使用参考丨Biogradetech DAB显色试剂盒

使用参考丨Biogradetech DAB显色试剂盒

二氨基联苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是过氧化物酶（POD）的显色底物，DAB显色液主要用于免疫过氧化物酶法，适用于辣根过氧化物酶HRP标记的免疫印记或免疫组化反应。过氧化物酶催化底物发生反应，于反应部位产生棕色沉淀物，免疫印记可直接在膜上显示条带；免疫组化标本显色时间一般为室温5-20分钟，随后在显微镜下观察显色情况，显色充分后应将标本及时脱水封固，其终产物可直接在光镜下观察，也可经OsO4处理后，增加反应产物的电子密度，用于电镜观察。

艾美捷 Biogradetech DAB显色试剂盒：

中文名称：DAB显色试剂盒

英文名字：DAB Substrate Kit (DAB staining)

Biogradetech货号：B-IMWRS51-100T

规格：100T

保存建议：DAB显色试剂盒储存条件：2-8°C避光

本试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色，也可以用于 Western 等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。

DAB显色试剂盒使用参考：

1. 对于组织切片或细胞样品或膜，在与辣根过氧化物酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤 液洗涤3-5次，每次3-5分钟。对于检测内源性辣根过氧化物酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也用适 当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5分钟。

2. 按照1:1的比例将显色液A、B液混匀，混匀后即配制成DAB染色工作液。

3. 后一次洗涤完毕后，去除洗涤液，加入适量DAB染色工作液，确保能充分覆盖样品。

4. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深浅。

5. 去除DAB染色工作液，用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应。

6. 对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，如有必要可以用中性红染色液(neutral red staining solution)染色，以便于观察。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。

注意事项：

DAB 对人体有害，请注意适当防护。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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适用于常规细胞膜标记的PKH26红色荧光细胞链接试剂盒

亲脂性荧光染料PKH67(Green)和PKH26(Red) 适用于常规细胞膜标记。PKH26荧光细胞连接试剂盒采用采用膜标记技术，能够将带有较长脂质尾巴的黄色-橙色荧光染料结合到细胞膜脂质区域上。染色方式依赖于细胞与膜的类型，主要用于细胞体外标记、体外细胞增殖研究及体内外细胞示踪研究。试剂盒中提供染色过程中所需的溶剂（稀释液C），该溶剂可以可以在染色过程中，增加染料溶解度和染色效率，同时维持细胞活力。

标记后的细胞表面会由均一透亮变得有点状凸起或补丁状。但在生理范围内，PKH26荧光不受pH的影响，每个细胞的荧光强度与染料标记位置无关。PKH26荧光在黄色-橙色区域（λex=551nm,λem=567nm），可用来标记追踪体内外多种细胞。在细胞毒性分析，荧光蛋白、抗体或DNA染料在该区域发出的紫色、绿色、红色和远红外等，不会与PKH26产生干扰。

PKH26最常被用于基于染料稀释增殖的分析的染料稀释应用，包括建立抗原特异性前体频谱和正常或肿瘤组织中静止或缓慢干细胞或祖细胞的鉴定。同时PKH26也可用于监测外来病毒、血小板和其他纳米颗粒的摄入；干细胞分裂过程中膜的分配；细胞-细胞之间膜的转移；细胞吞噬作用；抗原呈递；粘附；通过间隙连接的信号传递；以及组织切片中的神经元迁移。PKH26荧光稳定性很强，特别是标记的细胞的研究周期超过一周时PKH26被用于体内细胞追踪研究。

艾美捷 Biogradetech PKH26红色荧光细胞链接试剂盒：

中文名称：PKH26红色荧光细胞链接试剂盒

英文名字：PKH26 Cell Linker Kit

Biogradetech货号：B-CHK104-0.1mL

规格：0.1mL

保存建议：PKH26红色荧光细胞链接试剂盒室温保存

PKH26红色荧光细胞链接试剂盒采用拥有专利的膜标记技术，专利膜标记技术，稳定的与细胞膜脂质区结合并发出红色荧光，染色方式依赖于细胞与膜的类型，主要用于细胞体外标记、体外细胞增殖研究及体内外细胞示示踪研究。

试剂盒中提供染色过程中所需的溶剂(稀释液C),该溶剂可以可以在染色过程中，增加染料溶解度和染色效率，同时维持细胞活力。稀释液C与哺乳动物细胞等渗，且不含去垢剂或有机溶剂，也不含生理盐水和缓冲盐。根据细胞类型及标记后细胞膜内在的变化，标记后的细胞表面会由均一透亮变得有点状凸起或补丁状。但在生理范围内，PKH26荧光不受pH的影响，每个细胞的荧光强度与染料标记位置无关。

https://www.amyjet.com/products/B-CHK104-0.1mL.shtml

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检测原理丨Biogradetech PicaGreen dsDNA定量试剂盒

简介：在分子生物学的试验过程中，PicoGreen dsDNA定量试剂盒是荧光检测双链DNA并进行定量的一种产品，这种方法非常灵敏。常用于分子生物学技术中的：cDNA文库的构建；用于亚克隆的DNA片段纯化及应用，比如进行DNA定量、产物扩增和引物的进一步检测。

PicoGreen定量检测方法简单、方便，被多家生物制品厂所选择，成为生物制品残留DNA检测的标准。目前该方法已纳入2010年版《中国药典》

艾美捷 Biogradetech PicaGreen dsDNA定量试剂盒：

中文名称：PicaGreen dsDNA定量试剂盒*2000次*

英文名字：PicaGreen dsDNA Quantification Kit *2000T*

Biogradetech货号：B-CHK001-1mL

规格：1mL

保存建议：PicaGreen dsDNA定量试剂盒*2000次*储存条件：4°C&室温避光。 稳定性：在适宜条件下可以储存6个月。

PicaGreen dsDNA定量试剂盒*2000次*试剂盒可用于在存在RNA、蛋白质和常见污染物的情况下定量测量样品中的双链DNA。PicaGreen允许对低至低ng/mL的dsDNA进行定量。 试剂盒包含PicaGreen染料、缓冲液和用于测量的DNA标准品。它与荧光计、荧光板读数器、比色杯和微体积荧光计兼容。

PicaGreen dsDNA定量试剂盒检测原理：

PicoGreen与DNA双链结合后才发出的荧光，无DNA不发荧光；所发荧光与DNA浓度成正比。在2010年《中国药典》中提出，PicoGreen定量DNA的方法检出限约0.3ng/ml,

DNA含量在1.25-80ng/mL范围时线性较好(R2>0.99).

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染色步骤丨Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒

Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒Calcein, AM 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Calcein，从而被滞留在细胞内，发出强绿色荧光。

与其它同类试剂（如 BCECF, AM 和 CFDA）相比，Calcein, AM 的细胞毒性很低。Calcein 的激发和发射波长分别为 490 nm 和 515 nm。Calcein, AM 仅对活细胞染色。

作为核染色染料的 PI 不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而产生红色荧光（激发：535nm，发射：617 nm），因此 PI 仅对死细胞染色。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用 545 nm 激发，仅可观察到死细胞。由于不同细胞系的最佳染色条件不同，我们建议个别确定 Calcein, AM 和 PI的合适浓度。

艾美捷 Biogradetech Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒：

中文名称：Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒

英文名字：Calcein-AM/PI, Live/Dead Cell Double Staining Kit

Biogradetech货号：B-CHK103-500T

规格：500T

保存建议：Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒保存：-20℃干燥避光 有效期一年。

图1.Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒染色案例（左图：Calcein-AM染FTC细胞（活细胞单染）中图：PI染HCT116细胞（死细胞单染）右图：Calcein-AM、PI染MHD-1 细胞（活死细胞双染））

Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒染色步骤：

1、 用Trypsin-EDTA消化细胞。

2、 通过离心收集细胞（1,000 rpm，3 min）。

3、 去除上清液，加入PBS（-）制备细胞悬液（105 - 106 cells/ml为宜）。

4、 重复步骤2和步骤3数次以消除培养基中的酯酶活性。

5、 取100 μl 染色工作液与200 μl 细胞悬液混合，在37℃培养15 min。

6、 在490±10 nm激发波长下同时观察黄绿色荧光的活细胞和红色荧光的死细胞。另外用545 nm激发波长单独观察死细胞。

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快速细胞冻存液——配方成分明确、无血清、无蛋白

快速细胞冻存液（无血清/无蛋白）是一种配方成分明确、无血清、无蛋白的适用于绝大部分的哺乳动物细胞的非程序 化冻存即用型细胞冻存液，可排除血清或蛋白潜在的病原体污染或免疫反应风险，使用更安全，无需程序降温，并能够保持多种细 胞的复苏存活率在 95%以上。

艾美捷 Biogradetech 快速细胞冻存液：

中文名称：快速细胞冻存液（无血清/无蛋白）

英文名字：Super Cell Freezing Medium, Serum/Protein-Free, Cryopreservation

Biogradetech货号：D-AKE108-U-100mL

规格：100mL

保存建议：按照推荐的保存条件，有效期最少12个月。

形式：液体溶液

Biogradetech 快速细胞冻存液（无血清/无蛋白）

• 冻存液中含有 DMSO 成分，对于 DMSO 敏感的细胞，建议进行冻存的预试验。

• 在冻存干细胞或原代细胞时，建议事先使用本品对所冻存的细胞进行为期至少 1 周的预试验，确认性能后再进行正式冻存。

• 对于某些特殊或特别珍贵的而又没有保种的新的细胞类型，建议同时使用含有血清的常规冻存液冻存，确认复苏存活率后再使用

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一步法，蛋白胶染色液（考马斯亮蓝）方便快捷，灵敏度高

一步法，蛋白胶染色液（考马斯亮蓝）染蛋白胶最快10 min即可完成样本染色，可检测低至10 ng的蛋白。

一步法，蛋白胶染色液（考马斯亮蓝）采用蛋白凝胶快速染色液(考马斯蓝)对牛血清白蛋白进行染色，上样量分别为Marker、10 ng、20 ng、50 ng、100 ng、200 ng、500 ng、1000 ng、2000 ng、5000 ng、Marker。SuperKine™蛋白凝胶快速染色液(考马斯蓝)无论染色15分钟还是1小时，结果都更清晰、更干净。

艾美捷 Biogradetech 一步法，蛋白胶染色液（考马斯亮蓝）：

中文名称：一步法，蛋白胶染色液（考马斯亮蓝）

英文名字：One Step Protein Gel Staining Solution (Coomassie Blue)

Biogradetech货号：D-AKE105-U-250mL

规格：250mL

保存建议：4℃避光保存12个月。

一步法，蛋白胶染色液（考马斯亮蓝）注意事项：

• 本染色液含挥发性物质，请注意密封以避免失效。

• 使用本染色液时，需自备去离子水及染色用的容器。

• 实验步骤中所述的洗涤、染色时间均适用于0.75-1.5 mm厚的凝胶，对于更厚的凝胶，可依据目的条带的显色效果，适当延长染色时间。

• 本染色液呈酸性，有轻微的腐蚀性，使用时穿戴实验服，戴手套等防护设备操作。

• 残留的杂质会增加染色背景及降低蛋白的分辨率，因此染色之前，需用去离子水充分清洗，以去除杂质。

一步法，蛋白胶染色液（考马斯亮蓝）特色：

方便快捷-不用漂洗，不用加热，不用脱色，不用固定，条带 2 分钟可见。

安全环保-不含任何腐蚀性的强酸（如：磷酸、盐酸、乙酸等），不含任何对人体有害的甲醇和乙醇。

灵敏度高-检测下限 2ng 蛋白。

兼容性好-适用于变性和非变性胶以及质谱分析。

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Biogradetech 假尿苷三磷酸溶液 (100 mM)相关参数说明

简介：

假尿苷（Pseudouridine）于1951年被发现，作为RNA当中第一个被发现的修饰核苷，假尿苷被认为是RNA中的“第五核苷”。Pseudouridine广泛存在于tRNA、mRNA、snRNA、snoRNA当中，在核酸药物当中的应用极为广泛。宾夕法尼亚大学的Karikó研究组发现将尿苷替换为假尿苷可以显著降低体外转录mRNA的免疫原性，提高mRNA的稳定性和表达强度。本产品为无色透明液体，主要应用于寡核苷酸、适配体、表观遗传学或DNA损伤研究、体外转录（IVT）、突变诱导、光交联研究等方向。

艾美捷 Biogradetech 假尿苷三磷酸溶液 (100 mM)：

中文名称：假尿苷三磷酸溶液 (100 mM)

英文名字：Pseudo-UTP, pseudouridine-5’-O-triphosphate (100 mM)

编号：C-BSM1922-200uL

假尿苷三磷酸溶液 (100 mM)详情：

运输：蓝冰 / 干冰运输

纯度：≥98% (HPLC)

盐型：Na+

缓冲液：Tris-HCl

浓度：100 mM±5%

pH：8.0±0.5

可溶性：水

CAS 号：1175-34-4 (free acid)

分子式：C9H15N2O15P3 (free acid)；C9H11N2Na4O15P3 (Sodium salt)

分子量：484.14 g/mol (free acid)；572.07 g/mol (Sodium salt)

储运条件：-20℃

注：原材料及生产过程未引入动物源成分；仅作科研用途。

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甲基假尿苷三磷酸溶液—应用于表观遗传学或DNA损伤研究等方向

甲基假尿苷三磷酸溶液N¹-Methyl-Pseudo-UTP是一种修饰核苷酸，可以通过体外转录方式加入mRNA当中可以降低mRNA的自身免疫原性，同时可以通过增加核糖体结合丰度的方式进一步提高mRNA的表达效率。实验证明N¹-Methyl-Pseudo-UTP与Pseudo-UTP相比可以进一步的提高mRNA在细胞及小鼠体内的表达效率并降低mRNA自身免疫原性。

艾美捷 Biogradetech 甲基假尿苷三磷酸溶液 (100 mM)：

中文名称：甲基假尿苷三磷酸溶液 (100 mM)

英文名字：me1Ψ-UTP, N1-Methyl-Pseudo-UTP (100 mM)

Biogradetech货号：C-BSM1921-100uL

规格：100uL

形式：缓冲液：20 mM Tris-HCl

保存建议：建议保存于-20℃

本品为无色透明液体，主要应用于寡核苷酸适配体、表观遗传学或DNA损伤研究、体外转录（IVT）、突变诱导、光交联研究等方向。

甲基假尿苷三磷酸溶液相关研究：

假尿苷三磷酸溶液 (100 mM)

甲基假尿苷三磷酸溶液 (100 mM)

核糖核苷三磷酸预混液 (25 mM each)

UTP尿苷三磷酸溶液 (100 mM)

GTP鸟苷三磷酸溶液 (100 mM)

CTP胞苷三磷酸溶液 (100 mM)

ATP腺苷三磷酸溶液 (100 mM)

8-羟基-2’-脱氧鸟苷-15N

dATP(100mM)

https://www.amyjet.com/products/C-BSM1921-100uL.shtml