特级新生牛血清(无菌过滤) 100ml
- 上海笃玛生物科技有限公司2024年4月1日 1:50 点击:302
特级新生牛血清(无菌过滤) 100ml
血清是基础培养基中极为重要的细胞生长和粘附因子、激素、脂质和矿物质来源。此外,血清还可调节细胞膜通透性,并可作为向细胞内运送脂质、酶、微量营养素和微量元素的载体。牛血清是细胞培养中用量天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。
适用细胞
多种肿瘤原代和293、293T、CHO、SF9、Vero、Hela细胞系,各种肿瘤细胞等
保存条件
1. -20℃,五年
2. 4ºC保存通常不宜超过1个月
血清的主要成分
血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:
一:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;
二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;
三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一
特级新生牛血清(无菌过滤) 100ml
热灭活
一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
有必要做热灭活吗?
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
注意事项
1. 融化方法:建议将血清从-20℃冰箱取出后,于2-8℃解冻过夜,并在此过程中不时轻轻摇动使之溶解均匀。
2. 不宜 4℃甚至温度长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存。血清结冰时体积会增加约10%,因此在分装血清时须预留一定体积,否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。
3. 解冻后未开封前若发现有絮状沉淀,属正常现象,主要是解冻后血清中纤维蛋白及脂蛋白变性造成的,不影响使用。可以通过3500rpm离心5分钟去除,但不宜过滤去除,因为絮状物可能阻塞滤膜。
4. 本产品未经灭活处理,使用时请视实验情况进行处理,灭活条件为56℃,30min。除非必须,一般不建议对血清进行热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多。
胎牛血清是通过无菌手术剖腹后取胎,穿刺心脏采血制成。胎牛血清中所含的对培养细胞有害的成分(抗体等),故质量。本产品以健康胎牛血液为原料加工而成,不添加任何外源因子,不含激素等。经0.65μm、0.22 μm微孔滤膜预过滤,3次0.1μm微孔滤膜精过滤后,获得成品胎牛血清。本产品无支原体、无细菌、无噬菌体、BVDV病毒等污染,内毒素水平极低。
特级新生牛血清(无菌过滤) 100ml
鉴别方法
血清
血液凝固析出的淡黄色透明液体 。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。
血浆
血浆是血液的液体成分,血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆,约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水(体积的90%),其中溶解的物质主要是血浆蛋白,还包括葡萄糖、无机盐离子、激素以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞,同时也是运输分泌产物的主要媒介。
将新鲜血液离心,使血细胞沉降,上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。
牛血清是细胞培养中用量较大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成分,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。牛血清的用途,它的作用体现在:
1、提供维持细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2、提供结合蛋白,能识别并结合维生素、脂类、金属和其他激素等,能调节它们所结合物质的活力。
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5、>起酸碱度缓冲液作用。
6、提供蛋白酶抑制剂,细胞传代时能使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
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