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ChromoTek品牌pulldown mNeonGreen融合蛋白的优越性能

苏州达麦迪生物医学科技有限公司2017年7月10日 16:17 点击:980

 mNeonGreen-Trap用于免疫共沉淀反应

  pulldown mNeonGreen融合蛋白的优越性能

  ·对于下游应用无重轻链污染

  ·强力洗涤条件下,依旧能牢牢结合

  ·孵化时间短至30min

  mNeonGreen-Trap

  ChromoTek mNeonGreen-Trap 经过验证,对于细胞或组织中提取的mNeonGreen融合蛋白及其相互作用物的快速、有效一步法免疫沉淀,是一种卓越的工具。mNeonGreen-Trap包含了一个羊驼单域抗体偶联至琼脂糖珠或磁性琼脂糖珠。

  

图1.jpg


  I input , FT: Flow-through, B: Bound. Coomassie gel and Western blot. Western blot indicates high effectiveness of pull-down

  应用

  ·免疫沉淀(IP)/免疫共沉淀(Co-IP)

  ·质谱分析

  ·酶活性检测

  ·CHIP/RIP分析

  强大而稳定的结合能力

  ·高亲和力,最低能与解离常数为2nM结合

  ·能承受的清洗条件:6M urea, 2M NaCl, 10mM DTT, 2% Nonidet P40 Substitute, 1% Triton X-100, 0.2% SDS

  特性

  ·mNeonGreen-Trap识别的抗原决定基团与anti-mNeonGreen 鼠多抗不同

  ·高结合能力,每10μl悬浊液中加入12μg mNeonGreen

  ·便捷——有琼脂糖珠与磁性琼脂糖珠可供选择

  技术

  骆驼科,比如羊驼,具有一种重链抗体。这些重链抗体缺乏轻链抗体,并通过单结构域(VHH)结合至抗原,这个单结构域也被称为nanobody。这些VHH结构域具有出色的结合特性并能保证批次间的稳定性。

  

图2.jpg


  anti-mNeonGreen IgG 抗体

  mNeonGreen的免疫荧光(IF), 免疫印迹(Western Blot)以及ELISA实验

  敏感性:检测低表达的蛋白

  经确认的特异性鼠多抗

  anti-mNeonGreen IgG antibody 32F6

  ChromoTek品牌的anti-mNeonGreen antibody 32F6是经过验证的,能在Western Blot及免疫荧光实验中敏感检测出mNeonGreen融合蛋白的卓越工具。anti-mNeonGreen antibody是一种纯化的mouse monoclonal IgG2a。

  特性

  与mNeonGreen-Trap的antimNeonGreen VHH识别的抗原不同。

  高特异性与亲和力,最低能与解离常数为3.5nM结合

  免疫荧光(IF)

  

图3.jpg


  Immunostaining of Hela cells transiently expressing mNeonGreen fused to Actin Chromobody (green) with 32F6 antibodies (red). Merge image shows overlay of green and red channels and DAPI (blue). Scale bar, 10μm.

  Western Blot (WB)

  

图4.jpg


  Western blot analysis of cell extract from HEK293T cells transiently expressing mNeonGreen-beta-Actin (68.7 kDa).

  ELISA

  

图5.jpg


  HRP signal is detected as normalized absorption in presence (+, strong signal) and absence (-, faint signal) of anti-mNeonGreen VHH. Result shows the applicability of this antibody pair for ELISA measurements.


(来源: 苏州达麦迪生物医学科技有限公司


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