艾美捷 pVectOZ转染质粒的特点和应用介绍

艾美捷 pVectOZ转染质粒的特点和应用介绍

艾美捷OZ Biosciences pVectOZ转染质粒在优化的主链中设计，是所有转染的理想选择。OZ Biosciences提出了五种表达载体，编码最流行的报告基因（CAT，GFP，LacZ，Luciferase，SEAP）

pVectOZ-编码基因：

氯霉素乙酰转移酶 （CAT） – pVectOZ-CAT

绿色荧光蛋白 （GFP） – pVectOZ-GFP

β-半乳糖苷酶 （Lac Z） – pVectOZ-LACZ

荧光素酶 （Luc） – pVectOZ-LUC

分泌的碱性磷酸酶 （SEAP） – pVectOZ-SEAP

转基因表达水平主要取决于启动子、增强子、终止子和质粒骨架。pVectOZ表达盒设计用于在许多哺乳动物细胞和组织中表达转基因产物。该载体已经过修改，以消除影响转基因表达水平的序列，同时优化那些对高表达水平至关重要的序列。最终的表达盒适应哺乳动物细胞中高水平的转基因表达以及大肠杆菌中质粒产生的高产量。所得质粒是体外和体内表达的理想载体。

OZ Biosciences pVectOZ转染质粒#PL00010主要特点：

哺乳动物细胞和组织中最高水平的转基因表达

适用于所有转染应用（体内和体外）

大肠杆菌拷贝数高

不含LPS-内毒素，超螺旋和高度纯化：转染级认证

规格： 25μg 或 100μg

储存： -20°C

运输条件：室温

OZ Biosciences pVectOZ转染质粒的应用：

推荐FOR：对所有转染实验进行阳性控制和优化。

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-PI10100.shtml

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中英文说明丨艾美捷 pVectOZ转染质粒

pVectOZ Transfection Plasmids are engineered in an optimized backbone and are ideal for all transfections. OZ Biosciences proposes five expressions vectors encoding for the most popular reporter genes (CAT, GFP, LacZ, Luciferase, SEAP)

pVectOZ- encoding genes:

Chloramphenicol Acetyltransferase (CAT) – pVectOZ-CAT

Green Fluorescent Protein (GFP) – pVectOZ-GFP

beta-Galactosidase (Lac Z) – pVectOZ-LACZ

Luciferase (Luc) – pVectOZ-LUC

Secreted Alcaline Phosphatase (SEAP) – pVectOZ-SEAP

The transgene expression level depends mainly on the promoter, enhancer, terminator and plasmid backbone. The pVectOZ expression cassette was designed to express transgene product in many mammalian cells and tissues. This vector has been modified to eliminate sequences affecting transgene expression levels while optimizing those critical for the high levels of expression. The final expression cassette accommodates the high levels of transgene expression in mammalian cells as well as high yield of plasmid production in Escherichia coli. The resulting plasmid is the ideal vector for expression in vitro and in vivo.

pVectOZ main features:

Highest levels of transgene expression in mammalian cells and tissues

Suitable for all transfection applications (in vivo & in vitro)

High copy number production in Escherichia coli

LPS-endotoxin free, supercoiled and highly purified: transfection grade approved

Sizes: 25µg or 100µg

Storage: -20°C

Shipping Conditions: Room Temperature

艾美捷OZ Biosciences pVectOZ转染质粒#PL00010在优化的主链中设计，是所有转染的理想选择。OZ Biosciences提出了五种表达载体，编码最流行的报告基因（CAT，GFP，LacZ，Luciferase，SEAP）

pVectOZ-编码基因：

氯霉素乙酰转移酶 （CAT） – pVectOZ-CAT

绿色荧光蛋白 （GFP） – pVectOZ-GFP

β-半乳糖苷酶 （Lac Z） – pVectOZ-LACZ

荧光素酶 （Luc） – pVectOZ-LUC

分泌的碱性磷酸酶 （SEAP） – pVectOZ-SEAP

转基因表达水平主要取决于启动子、增强子、终止子和质粒骨架。pVectOZ表达盒设计用于在许多哺乳动物细胞和组织中表达转基因产物。该载体已经过修改，以消除影响转基因表达水平的序列，同时优化那些对高表达水平至关重要的序列。最终的表达盒适应哺乳动物细胞中高水平的转基因表达以及大肠杆菌中质粒产生的高产量。所得质粒是体外和体内表达的理想载体。

OZ Biosciences pVectOZ转染质粒主要特点：

哺乳动物细胞和组织中最高水平的转基因表达

适用于所有转染应用（体内和体外）

大肠杆菌拷贝数高

不含LPS-内毒素，超螺旋和高度纯化：转染级认证

规格： 25μg 或 100μg

储存： -20°C

运输条件：室温

OZ Biosciences pVectOZ转染质粒的结果：

图1：COS-7细胞中的荧光素酶剂量反应。COS-7使用多量的pVectOZ-LUC和DreamFect™转染试剂进行转染。转染后48h测定荧光素酶活性。

图2：MCF-7细胞中的X-Gal表达。MCF-7使用DreamFect Gold™转染试剂转染0.5μg pVectOZ-LacZ。使用X-Gal染色试剂盒（GX48）在转染后10003h监测β-半乳糖苷酶活性。

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-PI10100.shtml

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艾美捷 体内ViroMag转染试剂的主要优点和应用

艾美捷OZ Biosciences 体内ViroMag转染试剂#IV-VM30250设计用于使用任何病毒载体进行体内靶向转导。病毒/纳米颗粒复合物可以通过各种注射途径轻松给药，例如全身给药（静脉内，动脉内）或局部给药（肿瘤内，脑室内）。

与其他程序相比，体内磁疗™的主要优点：

高和提高转导/感染效率

磁性靶向转导至特定区域

减少病毒剂量和全身传播

在非许可条件下工作（体温过低、生理流动条件）

载体渗透到组织中

毒性极小化

适用于所有类型的病毒

OZ Biosciences 体内ViroMag转染试剂规格：

250 微升

500 微升

储存： +4°C

运输条件：室温

注意：该试剂需要与磁铁。

OZ Biosciences 体内ViroMag转染试剂的应用：

使用慢病毒/逆转录病毒、腺病毒和腺相关病毒 （AAV） 载体进行体内转导。

几种给药途径：

局部给药（肿瘤内，脑室内，腹膜内，肌内，皮下）。

全身给药（静脉内、动脉内）

推荐用于：体内靶向转导

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-IV-VM30250.shtml

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中英文说明丨艾美捷体内ViroMag转染试剂

In vivo ViroMag Transfection Reagent has been designed for in vivo targeted transduction with any viral vector. Virus/nanoparticles complexes can be easily administrated through various injection routes such as systemic administration (intravenous, intra-artery) or local administration (intratumoral, intracerebroventricular).

In vivo Magnetofection™ main advantages in comparison to other procedures:

High and increased transduction / infection efficiency

Magnetically targeted transduction to specific area

Reduction of virus dose and systemic dissemination

Work under non permissive conditions (hypothermia, physiological flow conditions)

Penetration of the vector into tissues

Minimized toxicity

Suitable for all types of viruses

Sizes:

250 µL

500 µL

Storage: +4°C

Shipping Conditions: Room temperature

艾美捷OZ Biosciences 体内ViroMag转染试剂#IV-VM30250设计用于使用任何病毒载体进行体内靶向转导。病毒/纳米颗粒复合物可以通过各种注射途径轻松给药，例如全身给药（静脉内，动脉内）或局部给药（肿瘤内，脑室内）。

与其他程序相比，体内磁疗™的主要优点：

高和提高转导/感染效率

磁性靶向转导至特定区域

减少病毒剂量和全身传播

在非许可条件下工作（体温过低、生理流动条件）

载体渗透到组织中

毒性极小化

适用于所有类型的病毒

OZ Biosciences 体内ViroMag转染试剂规格：

250 微升

500 微升

储存： +4°C

运输条件：室温

注意：该试剂需要与磁铁。

OZ Biosciences 体内ViroMag转染试剂的结果示图：

图1：脑室内注射后体内 ViroMag 靶向病毒载体的高效率。子宫内大鼠胚胎的第三脑室单独注射编码GFP的病毒颗粒或复合到体内ViroMag。没有磁性纳米颗粒（A），病毒转导的细胞位于心室的两侧。使用体内ViroMag（B），由于30s的磁铁应用，转导得到增强并限制在一侧

图2：大鼠胚胎脑感染。侧脑室注射8^10粒GFP-慢病毒颗粒与体内ViroMag偶联到子宫大鼠胚胎（E9）后16天的脑切片显示弥漫性GFP表达（绿色），这是由于神经元的广泛感染（A）。GFP-慢病毒与ViroMag的关联诱导了靶向局部区域，如位于胚胎头骨表面磁铁下的神经元中的GFP表达所示（B）。当磁铁位于大脑边缘时，还观察到更强烈和受限的GFP表达（C），导致病毒颗粒和受感染的神经元在焦点区域积聚。

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-IV-VM30250.shtml

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艾美捷 PolyMag CRISPR试剂盒优化协议

为了找到合适的条件，PolyMag CRISPR须以1µL/µg DNA的比例进行测试。为了DNA数量，建议96-well,每well 0.0625/0125/0.25µg，24-well每孔0.25/0.5/1µg以及在6孔中每孔1/2/4µg。

这些条件可能需要根据你的细胞、DNA、RNA等进行进一步的优化。

艾美捷OZ Biosciences PolyMag CRISPR试剂盒优化协议：

建议您优化转染条件，以充分利用磁转染ä. 可以优化几个参数：

•使用的核酸剂量

•PolyMag CRISPR与核酸的比例

•细胞密度

•培养时间

1.首先优化PolyMag CRISPR/DNA的比例。为此，使用固定数量的DNA。变化PolyMag CRISPR的量为0.25至5m升/mg的DNA。PolyMag CRISPR/DNA的比例可以通过将所使用的试剂的体积加倍或相乘来改变。试剂可以是在去离子水中预先稀释。

2.此后，以固定比例的PolyMag CRISPR/DNA改变核酸剂量之前进行了优化。为此，您可以对预成型的磁矢量复合体。

3.也可以研究每个质粒的化学计量：改变每个质粒的比例整个混合物中的DNA。

4.在确定了正确数量的PolyMag CRISPR和核酸后，您可以通过优化复合体的细胞数量和孵育时间来实现这一过程形成和用于磁场应用。

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-PNC40200.shtml

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艾美捷 优化的Cas9核酸酶特征和相关研究

优化的Cas9核酸酶化脓性链球菌设计用于活细胞或生物体的基因组编辑以及体外消化。使用 Cas9/RNP 递送提高基因组编辑效率 成功的 CRISPR/Cas9 基因组编辑可以通过多种方法（质粒、mRNA、核酸酶、病毒递送）进行。

艾美捷 优化的Cas9核酸酶#CAS9050描述和特征：

Cas9核酸酶来源于化脓性链球菌。包含一个 N 端 His 标签、2 个优化的核定位序列 （NLS） – 1 个 N 端 NLS 和 1 个 C 端 NLS + 1 个真正的靶向序列。

大小： 164.48 kDa

等电点：9.26

浓度：1 毫克/毫升：以 Hepes 10 mM pH 7.5、250 mM 氯化钠、1 mM DTT、50% 甘油提供

100 μg Cas9 核酸酶 = 608 pmol这种 Cas9 核酸内切酶是 CRISPR/Cas9 机制的一部分，该机制起源于细菌，其中它通过 RNA 引导的切割提供针对入侵的外来 DNA 的获得性免疫。

Cas9核酸酶（CRISPR相关蛋白9）是一种RNA引导的核酸内切酶，用于通过产生序列特异性双链断裂（DSB）进行基因组编辑。DNA中DSB的存在导致细胞修复过程的激活，其中DNA恢复通过非同源末端连接（NHEJ）或同源定向重组（HDR）发生，从而改变基因组。基因敲低、缺失或插入说明了CRISPR/Cas9系统的主要成就。

图：用sgRNA编程的Cas9核酸酶。结合后，短向导RNA（sgRNA）特异性靶向短DNA序列标签（PAM）。Cas9核酸酶在PAM序列上游切割DNA三个核苷酸。

优化的Cas9核酸酶相关研究：

Crispr/Cas9基因组编辑

CRISPR Cas9转染试剂

蛋白质输送

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-CAS9050.shtml

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转导增强剂丨艾美捷 Mag 4C保存缓冲液介绍

细胞转导是对多种细胞系进行基因修饰的有力工具细胞、组织和器官。然而，处理病毒可能具有挑战性。OZ生物科学创建专门用于病毒应用的全面试剂系列，可帮助您进行研究。

艾美捷OZ Mag4C保存缓冲液#LVB1000可以添加到病毒原液中以进行长期储存。即使在多次冻融循环后，它也可以保持病毒传染性。根据病毒的不同，有两种不同的缓冲液可用：腺病毒的Ad-Conservation Buffer和慢病毒和逆转录病毒的Lv-Conservation Buffer。

保护缓冲区：

1. 在储存过程中保持病毒传染性

2. 极大限度地减少储存和冻融循环过程中病毒滴度的损失

3.可用于保存与Mag4C磁珠结合的病毒

容量： 1 毫升

储存： +4°C

运输条件：室温

捕获、浓缩和储存病毒：

Mag4C LV（慢病毒）和Mag4C AD（腺病毒）试剂基于磁性病毒浓度技术（磁性纳米颗粒）。

•通过磁捕获将病毒集中在30-45分钟

•80%至99%的病毒捕获和恢复

•减少处理步骤-避免超速离心，降水和化学品

•提高病毒保存能力

可以将Mag4C保护缓冲器（LV和AD）与试剂盒分开。这些缓冲液在储存过程中保持病毒的传染性并将储存期间病毒滴度的损失降至极低冷冻/解冻循环。

转导增强剂：

•极大限度地提高难以转导的慢病毒感染效率细胞。

•极大限度地提高细胞活力：无毒。

•节省精力和金钱：使用

•较低的病毒滴度。

图：转导促进剂的比较CD34+细胞系与慢病毒载体的相互作用

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-LVB1000.shtml

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艾美捷 Pro-DeliverIN转染试剂的结果实例展示

Pro-DeliverIN转染试剂的作用：

Pro-DeliverIN™转染试剂是一种创新的试剂，可在细胞内递送生物活性蛋白。这种基于脂质的配方是第一种将功能蛋白递送到活细胞中的血清相容试剂。细胞内递送的蛋白质保留其生物学功能。

艾美捷OZ Biosciences Pro-DeliverIN转染试剂#PI10100有何特色？

功能活性蛋白的细胞内递送

在许多原代细胞和细胞系中高效

血清兼容

可生物降解，无毒

简单：方案简单明了，即用型（无需化学偶联）

OZ Biosciences Pro-DeliverIN转染试剂的应用：

适用于原代细胞和细胞系

蛋白质输送应用的理想选择：

活细胞中的细胞内定位研究

蛋白质-蛋白质相互作用

烦恼研究

推荐用于：蛋白质的细胞内递送。

OZ Biosciences Pro-DeliverIN转染试剂的结果：

图1：R-藻红蛋白的细胞内递送到各种细胞系中。将1 μ gR-藻红蛋白与2 μL的Pro-DeliverIN™试剂混合。然后将复合物与不同的细胞系在24孔板中孵育。24小时后通过荧光显微镜观察活细胞。

图2：Pro-DeliverIN 提供功能齐全的蛋白质。在15孔板中用3ng活性人半胱天冬酶-5和24 μL的Pro-DeliverIN试剂处理HeLa细胞。作为对照，单独用15ng半胱天冬酶3，单独使用5 μL的Pro-DeliverIN或100nM星形孢菌素（阳性对照）处理细胞。孵育7h后，用膜联蛋白-FITC和碘化丙啶对细胞进行染色。通过细胞荧光法监测凋亡细胞和死细胞。

来源：https://www.amyjet.com/products/OZB-PI10100.shtml