Nature文章使用认证Kamiya艾美捷抗胸腺嘧啶二聚体单抗方案

Nature文章使用认证Kamiya艾美捷抗胸腺嘧啶二聚体单抗方案

细胞内、外部环境中普遍存在的DNA损伤因素会破坏遗传信息的稳定性。紫外线损伤皮肤的机制之一是损伤细胞的DNA，形成“晒伤细胞”，诱发细胞内DNA产生丰富的变异，主要包括环丁烷嘧啶二聚体（CPD，Cyclobutane pyrimidine dimer）和6-4光产物（6-4PPs）及其异构体，这是诱导DNA 损伤的主要原因之一！   

接下来一起来了解一下众多Nature文章使用认证的Kamiya艾美捷抗胸腺嘧啶二聚体单抗，克隆KTM53。

Kamiya艾美捷抗胸腺嘧啶二聚体单抗（环丁烷嘧啶二聚体CPD）：

名称：Anti-Thymine Dimer mAb, clone KTM53

别名：Cyclobutane pyrimidine dimer (CPD) = Thymine Dimer

特异性：与UV照射产生的Thymine Dimer特异性结合（单链或双链DNA），但不与6,4-PP结合。

抗体浓度：0.5mg/ml

Kamiya艾美捷抗胸腺嘧啶二聚体单抗（环丁烷嘧啶二聚体CPD）Nature文章结果鉴赏：  

1、【Nature, IF=69.5】RNA m6A methylation regulates the ultravioletinduced DNA damage response.（图1） 

本篇文章报道了m6A甲基化修饰在紫外线所致DNA损伤反应中的新功能。在紫外线所致的DNA损伤早期修复过程中，m6A甲基化修饰的RNA迅速在DNA损伤位点聚集，促进损伤的修复。该过程发生在许多poly(A)+转录本上，并受到METTL3和FTO的共同调控。在METTL3表达水平降低时，细胞延迟修复嘧啶二聚体并提高了对紫外线的敏感性。而DNA聚合酶κ (Pol κ)的过表达则可抑制CPD的修复过程。此外RNA的m6A修饰可以作为一种指示性信号，有选择性地和快速地将Polκ募集到损伤位点，促进紫外线所致的DNA损伤修复，利于细胞存活。

2、【Nature Communications，IF=17.69】The protective role of DOT1L in UV-induced melanomagenesis（图2）

DOT1L 组蛋白 H3 赖氨酸 79 (H3K79) 甲基转移酶在 MLL 重排白血病发生中起致癌作用。在这里，我们证明，与 MLL 重排白血病相比，DOT1L 在紫外线辐射 (UVR) 诱导的黑色素瘤发展中起保护作用。具体来说，DOT1L 基因位于一个经常被删除的区域，并在人类黑色素瘤中发生体细胞突变。特定突变在功能上损害 DOT1L 甲基转移酶活性，导致 H3K79 甲基化减少。重要的是，在没有 DOT1L 的情况下，UVR 诱导的 DNA 损伤无法得到有效修复，因此 DOT1L 缺失会促进小鼠暴露于 UVR 后黑色素瘤的发展。从机制上讲，DOT1L 促进 DNA 损伤修复，DOT1L 甲基化 H3K79 参与将 XPC 结合和募集到 DNA 损伤位点以进行核苷酸切除修复 (NER)。该研究表明 DOT1L 在 UVR 诱导的黑色素瘤形成中起保护作用。

来源：https://www.amyjet.com/featured/CPD.shtml

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Kamiya艾美捷抗胸腺嘧啶二聚体单抗（环丁烷嘧啶二聚体CPD）说明书

Kamiya艾美捷抗胸腺嘧啶二聚体单抗相关性质：

同义词：环丁烷嘧啶二聚体（CPD）

特异性：与由以下物质产生的胸腺嘧啶二聚体发生特异性反应：双链或单链DNA的紫外线照射。不与（6-4）照片产品反应。

Ig同种型：小鼠IgG1

免疫原：紫外线照射三文鱼精子DNA

杂交瘤：小鼠骨髓瘤（P3/X63-Ag8）x免疫小鼠（Balb/c）脾细胞。

格式：200µL 0.5 mg/mL纯化单克隆抗体PBS，含蛋白质稳定剂和0.1%叠丨氮丨化钠。通过蛋白质A色谱纯化。

存储：短期储存在4°C，长期储存在-20°C学期避免重复冷冻/解冻循环。

应用和建议的稀释液：n

原位杂交：以1:40至1:80的比例使用稀释。稀释系数取决于应用固定组织的冰冻切片或福尔马林固定石蜡包埋切片推荐。（由最终用户发布。）

DNA印迹：用于检测胸腺嘧啶紫外线损伤DNA和胸腺嘧啶化DNA探针中的二聚体。

Kamiya艾美捷抗胸腺嘧啶二聚体单抗（环丁烷嘧啶二聚体CPD）示例数据：

图1：未经处理的人类皮肤的免疫组织化学染色 

图2：UVB照射人的免疫组织化学染色

仅用于体外研究。不适用于诊断或人类。

【Nature，IF=69.5】Disease-corrected haematopoietic progenitors from Fanconi anaemia induced pluripotent stem cells

诱导多能干 (iPS) 细胞的产生使患者特异性多能细胞的衍生成为可能，并为模拟人类疾病提供了有价值的实验平台。患者特异性 iPS 细胞也被认为具有巨大的治疗潜力，尽管这方面的直接证据仍然缺乏。在这里，我们表明，在纠正遗传缺陷后，范可尼贫血患者的体细胞可以重新编程为多能性，以产生患者特异性的 iPS 细胞。这些细胞系似乎与人类胚胎干细胞和健康个体的 iPS 细胞无法区分。最重要的是，我们表明，校正后的范可尼贫血特异性 iPS 细胞可以产生表型正常（即无病）的骨髓和红细胞谱系的造血祖细胞。这些数据提供了概念验证，即 iPS 细胞技术可用于生成具有细胞治疗应用潜在价值的疾病校正、患者特异性细胞

Kamiya艾美捷抗胸腺嘧啶二聚体单抗（环丁烷嘧啶二聚体CPD）更多Nature发表文章：

Xiang, Yang et al. "RNA m 6 A methylation regulates the ultraviolet-induced DNA damage response". Nature 543,7646 (2017): 573-576. doi:10.1038/nature21671

Zhu, Bo et al. "The protective role of DOT1L in UV-induced melanomagenesis". Nature communications 9,1 (2018): 259. doi:10.1038/s41467-017-02687-7

Raya, Angel et al. "Disease-corrected haematopoietic progenitors from Fanconi anaemia induced pluripotent stem cells". Nature 460,7251 (2009): 53-9. doi:10.1038/nature08129

来源：https://www.amyjet.com/featured/CPD.shtml

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天冬氨酸蛋白酶活性检测丨艾美捷FAM-FLICA Caspase-1 活性分析试剂盒

caspase是一类蛋白酶家族，成员较多，在人类，已经鉴定了11种不同的caspase，Caspase-1在介导炎症反应和细胞焦亡(pyroptosis)中发挥重要作用。市面上常见的是检测细胞裂解液中的Caspase-1活性，更多研究者希望动态检测活细胞 内的Caspase-1的活性，Immunochemistry ICT FAM-FLICA Caspase-1 活性分析试剂盒能针对性地活性进行定量和监测。

艾美捷Immunochemistry 天冬氨酸蛋白酶Caspase-1活性检测试剂盒原理：

FLICA试剂FAM-YVAD-FMK（Ex/Em = 488nm/530nm），是无细胞毒性的，细胞膜渗透抑制剂。进入每个细胞，并不可逆地与活化的caspase-1结合。任何未结合的FAM-YVAD-FMK-FLICA试剂扩散出细胞并被冲走。因此留在细胞内的绿色荧光直接体现了活性caspase-1酶活性的。荧光结果可通过荧光酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪进行分析。

艾美捷Immunochemistry 天冬氨酸蛋白酶Caspase-1活性检测试剂盒组分：

25T：

l FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 1 vial, #653 l 10X Apoptosis Wash Buffer, 15 mL, #635 l Fixative, 6 mL, #636 l Propidium Iodide, 1 mL, #638 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Kit Manual

100T：

l FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 4 vials, #653 l 10X Apoptosis Wash Buffer, 60 mL, #634 l Fixative, 6 mL, #636 l Propidium Iodide, 1 mL, #638 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Kit Manual

保存条件：2-8°C 避光保存。

FAM-FLICA Caspase-1 活性分析试剂盒Nature文章鉴赏：

IF=30.9, 《Escherichia coli Rho GTPase-activating toxin CNF1 mediates NLRP3 inflammasome activation via p21-activated kinases-1/2 during bacteraemia in mice》,Nature Microbiology

更多发表文章，部分：

1、Liang, C;Peng, Y;Sun, H;Wang, L;Jiang, L;Zou, S. Silencing lncRNA KCNQ1OT1 reduced hepatic ischemia reperfusion injury-induced pyroptosis by regulating miR-142a-3p/HMGB1 axis. Molecular and Cellular Biochemistry. 2022 October 29; doi: 10.1007/s11010-022-04586-y. Full Article

2、Jiang, Y;Yang, Y;Hu, Y;Yang, R;Huang, J;Liu, Y;Wu, Y;Li, S;Ma, C;Humphries, F;Wang, B;Wang, X;Hu, Z;Yang, S. Gasdermin D restricts anti-tumor immunity during PD-L1 checkpoint blockade. Cell reports. 2022 October 25; doi: 10.1016/j.celrep.2022.111553. Text

3、Moraes, C;Hottz, E;Dos Santos Ornellas, D;Adesse, D;de Azevedo, C;d’Avila, J;Zaverucha-do-Valle, C;Maron-Gutierrez, T;Barbosa, H;Bozza, P;Bozza, F. Microglial NLRP3 Inflammasome Induces Excitatory Synaptic Loss Through IL-1β-Enriched Microvesicle Release: Implications for Sepsis-Associated Encephalopathy. Molecular Neurobiology. 2022 October 25; doi: 10.1007/s12035-022-03067-z.

来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-97.shtml

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艾美捷ICT FLICA天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性检测试剂盒说明书

Caspases在细胞凋亡和炎症中发挥重要作用。艾美捷ICT FLICA天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性检测试剂盒被研究人员用于通过培养的细胞和组织中的胱天蛋白酶活性来定量凋亡。用FAM FLICA caspase-1测定试剂盒检测caspase-1活性。该体外试验使用荧光抑制剂探针FAM-YVAD-FMK标记活细胞中的活性caspase-1酶。使用荧光显微镜、荧光平板读取器或流式细胞仪分析样品。

FAM FLICA Caspase-1探针允许研究人员评估Caspase-1的激活。FLICA试剂FAM-YVAD-FMK进入每个细胞，并不可逆地与活化的caspase-1结合。因为FAM-YVAD-FMK FLICA试剂与活性酶共价偶联，所以它保留在细胞内，而任何未结合的FAM-YVAD-FMK-FLICA试剂扩散出细胞并被冲走。剩余的绿色荧光信号是添加试剂时细胞中存在的活性caspase-1酶活性的直接测量。含有结合的FLICA的细胞可通过荧光平板读取器、荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。用FLICA试剂标记的细胞可立即读取或使用试剂盒中的固定剂保存16小时。还可以用碘化丙啶或Hoechst 33342分析未固定的样品，以分别检测核形态的坏死或变化。

艾美捷ICT FLICA天冬氨酸蛋白酶Caspase-1活性检测试剂盒参数：

试剂名称FAM-YVAD-FMK

目标Caspase-1

激发/发射488nm/530 nm

分析方法流式细胞仪、荧光显微镜、荧光板读取器

样品类型细胞培养

储存2-8°C

艾美捷ICT FLICA天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性检测试剂盒组分：

Kit 97: 25 Tests

FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 1 vial, #653

10X Apoptosis Wash Buffer, 15 mL, #635

Fixative, 6 mL, #636

Propidium Iodide, 1 mL, #638

Hoechst 33342, 1 mL, #639

Kit Manual

Kit 98: 100 Tests

FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 4 vials, #653

10X Apoptosis Wash Buffer, 60 mL, #634

Fixative, 6 mL, #636

Propidium Iodide, 1 mL, #638

Hoechst 33342, 1 mL, #639

Kit Manual

天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性检测试剂盒部分文献参考：

Hu, R;Liang, J;Ding, L;Zhang, W;Liu, X;Song, B;Xu, Y. Edaravone dexborneol provides neuroprotective benefits by suppressing NLRP3 inflammasome-induced microglial pyroptosis in experimental ischemic stroke. International immunopharmacology. 2022 October 21; doi: 10.1016/j.intimp.2022.109315. Article

Yuan, X;Bhat, OM;Zou, Y;Li, X;Zhang, Y;Li, PL. Endothelial Acid Sphingomyelinase Promotes NLRP3 Inflammasome and Neointima Formation during Hypercholesterolemia. Journal of lipid research. 2022 October 14; doi: 10.1016/j.jlr.2022.100298. Full Text

Wan, Y;Zhang, W;Huang, C;Jian, J;Zhang, Y;Liu, Q;Chen, P;Zhu, X. Ursolic acid alleviates Kupffer cells pyroptosis in liver fibrosis by the NOX2/NLRP3 inflammasome signaling pathway. International immunopharmacology. 2022 October 14; doi: 10.1016/j.intimp.2022.109321. Text

来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-97.shtml

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艾美捷FLIVO探针活体凋亡检测解决方案

关于细胞凋亡的检测工具，市面上屡见不鲜，但是大部分都是针对体外（in vitro）细胞的，活体(in vivo)细胞的凋亡检测却不多见。艾美捷ImmunoChemistry（ICT）FLIVO探针，能够用于细胞凋亡活体检测，助力科研。

FLIVO(FLuorescence in vIVO)探针是细胞渗透性、无毒性的天冬氨酸蛋白酶(Caspases)荧光抑制剂，含有缬氨酸－丙氨酸－天冬氨酸(VAD)氨基酸序列，该序列是活性Caspase的靶点,夹在荧光标记和氟甲基酮(FMK)之间。静脉注射后，FLIVO通过体循环，在细胞中不断扩散。如果细胞内存在活性Caspase，FLIVO将与Caspase上的半胱氨酸形成不可逆的共价键。因此只要细胞膜完好，结合的FLIVO探针就会留在细胞内，从而被标记上荧光，未结合的FLIVO则在动物的体循环中被清除，动物体内剩下的信号就是对caspase活性的直接测定。所以FLIVO可以用于检测活体动物体内Caspase介导的细胞凋亡、焦亡。FLIVO非常敏感，自然发生的低水平细胞凋亡也会被检测到。  

艾美捷ICT FLIVO探针活体凋亡检测,包含的FLIVO探针由荧光基团、VAD序列和氟甲基酮(FMK)组成夹心结构，荧光基团用来检测荧光，VAD序列是活性caspase靶点，FMK有助于与活性caspase形成共价键。  

图1：利用FAM-FLIVO监测细胞死亡，健康神经元和凋亡神经元之间有明显的区别。在对糖尿病的活体动物大脑研究中，对照大鼠(左)和8周STZ糖尿病大鼠(右)的caspase活性来评估神经退行性变。在大鼠死亡前30分钟静脉注射FAM-FLIVO(#981)，直接标记caspase阳性凋亡神经元。死亡后，制备20um冰冻切片的导水管周围灰质(PAG)，用红色荧光Nissl反染色，以识别所有神经元。濒死的凋亡神经元(左)显示FAM-FLIVO(黄/绿色)和Nissl(红色)双重染色。在该模型中，糖尿病动物导水管周围灰质中caspase活性水平高于对照组动物。 

图2：在小鼠脑内接种活金黄色葡萄球菌后诱发脑脓肿。动物在感染后17小时静脉注射NIR-FLIVO 690示踪剂(#9112)或NIR-FLIVO 690游离染料对照剂(#9113)，然后在1小时后使用IVIS Spectrum从离体大脑组织中获得信号。在注射NIR-FLIVO 690示踪剂(右图)后，强烈的caspase活性与脑脓肿相关，而在注射NIR-FLIVO 690游离染料对照剂(左图)的动物中检测到极少的信号。

图3：使用CRi Maestro成像系统，使用NIR-FLIVO 747示踪剂(#9114)对小鼠肿瘤模型中的凋亡组织进行体内成像。NIR-FLIVO 747示踪剂用于无创监测一种实验性抗癌治疗的疗效和时间动力学。在接受安慰剂或实验治疗后，阴性对照小鼠(左图)和实验治疗小鼠(右图)静脉注射NIR-FLIVO 747示踪剂，并在不同时间点使用CRi Maestro成像系统进行无创成像。实验组被试的凋亡肿瘤组织呈亮蓝色荧光，表明实验治疗有凋亡效应。

以上，是有关于艾美捷FLIVO探针活体凋亡检测的相关研究方案。

来源：https://www.amyjet.com/featured/in-vivo.shtml

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试剂盒和示踪剂—艾美捷FLIVO探针活体凋亡检测分析

针对FLIVO(FLuorescence in vIVO)探针的研究，本篇文章推荐艾美捷ImmunoChemistry（ICT）FLIVO探针系列的：天冬氨酸蛋白酶(Caspases)活性检测试剂盒，及 FLIVO示踪剂，主要用于细胞凋亡活体检测，助力科研。

FLIVO(FLuorescence in vIVO)探针是细胞渗透性、无毒性的天冬氨酸蛋白酶(Caspases)荧光抑制剂，含有缬氨酸－丙氨酸－天冬氨酸(VAD)氨基酸序列，该序列是活性Caspase的靶点,夹在荧光标记和氟甲基酮(FMK)之间。静脉注射后，FLIVO通过体循环，在细胞中不断扩散。如果细胞内存在活性Caspase，FLIVO将与Caspase上的半胱氨酸形成不可逆的共价键。因此只要细胞膜完好，结合的FLIVO探针就会留在细胞内，从而被标记上荧光，未结合的FLIVO则在动物的体循环中被清除，动物体内剩下的信号就是对caspase活性的直接测定。所以FLIVO可以用于检测活体动物体内Caspase介导的细胞凋亡、焦亡。FLIVO非常敏感，自然发生的低水平细胞凋亡也会被检测到。  

艾美捷ICT FLIVO探针活体凋亡检测之FLIVO体内天冬氨酸蛋白酶(Caspases)活性检测试剂盒：  

1、FAM-FLIVO In vivo Poly Caspase Assay ***绿色羧基荧光素（#980，6T；#981，24T）

样本：活体动物、离体组织

2、SR-FLIVO In vivo Poly Caspase Assay ***红色磺酰罗丹明B（#982，6T；#983，24T）

样本：活体动物、离体组织

艾美捷ICT FLIVO探针活体凋亡检测之FLIVO示踪剂：

9112  NIR-FLIVO 690 Tracer In vivo Assay ***荧光标签Dylight690  活体动物、离体组织 20T  

9113  NIR-FLIVO 690 Free Dye Control Assay ***荧光标签Dylight690  活体动物、离体组织 20T

9114  NIR-FLIVO 747 Tracer In vivo Assay ***荧光标签Dylight747   活体动物、离体组织  20T

9115  NIR-FLIVO 747 Free Dye Control Assay***荧光标签Dylight747 活体动物、离体组织  20T

 * 仅供科研使用，不得用于医疗.

FLIVO探针的活体使用对药物测定研究很有价值，因为通过活体动物的荧光成像可测定药物反应性所引起的凋亡水平升高或降低。凋亡水平的升高使得粘附的探针更多，因此荧光强度增加。此外，活体技术避免了从动物上取出细胞和组织的需要，这会进一步诱导凋亡。

来源：https://www.amyjet.com/featured/in-vivo.shtml

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艾美捷ICT 魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒说明书

在体外定量和监测细胞内组织蛋白酶-B活性。本试验中的魔力红底物在被活性组织蛋白酶切割时发出红色荧光。使用荧光显微镜或荧光板读取器分析荧光信号。

血清或细胞外基质中组织蛋白酶活性升高可表示多种病理状况。艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒被研究人员用来定量和监测培养细胞和组织中的组织蛋白酶活性。

该试剂盒检测组织蛋白酶B活性。要使用魔力红，将基质直接添加到细胞培养基中，孵育并分析。因为它是细胞渗透性的，它很容易穿透细胞膜和内部细胞器的膜——不需要裂解或渗透步骤。如果组织蛋白酶是活性的，魔红底物被裂解，甲酰紫荧光团将在激发时变为荧光。随着酶活性的进展和更多魔红底物的裂解，信号将增强，使研究人员能够观察颜色随时间的变化。样品可通过荧光显微镜或荧光板读取器进行分析。试剂盒中包括Hoechst 33342和吖啶橙，分别用于检测核形态和溶酶体细胞器结构。

艾美捷ICT 魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒参数：

试剂名称MR-RR2

靶向组织蛋白酶B

激发/发射592 nm/628 nm

荧光板读数器、荧光显微镜的分析方法

样品类型细胞培养

储存2-8°C

艾美捷ICT 魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒组分：

Kit 937: 25 Tests

Magic Red Substrate (MR-RR2), 1 25 Test Vial, #6133

Hoechst 33342, 1 mL, #639

Acridine Orange, 0.5 mL, #6130

Kit Manual

Kit 938: 100 Tests

Magic Red Substrate (MR-RR2), 1 100 Test Vial, #6134

Hoechst 33342, 1 mL, #639

Acridine Orange, 0.5 mL, #6130

Kit Manual

魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒部分文献参考：

Hao, W;Dian, M;Zhou, Y;Zhong, Q;Pang, W;Li, Z;Zhao, Y;Ma, J;Lin, X;Luo, R;Li, Y;Jia, J;Shen, H;Huang, S;Dai, G;Wang, J;Sun, Y;Xiao, D. Autophagy induction promoted by m6A reader YTHDF3 through translation upregulation of FOXO3 mRNA. Nature communications. 2022 October 4; doi: 10.1038/s41467-022-32963-0. Article

Li, Y;Xu, B;Ren, X;Wang, L;Xu, Y;Zhao, Y;Yang, C;Yuan, C;Li, H;Tong, X;Wang, Y;Du, J. Inhibition of CISD2 promotes ferroptosis through ferritinophagy-mediated ferritin turnover and regulation of p62-Keap1-NRF2 pathway. Cellular & molecular biology letters. 2022 September 30; doi: 10.1186/s11658-022-00383-z. Full Abstract

Iyer, H;Shen, K;Meireles, AM;Talbot, WS. A lysosomal regulatory circuit essential for the development and function of microglia. Science Advances. 2022 September 2; doi: 10.1126/sciadv.abp8321. Abstract

来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-937.shtml

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检测原理丨艾美捷ICT 魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒

组织蛋白酶B (Cathepsin B, CTSB)是一种广泛表达于溶酶体上的半胱氨酸肽链内切酶，属于木瓜蛋白酶家族的成员，广泛存在于从病毒到哺乳动物和人等生物体内。可通过参与细胞凋亡、细胞外基质降解、抗原呈递、炎症反应、细胞自噬等多种病理生理过程从而参与多种疾病的发生和发展。

艾美捷ICT魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒被研究人员用于定量和监测培养细胞和组织中的组织蛋白酶活性。该检测试剂盒检测组织蛋白酶b活性。

艾美捷ICT 魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒原理：

Magic Red魔力红底物，是细胞渗透性的，它很容易穿透细胞膜和内部细胞器的膜——不需要裂解或渗透步骤。如果组织蛋白酶是活性的，魔红底物被裂解，甲酰紫荧光团将在激发时变为荧光（Ex/Em =592nm/628nm）。随着酶活性的进展和更多魔红底物的裂解，信号将增强，使研究人员能够观察颜色随时间的变化。样品可通过荧光显微镜或荧光酶标仪进行分析。试剂盒中包括Hoechst 33342和吖啶橙，分别用于检测核形态和溶酶体细胞器结构。   

艾美捷Magic Red Cathepsin-B Assay Kit 魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒组分：

25T：

l Magic Red Substrate (MR-RR2), 1 25 Test Vial, #6133 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Acridine Orange, 0.5 mL, #6130 l Kit Manual

100T：

l Magic Red Substrate (MR-RR2), 1 100 Test Vial, #6134 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Acridine Orange, 0.5 mL, #6130 l Kit Manual

保存条件：2-8°C 避光保存。

Nature文章鉴赏：

IF=28.2, 《Lysosomal retargeting of Myoferlin mitigates membrane stress to enable pancreatic cancer growth》,Nature Cell Biology

魔力红组织蛋白酶B活性分析试剂盒更多发表文章，列举部分：

1、Hao, W;Dian, M;Zhou, Y;Zhong, Q;Pang, W;Li, Z;Zhao, Y;Ma, J;Lin, X;Luo, R;Li, Y;Jia, J;Shen, H;Huang, S;Dai, G;Wang, J;Sun, Y;Xiao, D. Autophagy induction promoted by m6A reader YTHDF3 through translation upregulation of FOXO3 mRNA. Nature communications. 2022 October 4; doi: 10.1038/s41467-022-32963-0. Article   

2、Li, Y;Xu, B;Ren, X;Wang, L;Xu, Y;Zhao, Y;Yang, C;Yuan, C;Li, H;Tong, X;Wang, Y;Du, J. Inhibition of CISD2 promotes ferroptosis through ferritinophagy-mediated ferritin turnover and regulation of p62-Keap1-NRF2 pathway. Cellular & molecular biology letters. 2022 September 30; doi: 10.1186/s11658-022-00383-z. Full Abstract   

3、Iyer, H;Shen, K;Meireles, AM;Talbot, WS. A lysosomal regulatory circuit essential for the development and function of microglia. Science Advances. 2022 September 2; doi: 10.1126/sciadv.abp8321. Abstract  

来源：https://www.amyjet.com/products/ICT-937.shtml

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艾美捷卵清蛋白(OVA)参数说明及文献参考

艾美捷卵清蛋白(OVA)

类型：EndoGrade®无内毒素卵清蛋白

规格：25 mg

编号：LET0027

冻干，不含盐

内毒素水平：<0.1 EU/mg

EndoGrade®卵清蛋白，100 mg

编号：LET0028

冻干，不含盐

内毒素水平：<0.1 EU/mg

艾美捷卵清蛋白(OVA)特征：

内毒素水平：<0.1 EU/mg

纯度（SDS页）：>98%蛋白质

分子量：~45kDa

来源：鸡蛋清

CAS编号：9006–59–1

形式：冻干

不含盐

同义词：Plakalbumin，Allergen Gal dII

总结：

卵清蛋白是免疫学和变态反应学研究中广泛使用的过敏原模型。市售的卵清蛋白常被内毒素污染，从而导致伪影和不准确的结果。不含内毒素的艾美捷卵清蛋白(OVA)具有优良的质量，保证内毒素水平（LPS）低于0.1 EU/mg。EndoGrade®卵清蛋白由LIONEX GmbH在德国制造。

卵清蛋白(OVA)部分文献应用：

1、Raaijmakers TK, van den Bijgaart RJE, den Brok MH, Wassink M, de Graaf A, Wagenaars JA, Nierkens S, Ansems M, Scheffer GJ, Adema GJ. Tumor ablation plus co-administration of CpG and saponin adjuvants affects IL-1 production and multifunctional T cell numbers in tumor draining lymph nodes. J Immunother Cancer. 2020 May;8(1):e000649. doi: 10.1136/jitc-2020-000649. PubMed PMID: 32461350. PubMed CentralPMCID: PMC7254152. See more on PubMed

2、Kim EH, Woodruff MC, Grigoryan L, Maier B, Lee SH, Mandal P, Cortese M, Natrajan MS, Ravindran R, Ma H, Merad M, Gitlin AD, Mocarski ES, Jacob J, Pulendran B. Squalene emulsion-based vaccine adjuvants stimulate CD8 T cell, but not antibody responses, through a RIPK3-dependent pathway. Elife. 2020 Jun 9;9:e52687. doi: 10.7554/eLife.52687. PubMed PMID: 32515732. PubMed CentralPMCID: PMC7314549. See more on PubMed

来源：https://www.amyjet.com/products/LET0027.shtml

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艾美捷内毒素水平＜0.1 EU/mg的卵清蛋白(OVA)

卵清蛋白（Ovalbumin，OVA）：

蛋清中的主要蛋白质包括卵清蛋白、卵转铁球蛋白、类卵沾蛋白、卵沾蛋白、溶菌酶、球蛋白G2、球蛋白G3等。卵清蛋白等电点4.5，其本质是含磷糖蛋白。卵清蛋白是蛋清中的主要蛋白组分，其结构与性质会显著影响蛋清蛋白在食品加工过程中的功能性质。因此研究卵清蛋白在热处理或美拉德反应后的变化对了解蛋清蛋白在食品加工过程中的结构与性质的变化有重要意义。   

卵清蛋白是一种优质蛋白质，占蛋清蛋白总量的 54%-69%，卵清蛋白是典型的球蛋白，分子量为 44.5k Da，属含磷糖蛋白，含有四个自由巯基、385 个氨基酸残基。这些氨基酸残基相互缠绕折叠形成具有高度二级结构的球型结构，大部分为α-螺旋和β-折叠。卵清蛋白中心有 1 个二硫键和 4 个巯基，当加热时暴露出来，通过分子间相互作用使卵清蛋白胶体结构变得更稳定。  

卵清蛋白（OVA）在免疫学中的及当前市面上OVA的：

OVA是鸡蛋清中的主要蛋白成分，是一种大而复杂的糖蛋白也是免疫学和生物化学研究的重要参考蛋白，能够引起机体适度的免疫性。因此，OVA被作为抗原广泛用于免疫实验中。   

目前市面上的卵清蛋白（OVA）通常含义较高水平的内毒素（脂多糖/LPS），内毒素在炎症反应的第一步的体外试验中可以完全激活内皮细胞。LPS是一种强有力的多效性炎症因子，因此，LPS污染可能会导致免疫实验的研究假阳性结果。药物静脉给药的阈值LPS水平设置为5EU/kg体重。

为了满足基于卵清蛋白（OVA）的体内（如注射、雾化）和体外（如增殖试验）研究的确切要求，艾美捷卵清蛋白(OVA)，特别纯净——EndoGrade 卵清蛋白（OVA），保证内毒素水平（LPS）＜0.1 EU/mg。

艾美捷卵清蛋白(OVA)相关参数： 

来源 鸡蛋蛋白

别称 Plakalbumin、过敏原Gal d 2、Gal d II

制备 以蛋清为原料，经离子交换、结晶、pH值4.6制备而成

纯度（SDS-PAGE） > 98%

内毒素水平 < 0.1 EU/mg

微生物污染 <10 cfu/mg

分子量 ~45kDa

消光系数 0.7 ml mg-1 cm-1

水中最大溶解度 20 mg/m

CAS号： 9006-59-1

产品形式 冻干，无盐

储存条件/保质期 冻干EndoGrade 卵清蛋白在2-8°C条件下储存，直至规定的有效期。如果在-20°C下储存，重组EndoGrade?卵清蛋白可稳定6个月*

艾美捷卵清蛋白(OVA)相关研究：

LET0027 EndoGrade  Ovalbumin，Endotoxin level: < 0.1 EU/mg 25 mg

LET0028 EndoGrade  OvalbuminEndotoxin，level: < 0.1 EU/mg 100 mg

LET0029 EndoGrade  Ovalbumin，Endotoxin level: < 0.1 EU/mg 1000 mg

卵清蛋白(OVA)卵清蛋白(OVA)部分引文赏析：

1、Abdissa K, Ruangkiattikul N, Ahrend W, Nerlich A, Beineke A, Laarmann K, Janze N, Lobermeyer U, Suwandi A, Falk C, Schleicher U, Weiss S, Bogdan C, Goethe R. Relevance of inducible nitric oxide synthase for immune control of Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis infection in mice. Virulence. 2020 Dec;11(1):465-481. doi: 10.1080/21505594.2020.1763055.

2、Malamud M, Carasi P, Assandri MH, Freire T, Lepenies B, Serradell ML?. S-Layer Glycoprotein From Lactobacillus kefiri Exerts Its Immunostimulatory Activity Through Glycan Recognition by Mincle. Front Immunol. 2019 Jun 26;10:1422. doi: 10.3389/fimmu.2019.01422.

来源：https://www.amyjet.com/products/LET0027.shtml