对全自动生化分析检测系统精密度和准确度的核实

自动生化分析仪应用中校准、维护和 SOP 文件准备要求

天津医科大学第二医院 李忠信
天津市儿童医院 沈永明 管卫

　　这是经典的检定报告，检定合格可以投入使用。某些仪器也报告过他们的性能指标，但没有提供检定方法。目前国家行政管理部门尚没有开展这方面的检定，国外大公司在中国的机构也不提供这方面的服务。药品食品监督管理局正在着手制定有关的技术标准。

( 二 ) 用户对检测系统精密度和准确度的核实

　　实验室期望核实检测系统（为完成一个检测项目所涉及的仪器、试剂、标准品、校正品、质控品、操作程序和维护程序等的组合称为检测系统）已被认可的性能所进行的评估为核实（ Demonstration ）实验。

1. 使用校正物对检测系统进行校准

　　一个检测系统在质控在控的条件下，检测校正物的值，若与校正物给定值的相对偏倚在± 2% 之内。表明所测结果准确并具有溯源性。

　　在初始校准未通过或 质控未通过 或更换试剂时应执行再校准。仪器在更换光源灯，反应槽清洗，更换比色杯，调整项目参数等维护保养程序之后亦应执行再校准。

　　检测系统设有校准程序。各项目在各系统中的校准周期不尽相同，应按各自配套的试剂盒说明书进行。项目确定后将其记录于“日校准记录表”中。校准结果的确认依据“试剂说明书”中的判断指标。若超出允许范围，应查找原因或与厂家联系。

2. 精密度核实

（ 1 ） 实验设计－ 天数和重复次数

　　以 s 批内 和 s 总 各表示为厂商提供 的批内和 总精密度水平。以 s 批内 和 s 总 各表示为实验室核实实验 的批内和 总精密度水平。在进行以下标准差大小比较时，厂商的 s 批内 和 s 总 对应的各个均值（ 批内均值 和总均值）大小应相同或极其相近，只有在这样的条件下，才可以对标准差进行大小的比较。如果厂商按照美国的临床实验室标准委员会的 EP5 文件进行 的批内和 总精密度估计时，它们的均值 采用总 均值表示。在这样的情况下，进行标准差大小比较时可以直接使用变异系数（ CV ）作比较。

① 如果 s 批内 ＜ 2/3 s 总 ，实验至少要做 5 天，每批每个水平作 4 次重复检测。 这个方案针对天间变异是总精密度的重要组份的情况。
② 如果 s 批内 ＞ 2/3 s 总 ，实验至少要做 3 天，每批每个水平作 3 次重复检测。 这个方案针对天间变异不是总精密度的重要组份的情况。
③ 如果如果 s 批内 和 2/3 s 总 的关系不清楚，实验至少要做 5 天，每批每个水平作 4 次重复检测。

（ 2 ） 实验程序

①每天做 1 批
a . 如果 s 批内 ＜ 2/3 s 总 ， 5 天内，每天做 2 个浓度水平，每个水平作 4 次重复检测。
b . 如果 s 批内 ＞ 2/3 s 总 ， 3 天内，每天做 2 个浓度水平，每个水平作 3 次重复检测。
② 实验时，仍然每天进行控制品的检测。如果控制值失控，或操作有问题，弃去数据，重做。
③ 可以在同一批内进行准确度实验样品的检测。
④ 按照厂商说明要求进行校准。如果厂商强调，它的精密度数据是经过多次校准后产生的，操作人员也应在实验中进行重校准。

（ 3 ） 数据记录

附录 A 为记录数据表格样张，便于归纳数据和统计。计算表见附录 A （略）。如何使用和计算示例见附录 B （略）。
每个浓度水平应分别计算。

（ 4 ）精密度数据计算

① 批内精密度
按下列公式计算：

式中：
S 为总和记号。在记号右侧数据求总和。
D ＝ 总天数（ 3 或 5 ）。
n ＝ 每天重复检测总数（ 3 或 4 次），
x di ＝ 每天重复检测结果（ 3 或 4 个），
＝ 在第 d 天内所有结果的均值。
应注意的是，如果实验方案不是完全按上述方式进行（应该在不同天，所有 批进行 相同的重复），估计 的批内精密度 将不正确。
将 s 批内 除 以所有结果的均值 的百分值为 下的 CV 批内 （％）。

② 总精密度
用下列公式进行总精密度的计算 [5] 。
计算方差 B ，这是每天均值的方差。公式如下：

式中：

为第 d 天所有 结果均值，

为所有结果的均值。

按以下公式计算 s 总 ：

式中 n ＝每批重复数。

将 s 总 除以 所有结果的均值 的百分值为 下的 CV 总 （％）。

（ 5 ） 将估计的批内 精密度和提供 的批内精密度 作比较

　　如果厂商 的批内精密度 为变异系数（ CV 厂商批内 ），在均值水平相同（严格讲是及其接近）的条件下，可以 将估计的批内 精密度（ CV 批内 ）和厂商 的批内精密度 （ CV 厂商批内 ）作比较。

　　如果核实实验估计的 CV 批内 小于 厂商的 CV 厂商批内 ，实验室已经核实 了批内精密度 和 厂商批内精密度 的一致。若核实实验的 批内 CV 批内 大于厂商提供的 CV 厂商批内 ，注意：实验室的 CV 可以大于厂商的，但是可能在统计上差异是不显著的。所以若核实实验的 CV 批内 大于 厂商提供的 CV 厂商批内 ，应进行统计检验，确定是否在统计上差异是显著的（真的有差异）。本方案目前建议不作统计上的显著性检验，如果出现核实实验的 CV 批内 大于 厂商原有 的批内 CV 厂商批内 ，就判断：该实验室条件下具有 的批内精密度 水平超出了厂商 的批内精密度 水平，厂商提供 的批内精密度 不能被确认，实验室应和厂商联系，解决问题。

（ 6 ）将核实实验估计的总精密度和厂商提供的总精密度作比较

　　如果厂商的总精密度为变异系数（ CV 厂商 总 ），在均值水平相同（严格讲是及其接近）的条件下，可以将核实实验估计的总精密度（ CV 总 ）和厂商的总精密度（ CV 厂商 总 ）作比较。

　　如果核实实验估计的总 CV 总 小于厂商的总精密度水平（ CV 厂商 总 ），用户已经核实了总精密度和厂商总精密度的一致。若核实实验的总精密度 CV 总 大于厂商提供的总精密度水平（ CV 厂商 总 ），注意：用户的核实 实验总 精密度 CV 总 可以大于厂商提供的总精密度水平（ CV 厂商 总 ），但是可能在统计上差异是不显著的。所以若核实实验的 CV 总 大于厂商提供的总精密度（ CV 厂商 总 ）水平，应进行统计检验，是否在统计上差异是显著的（真的有差异）。 和批内精密度 的做法一样，目前建议不作统计上的显著性检验，如果出现核实实验的总精密度

　　CV 总 大于厂商原有的总精密度水平（ CV 厂商 总 ），就判断：该实验室条件下具有的总精密度水平超出了厂商的总精密度水平，厂商提供的总精密度不能被确认，实验室应和厂商联系，解决问题。

（三） 非检测系统利用 临床项目 进行校准：

1. 临床项目的批内 精密度

对项目浓度范围满足表 3 的新鲜病人血清，重复测定 20 次，计算均值和变异系数（ CV ）。变异系数应满足表 3 的要求。

表 3 临床项目批内 精密度要求

2. 临床项目 准确度

与已通过注册、具有相同预期用途、原理与结构相似的检测系统进行方法学比较，其相对偏倚满足表 4 的要求。

表 4 临床项目 准确度要求