KHB ST-360酶标仪SOP文件

【仪器名称】KHB ST-360酶标仪
【仪器编号】
【制造厂商】上海科华实验系统有限公司
【经销商】上海科华公司 地址：上海市钦州北路1198号84号楼1楼
【联系人】 电话:
【到货时间】**年*月
【安装位置】HIV筛查实验室
【安装日期】**年*月
【安装人】
【启用日期】**年*月
【受培训人员】
【培训时间】**年*月
【仪器管理责任人】
【仪器维修部门】上海科华公司
【维修工程师】 电话：
【仪器使用说明书名称】
KHB ST-360酶标仪用户手册
【仪器使用说明书存放位置】HIV筛查实验室
【仪器作业指导书存放位置】
【仪器手册保管人】

1 目的
规范仪器设备的操作程序，保证酶标仪的正常状态。
2 适用范围
本实验室KHB ST-360酶标仪的操作。
3 操作人员
本实验室实验人员。
4 操作步骤
4.1 开机
将酶标仪后部的开关打开，仪器将显示正在自检，随后显示当前的测量方式和计算方式及“准备就绪…”。在自检过程中，仪器对每一个已装的滤光片选择合适的光强度，等待1分钟预热。
注：仪器显示测量方式和计算方式是在两个页面，须按【↑】【↓】键查看，后续相同。
4.2 将待测板放置于载物台上
4.3 按【↑】【↓】键以选择待测项目的相应程序（每个通道存放的程序已由本室人员根据试剂盒的要求事先输入）。
4.4 按【开始】键进行扫描。
4.5 仪器扫描后，正常情况下屏幕即显示96孔测试结果。显示结果为+、－值时为一页，显示结果为浓度或吸光度值时分二页，须用【↑】【↓】键翻阅查看。
4.6 打开打印机电源，放上A4 纸，打印出测试结果。
4.7 关闭酶标仪及打印机电源。
5 键盘功能
5.1 【打印】：打印屏幕显示结果。
5.2 【功能】：选择仪器功能。
5.3 【测量方式】：选择测量方式。
5.4 【计算方式】：选择计算方式。
5.5 【开始】：开始检测。
5.6 【退出】：从设置功能项或样品测试中退出。
5.7 【清除】：在确认前更正数据。
5.8 【确定】：对输入模式和输入参数确认。
5.9 【↑】：向前查阅模式和参数。
5.10 【↓】：向后查阅模式和参数。
6 编制测试程序
6.1 测量方式
6.1.1 按【测量方式】键，参照屏幕显示按1~6中的任一数字键或按【↑】、【↓】键移动并按【确定】键，选择所需的测量方式。
6.1.2 当选择了测试方式中的某一项后，有相应的参数需要设置。
6.1.2.1 单波长检测
参数设置：波长值和空白方式。
当选择单波长方式后，参照屏幕显示可按A~H中的任一字母键或按【↑】、【↓】并确认所需波长，按【确定】键，再按屏幕显示可按1~4中的任一数字键或按【↑】、【↓】移动并确认，选择空白方式。
（1）当选择多孔试剂空白时，参照屏幕显示可设置A1~H12的任一位置，按【确定】键后在相应位置上出现黑点。用户可设置最多8空白位置，当设置完相应的空白位置后，按【确定】键退出。注：仪器始终保持前一次所选状态，开始选择后，仪器会自动重新刷新，按【清除】键可恢复上一次的空白设置。
（2）当选择列空白时，参照屏幕显示可选择1~12的任一数字键，按【确定】键后，则在相应列上出现一列黑点。列空白即为每行采用各自不同的空白。
（3）当选择行空白时，参照屏幕显示可选择任一字母键，按【确定】键后，可在相应行上出现一行黑点。行空白即为每行采用各自不同的空白。
6.1.2.2 双波长检测
参数设置：第一波长值和第二波长值、空白方式。
选择双波长时，参照屏幕显示可选择A~H中的任一字母键或按【↑】、【↓】键选择第一/第二波长后，按【确定】键，再进行空白方式选择。其空白方式同单波长空白方式设置。
6.1.2.3 双时法检测
参数设置：波长、空白方式、间歇时间，其中波长及空白方式设置同上。
当设置完空白方式，参照屏幕显示可按相应数字键依次输入时、分、秒。注：最短间歇时间为5秒。
6.1.2.4 动力学法检测
参数设置：波长、空白方式、间歇时间、延迟时间、全部时间，其参数设置同上。注：最短间歇时间为5秒，全部时间必须大于间歇时间与延迟时间之和。
6.1.2.5 多波长检测
相应参数为第一列波长、……、第十二列波长及空白选择，设置方法同上。
6.2 计算方式
仪器的计算方式有九种，当选择了计算方式中的某一项后，有相应的参数需要选择和设置。
6.2.1 吸光度法：结果以吸光度形式输出，无需参数设置。
6.2.2 因子计算法：测出的吸光度值和用户给出的因子相乘得出浓度，浓度单位由因子单位确定。浓度根据以下公式计算：
浓度 = 因子 × 吸光度
参数设置：因子。
6.2.3 标准浓度法：用户输入标准品浓度，酶标仪通过这些标准品，用所选公式拟合成曲线，通过标准曲线，可将测量得出的吸光度换算成浓度。
参数设置：拟合公式及相应系数和标准品的序号、位置、浓度。
6.2.4 标准曲线法：用户输入所选拟合曲线的A、B、C、D值来确定标准曲线，酶标仪用该曲线方程来计算浓度。
参数设置：拟合曲线及相应拟合曲线系数。
6.2.5 单限检测法：仪器测出的吸光度与用户定义的或按公式计算出的一个极限值比较，如果低于极限值，会出现负号“－”。相反，会出现正号“﹢”。如果极限值为负，出现结果相反。
参数设置：极限值、系数A、B、C及阴阳性。
6.2.6 双限检测法：仪器测出的吸光度与用户定义的两个限值比较。如结果低于两个限值，会出现负号“－”；如结果在两个限值之间，出现“0”；如结果高于两个限值，会出现正号“﹢”。
参数设置：低极限值、高极限值。注：低限值必须小于高限值。
6.2.7 等级检测法：用户定义的数值被分成10个部分，10个部分编号为0~9。测出的吸光度值根据它所在的部分以0~9中的编号反映出来。
参数设置：等级范围值。
6.2.8 列减法：第二列结果减去第一列结果，第四列结果减去第三列结果，或反之。
参数设置：列减方法。
6.2.9 两点法：用户输入标准品浓度，仪器通过标准品计算出点到点的标准曲线。通过这一曲线，将测得的吸光度值转换成浓度。
参数设置：标准品的序号、位置及浓度，设置方法与标准浓度法相同，只是拟合时点到点之间为一条直线。
6.3 功能设置
6.3.1 样品盘运动方式
用户可按A~D中任一字母键或按【↑】、【↓】键选择样品盘运动方式并按【确定】键确认。
6.3.2 结果输出处理
屏幕中，A、B为对应项，C、D为对应项，E、F为对应项，用户只能选择对应项中的某一项。
6.3.3 每盘标准处理
用户可按A、B选择或按【↑】、【↓】键选择每盘标准处理方式，并按【确定】键确认。注：只对计算方式3、9有效。
6.3.4 存储当前内容
用户可按A、B选择存储程序还是结果，按1~50选择存储的号码。仪器共可存储50个程序设置和50次测量结果。
6.3.5 调用已存内容
可按A、B及1~50调出上面一步（存储当前内容）中存储的内容。
6.3.6 打印已存内容
6.3.7 滤光片设置
输入要更改的位置和波长。建议：用户不可随意修改该项设置。
6.3.8 时钟设置
按A、B、C、D、E键选择进行相应设置。
6.3.9 恢复默认值
7 校正程序
7.1 滤光片波长精度检查
将不同波长的滤光片从酶标仪上卸下，用UV-2201型紫外-可见分光光度计（波长精度±0.3nm）于可见光区对每个滤光片进行扫描，其检测值与标定值之差为滤光片波长精度。一般酶标仪无585nm滤光片，可选用550nm或630nm滤光片。450nm 滤光片的检定选用普鲁兰溶液（校正波长为630nm）。
7.2 通道差与孔间差检测
通道差检测是取一只酶标板小孔杯（杯底须光滑，透明，无污染以酶标板架作载体， 将其（内含200ul甲基橙溶液吸光度调至0.500A左右）置于8个通道的相应位置，蒸溜水调零，于490nm处连续测三次,观察其不同通道的检测器测量结果的一致性，可用极差值来表示。孔间差的测量是选择同一厂家，同一批号
酶标2板条（8条共96孔）分别加入200ul甲基橙溶液（吸光度调至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸溜水调零,于490nm处检测，其误差大小用±1.96s衡量。
7.3 零点飘移（稳定性观察）
取8只小孔杯分别置于8个通道的相应位置，均加入200ul蒸馏水并调零，于490nm处每隔30分钟测一次，观察各个通道4小时内吸光度的变化。
7.4 精密度评价
每个通道3只小杯分别加入200ul高中低3种不同浓度的甲基橙溶解，蒸馏水调零，于490nm作双份平行测定，每日测二次（上下午各一次），连续测定20天。分别计算其批内精密度，日内批精密度,日间精密度和总精密度及相应的CV值。
7.5 线性测定
用电子天平精确称取甲基橙配制5个系列的溶液，于490nm平行测8次，取其均值。计算其回归方程，相关系数及标准估计误差s，并用±1.96s表示样品测量的误差范围.双波长测定评价：取一分甲基橙溶液，分别加入3种不同浓度的溶血液（测定波长为490nm，校正波长为585nm），先后于8个通道检测，每个通道测3次，比较各组之间是否具有统计学差异，以考察双波长消除干扰组分的效果。
8 自校规范
8.1 测定原理：根据样品OD值计算样品中抗原或抗体的浓度。
8.2 校准条件：仪器正常工作需要以下环境：温度18~25℃，湿度45~85%RH，电压220V。
8.3 质控品：选择卫生部质控血清或公认质量好的质控品严格按照操作说明进行质量控制。
8.4 校准方法：每日测定HBsAg质控品，月底计算CV值。
8.5 校准步骤
8.5.1 按照操作说明进行校准测定。
8.5.2 RCV值的测定，在日常工作条件下规范操作，每一个质控项目连续测定20天。
8.5.3 对检测结果进行统计学处理，计算出靶值、标准差(SD)、变异系数(CV)。
8.5.4 用RCV的测定结果建立室内质控，判断标准以《临床检验管理与技术规程》为准。
9 维护保养程序
9.1 保养
9.1.1 为保证仪器持续的稳定性和准确性，应干扰光学系统的任何部件。光路的调校错误会影响测量结果。
9.1.2 保持光学系统的清洁，以确保正常功能和结果的准确，应避免任何液体流入仪器内部，并防尘、防止其它外源性物质，不要用手指摸透镜表面、滤光镜、光电检测器。
9.2 仪器常规清洁
9.2.1 关掉仪器，并拔掉电源插头。
9.2.2 使用一次性手套，用一次性擦布沾水或温和去污剂，清洁仪器外部、导轨和板架。
9.3 清洁光学系统：详见仪器使用说明书。
9.4 消毒方法：在使用危险性的传染性物质后，用以下方法消毒仪器
9.4.1 关掉仪器，并拉掉电源插头。
9.4.2 使用一次性手套，用一次性擦布沾70%乙醇，清洁仪器外部、轨道和板架。
9.4.3 仪器内部消毒，详见仪器使用说明书。
10 配套中文电脑操作
10.1 打开电脑主机及显示器。
10.2 双击进入酶免疫管理系统。
10.3 在“病人资料”菜单确认今日值班。
10.4 在“病人资料”菜单中输入当日化验单的病人资料。
10.5 在“检验报告单”菜单中检查，修改及打印报告单。
10.6 在“酶免疫管理系统”单击进入“中文转换”系统。
10.7 给当日的标本排列及编号。
10.8 根据项目接收酶标仪传送的数据。
10.9 退出“中文转换”及“酶免疫管理”系统。
10.10 单击“开始”选择“关闭系统”等待出现可以安全关机时，关掉主机及显示器。
11 职责
11.1 实验室工作人员应该严格按照本SOP进行操作。
11.2 本SOP的改动，可由任一使用本仪器的工作人员提出，并报经本实验室负责人、科主任签字批准方可通过。