Standard Kit Size) 110 assays (1 kit)

S4000 Sircol Soluble plus Sircol? Insoluble Collagen Combination Pack 2x 110 assays

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115-545-003丨艾美捷Alexa Fluor 488标记亲和纯化山羊抗小鼠IgG（H+L）二抗

艾美捷Alexa Fluor 488标记亲和纯化山羊抗小鼠IgG（H+L）二抗背景：

Alexa Fluor 488是一种绿色荧光团，优于其他荧光素，实验证明比包括Cy2、FITC在内的其他绿色荧光基团都好。不仅亮度更高，而且光稳定性更好。在pH 4-10时保持稳定是另一优越之处。Alexa Fluor是荧光标记试剂的一大突破，包括一系列近紫外、可见光和近红外光谱的优良染料，这些试剂产生的偶联物无一例外是实验检测过极好和极亮的，Alexa Fluor荧光染料具有较宽的激发和发射波段，在从蓝光到远红光的宽泛范围内提供了多色检测和FRET（荧光共振能量转移）的多种选择。

与传统的荧光团相比，艾美捷Alexa Fluor 488标记亲和纯化山羊抗小鼠IgG（H+L）二抗具有发光亮度更强，灵敏度更高，背景更低的优势，同时其对pH的稳定性更好，发光 也更持久，因此更适合于拍照。Alexa Fluor荧光荧光染料作为荧光显微镜、细胞生物学和分子生物学内的生物分子、细胞和组织标记物，可应用于生物技术和研究等众多领域。

艾美捷Alexa Fluor 488标记亲和纯化山羊抗小鼠IgG（H+L）二抗基本参数：

英文：Alexa Fluor 488-conjugated AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG （H+L）

cat#：115-545-003

规格：1.5mg

应用类型：

1:100 - 1:800适用于大部分应用

免疫原：小鼠IgG

来源宿主：山羊

反应性：该山羊抗小鼠二抗与小鼠IgG分子有特异性反应，与其它小鼠免疫球蛋白（包括IgM、IgE、IgD、IgA等）的轻链有交叉反应。该二抗与血清内非免疫球蛋白无交叉反应，但可能与其它种属的免疫球蛋白有交叉反应。

保存建议：冻干粉保存在2-8°C，准备用时，根据指示的体积加入三蒸水，在2-8°C条件下，未稀释的液体保质期为6周，每天准备新鲜的工作液。如果溶解后想延长保存期，加入等体积的甘油（ACS级别或更好的）使终浓度为50%，保存在-20°C。另外也可以在没有甘油时直接分装，并冰冻在-70°C或以下，避免反复冻融。

来源：https://www.amyjet.com/products/115-545-003.shtml

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005-000-002丨艾美捷山羊免疫球蛋白中英文说明书

艾美捷山羊免疫球蛋白背景：

正常血清是用来描述来自没有用特异抗原进行免疫产生抗体的动物的血清.因此，正常血清与抗血清相对.正常血清包含血清蛋白的一般补体，包括存在于特定物种健康动物体内的不同种类的免疫球蛋白.提供的免疫球蛋白是从正常血清中又进一步通过盐析、离子交换层析、凝胶过滤等纯化.由于只含有微量的其它免疫球蛋白，可作为IgG更经济的替代选择.

通过盐分馏、离子交换层析和凝胶过滤从未免疫动物血清中纯化γ球蛋白。γ 球蛋白是一种廉价的 IgG 来源，只有痕量的其他免疫球蛋白和/或非免疫球蛋白血清蛋白。γ 球蛋白以磷酸盐缓冲液中的无菌液体形式提供，不含稳定剂或防腐剂。

艾美捷山羊免疫球蛋白基本参数：

英文：Goat Gamma Globulin

cat#：005-000-002

规格：10mg

物理状态：无菌过滤液体

储存：在无菌条件下储存在 2-8°C。在使用当天准备工作稀释液。

有效期：一年。如果测试结果对预期用途是可接受的，则有效期可能会延长。

防腐剂： 无

Goat Gamma Globulin

Host: Goat

Product: Gamma Globulin

Conjugate: Unconjugated

Product Category: Normal Serums and Gamma Globulins

RRID: AB_2336984

Information

Gamma globulins are purified from non-immunized animal serums by salt fractionation, ion-exchange chromatography and gel filtration. Gamma globulins are an inexpensive source of IgG with only trace amounts of other immunoglobulins and/or non-immunoglobulin serum proteins. Gamma globulins are supplied as sterile liquids in phosphate buffer without stabilizers or preservatives.

Physical State: Sterile-filtered liquid

Storage: Store at 2-8°C under sterile conditions. Prepare working dilution on day of use.

Expiration date: one year from date of receipt. The expiration date may be extended if test results are acceptable for the intended use.

Preservative: None

来源：https://www.amyjet.com/products/005-000-002.shtml

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115-115-164丨艾美捷R-PE标记亲和纯化山羊抗小鼠IgG二抗

艾美捷R-PE标记亲和纯化山羊抗小鼠IgG二抗背景：

R-藻红蛋白（R-PE）是从红藻中分离出来的。它的主要光吸收峰在565nm，第二吸收峰在496和545nm处。它的第二类高峰中相对突起的吸收峰，在来自不同种类的R-PEs中有显著性的变化。R-PE由三个亚基组成，α，20，000 道尔顿_ （~20，000 daltons），β，20，000 道尔顿_ （~20，000 daltons） andγ，30，000 道尔顿_ （~30，000 daltons）。

研究发现完整的R-PE分子量大约在240，000道尔顿，经过检测一个亚基由（α-β）6γ组成。R-PE的γ亚基紧含有藻红素（PEB）生色团，而α 和β亚基含有PEB和藻尿胆素（PUB）两种发色团。来自不同种属的R-PEs吸收光谱的变化性反应了亚基中PEB/PUB的比例不同。R-PE和与B-PE紧密相关的藻红蛋白产生主要的荧光，其荧光量超过了总体荧光的90%，并且在任何浓度适宜的溶液中，其橙色荧光肉眼可见。

艾美捷R-PE标记亲和纯化山羊抗小鼠IgG二抗基本参数：

英文：R-PE-conjugated AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG （subclasses 1+2a+2b+3） Fcγ fragment specific （min X Hu，Bov，Rb Sr Prot）

cat#：115-115-164

规格：1ml

应用类型：1:50 - 1:200适用于大部分应用

免疫原：小鼠IgG（1+2a+2b+3）

来源宿主：山羊

反应性：该山羊抗小鼠二抗只与小鼠IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3的Fc片段有特异性反应，但是与小鼠免疫球蛋白的Fab片段无交叉反应。该二抗与血清内非免疫球蛋白和IgM无交叉反应。通过血清吸附处理，其与人、牛、兔血清内蛋白包括免疫球蛋白）的交叉反应降到最低，但可能与除此以外其它种属的免疫球蛋白有交叉反应。

保存建议：冻干粉保存在2-8°C，准备用时，根据指示的体积加入三蒸水，产品在2-8°C条件下，未稀释的液体保质期为6个月，避免冰冻。每天准备新鲜的工作液。合适的保存方式可以延长保质期。

来源：https://www.amyjet.com/products/115-115-164.shtml

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309-005-008丨艾美捷亲和纯化兔抗人IgG二抗说明书

艾美捷亲和纯化兔抗人IgG二抗背景：

基于免疫电泳和/或 ELISA，抗体与人 IgG 重链的 Fc 部分反应，但不与人 IgG 的 Fab 部分反应。未检测到针对人 IgM 或 IgA 或针对非免疫球蛋白血清蛋白的抗体。该抗体可能与来自其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应。

通过免疫亲和层析从抗血清中分离出完整的 IgG 抗体。它们具有一个 Fc 部分和两个通过二硫键连接在一起的抗原结合 Fab 部分，因此它们是二价的。据报道，平均分子量约为160 kDa。整个 IgG 形式的抗体适用于大多数免疫检测程序，并且较具成本效益。

艾美捷亲和纯化兔抗人IgG二抗基本参数：

英文：AffiniPure Rabbit Anti-Human IgG，Fcγ fragment specific

cat#：309-005-008

规格：2mg

目标： 人类

宿主：兔

抗体 形式： Whole IgG

特异性： IgG，Fcγ 片段特异性

偶联物：未偶联

类别： Whole IgG 亲和纯化抗体

克隆性：多克隆

RRID： AB_2339626

物理状态：无菌过滤液体

储存：在无菌条件下储存在 2-8°C。在使用当天准备工作稀释液。

有效期：一年。如果测试结果对预期用途是可接受的，则有效期可能会延长。

纯度： 使用与琼脂糖珠偶联的抗原，通过免疫亲和层析从抗血清中纯化抗体。

缓冲液： 0.01M 磷酸钠，0.25M NaCl，pH 7.6

防腐剂： 无

建议工作浓度或稀释范围：10-20 µg / ml

稀释因子以范围的形式呈现，因为最佳稀释度是许多因素的函数，例如抗原密度、渗透性等。实际使用的稀释度须凭经验确定。

来源：https://www.amyjet.com/products/309-005-008.shtml

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200-002-037丨艾美捷IgG组份小鼠抗荧光素FITC单克隆抗体中英文说明书

艾美捷IgG组份小鼠抗荧光素FITC单克隆抗体背景：

异硫氰酸荧光素 （fluorescein isothiocyanate， FITC） 纯品为黄色或橙黄色结晶粉末。其分子量为 389。4，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长为520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年，是目前应用最广泛的荧光素。小鼠源单克隆抗FITC抗体可以与荧光素如FITC或DTAF反应，因此可用于直接的标记或者更灵敏的检测FITC荧光，各种不同标记的小鼠源单克隆抗FITC抗体可以用于原位杂交、免疫组化、流式等试验中。

艾美捷IgG组份小鼠抗荧光素FITC单克隆抗体基本参数：

英文：IgG Fraction Monoclonal Mouse Anti-Fluorescein （FITC） Antibody

cat#：200-002-037

规格：1mg

目标： 荧光素

宿主：小鼠

抗体 形式： IgG 组分单克隆

特异性：抗荧光素 (FITC)

偶联物：未偶联

类别： 抗荧光素、抗地高辛、抗生物素和抗 HRP

克隆性：单克隆RRID： AB_2313645

物理状态：无菌过滤液体

储存：在无菌条件下储存在 2-8°C。在使用当天准备工作稀释液。

有效期：一年。如果测试结果对预期用途是可接受的，则有效期可能会延长。

纯度： 通过不涉及亲和纯化的色谱程序从小鼠腹水中纯化IgG级分。

缓冲液： 0.01M 磷酸钠，0.25M NaCl，pH 7.6

防腐剂： 无

Target: Fluorescein

Host: Mouse

Antibody Format: IgG Fraction Monoclonal

Specificity: Anti-Fluorescein (FITC)

Conjugate: Unconjugated

Product Category: Anti-Fluorescein, Anti-Digoxin, Anti-Biotin, and Anti-HRP

Clonality: Monoclonal

RRID: AB_2313645

Information

IgG fraction Monoclonal Mouse Anti-Fluorescein may be used either as direct conjugates, or for more sensitivity, they can be used unconjugated followed by a conjugated anti-mouse IgG (H+L) for signal enhancement.

Usage

Physical State: Sterile-filtered liquid

Storage: Store at 2-8°C under sterile conditions. Prepare working dilution on day of use.

Expiration date: one year from date of receipt. The expiration date may be extended if test results are acceptable for the intended use.

Purity: The IgG fraction was purified from mouse ascites by chromatographic procedures not involving affinity purification.

Buffer: 0.01M Sodium Phosphate, 0.25M NaCl, pH 7.6

Preservative: None

来源：https://www.amyjet.com/products/200-002-037.shtml

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009-000-012丨艾美捷色谱级人IgM（骨髓瘤）完整分子说明书

艾美捷色谱级人IgM（骨髓瘤）完整分子背景：

色谱级的免疫球蛋白是从非免疫的动物血清中提取纯化出来的，因此这些纯化的免疫球蛋白不包含针对目前已知免疫原的任何抗体.色谱级的制备过程设计各种方法，包括离子交换、凝胶过滤、脱水化、金属亲和、蛋白A和其他免疫亲和层析技术.同时，还通过进一步的酶切消化和制备出F（ab’）2和Fab片段化抗体，这种片段化的产品纯度极高，不含整个分子或者其他无关的片段，这些色谱级的免疫球蛋白极其片段可被用作实验对照.

艾美捷色谱级人IgM（骨髓瘤）完整分子纯度极高，尤其适合用于对照分析.其中这种片段化的产品纯度极高，不含整个分子或者其他无关的片段，这些色谱级的免疫球蛋白极其片段可被用作实验对照.

艾美捷色谱级人IgM（骨髓瘤）完整分子基本参数：

物理状态：无菌过滤液体

储存：在无菌条件下储存在 2-8°C。在使用当天准备工作稀释液。

有效期：一年。如果测试结果对预期用途是可接受的，则有效期可能会延长。

纯度： 基于抗原浓度为 20 mg/ml 的免疫电泳，针对山羊抗人全血清的沉淀模式与针对山羊抗人 IgM、Fc 5μ片段特异性的沉淀模式相同。未检测到针对山羊抗人 IgG、Fc 片段特异性的沉淀素线；山羊抗人 IgA，链特异性；或山羊抗人α-2巨球蛋白。

缓冲液： 0.01M 磷酸钠，0.25M NaCl，pH 7.6

防腐剂： 无

Host: Human

Product: IgM (myeloma), whole molecule

Conjugate: Unconjugated

Product Category: ChromPure™ Purified Proteins from Normal Serums

RRID: AB_2337048

Information

ChromPure is our trade name for highly purified proteins from the serum of non-immunized animals.

Usage

Physical State: Sterile-filtered liquid

Storage: Store at 2-8°C under sterile conditions. Prepare working dilution on day of use.

Expiration date: one year from date of receipt. The expiration date may be extended if test results are acceptable for the intended use.

Physical State: Sterile-filtered liquid

Storage: Store at 2-8°C under sterile conditions. Prepare working dilution on day of use.

Expiration date: one year from date of receipt. The expiration date may be extended if test results are acceptable for the intended use.

Purity: Based on immunoelectrophoresis at an antigen concentration of 20 mg/ml, the pattern of precipitation against goat anti-human whole serum is the same as that against goat anti-human IgM, Fc5μ fragment specific. No precipitin line was detected against goat anti-human IgG, Fc fragment specific; goat anti-human IgA, a chain specific; or goat anti-humanalpha-2 macroglobulin.

Buffer: 0.01M Sodium Phosphate, 0.25M NaCl, pH 7.6

Preservative: None

来源：https://www.amyjet.com/products/009-000-012.shtml