高荧光强度和低荧光强度SPHEROTM荧光微球解决方案

高荧光强度和低荧光强度SPHEROTM荧光微球解决方案

聚苯乙烯荧光微球在生物医学领域有着越来越广泛的应用,其中的一项重要应用是基于荧光微球的流式细胞分析技术,该技术可广泛用于细胞分选,定量,免疫分析及快速诊断.该技术采用两种粒子:荧光标准校正微球用于仪器的校正及定量研究,荧光编码微球用于高通量免疫分析,而这两种粒子都要求荧光强度高,精确定量染色，单分散性好。

艾美捷SPHERO 荧光微球 能够携带许多荧光分子，较弱的刺激就可以引发较强的信号，所以只需要少量的低能辐射就能产生荧光信号，避免了使用传统的放射性微球造成的辐射危险，并在不损失检测灵敏度的前提下降低了成本。因此在众多领域都具有广泛的应用，如生物化学、生物医药、临床医学、基因分析以及光学仪器等，荧光微球在医药、生物方面的应用尤为重要。

Spherotech荧光微球包括SPHEROTM聚苯乙烯荧光微球、高荧光强度和低荧光强度的微球、荧光PMMA微球、多重荧光基团的微球和FITC标记的微球(可用于流式细胞仪的校准及不同的流式细胞数据的归一化)。

Spherotech荧光微球的应用：

①在标记和示踪方面的应用

通过在聚合物微球表面或内部引入一种或多种荧光物质制备的荧光微球,可应用到细胞标记、生物分子标记及在活性条件下的示踪,也可固定蛋白质分子等,并跟踪其功能化过程。

②在检测方面的应用

将表面带有能与被检测物结合的配体的荧光微球与放射标记的被检测物相混合,体系中能与微球结合的被检测物,其放射能激发荧光物质产生荧光,而不能与微球结合的被检测物,其放射能在水中淹灭,不能激发荧光,从而可以对被检测物进行检测。此外，荧光微球能够携带许多荧光分子,较弱的刺激就可以引发较强的信号,所以只需要少量的低能辐射就能产生荧光信号,避免了使用传统的放射性微球造成的辐射危险,并在不损失检测灵敏度的前提下降低了成本。

③在免疫分析、药物筛选方面的应用

1）荧光微球由于其可作为诊断试剂而应用于免疫分析。

荧光微球作为不同检测对象的固定化载体应用于生物样品检测中,不同荧光微球对应不同的捕获抗体,识别不同的抗原,从而实现多种待测抗原定性及定量检测。

2）荧光微球表面连接可与待测物结合的受体,将待测物(配体)进行放射性同位素标记,两者混合后,能与微球结合的待测物的放射性能激发荧光物质产生荧光,而不能与微球结合的待测物,由于距离微球较远,则不能激发荧光物质产生荧光,从而达到了筛选的目的。高通量药物筛选(HTS)是使用机器人和自动化系统,从大量的样本中鉴别出对确定的分子靶标有相互作用的少量活性化合物的一种现代药物筛选技术。荧光微球的发展促进了HTS的开发与发展。

④在固定化酶，基因研究方面的应用

1）酶可以通过物理吸附或化学键合方式固定在荧光微球上,由于酶的立体形态被固定,使其不但具有较高的pH稳定性、热稳定性和贮存稳定性,而且易与反应物分离，可以重复使用,提高使用效率。因此,在微球载体上固定化酶或其它生物活性物质, 更有利于其功能的发挥。

2）纳米级荧光微球的尺寸与生物分子如核苷酸、蛋白质等尺度相当,表面连接或包埋大量荧光分子聚合物。将此类微球连接在核苷酸链上,便可替代传统芯片杂交荧光标记技术,实现荧光信号的放大,从而大大降低了基因芯片的成本。

⑤在标准物和生物探针方面的应用

1）荧光微球在细胞流式记数测定方面有很重要的应用 ,如用做测定的标准物以及用来校准细胞流式记数仪。

2）制备含有Cd Te量子点的聚苯乙烯微球,其表面吸附兔的免疫球蛋白后，可以作为蛋白质灵敏检测探针,且这种生物功能性标记的量子点微球具有简单、快速和实用性强等优点。

https://www.amyjet.com/brand/SPHERO-fluorescent-microspheres.shtml

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Advanced BioMatrix 鼠尾胶原蛋白溶液，I 型，(2D 细胞培养)的无菌操作要点

Advanced BioMatrix提供RatCol®胶原溶液，其高度纯化的尾端胶原浓度约为4 mg/mL，pH值为3-4，并经过无菌过滤。RatCol®约占97%的胶原为Ⅰ型胶原，其余为Ⅲ型胶原。RatCol®胶原的纯度≥99%。SDS-PAGE电泳显示胶原的典型α、β和γ条带模式。实际的胶原浓度会印在产品标签和每个特定批次的分析证书上。RatCol®是通过酸提取工艺从0.2M醋酸缓冲液中提取得到的保留有无肽胶原。胶原链的两端，即N-末端和C-末端的前肽区域，被保留。

Ⅰ型胶原是皮肤、骨骼、肌腱和其他纤维结缔组织的主要结构成分，与其他胶原蛋白不同之处在于其赖氨酸羟基化和低碳水化合物含量较低。虽然已经鉴定出多种类型的胶原蛋白，但它们都由三肽链分子组成，呈三螺旋构象。主要结构（氨基酸序列）中的细微差异确定了不同类型之间的差异。主要结构的氨基酸序列主要是以甘氨酸为每三个位置的重复基序，丙氨酸或4-羟基脯氨酸经常位于甘氨酸残基之前。Ⅰ型胶原是由两个α1(I)链和一个α2(I)链组成的异源三聚体，在中性pH和37°C下自发形成三螺旋支架。

多细胞生物中的细胞生长、分化和凋亡的控制依赖于细胞与细胞外基质（ECM）的粘附。鉴于Ⅰ型胶原是ECM的丰富组分，细胞在三维胶原凝胶中培养比传统的二维系统更好地模拟体内细胞环境。这已经在多种细胞类型中得到证实，包括心脏和角膜成纤维细胞、肝星状细胞（HSCs）和神经母细胞瘤细胞。一些疾病可以影响ECM的力学特性，而其他疾病状态可能是由于ECM的密度或刚度变化引起的。由于Ⅰ型胶原是ECM张力特性的关键决定因素，三维胶原凝胶在机械传导和细胞信号转导的研究中非常有用，涉及将机械信号转化为生化信号的过程。

不同的胶原亚型被一组结构和功能多样的细胞表面受体所识别，这些受体识别胶原三螺旋。比较耳闻能详的是胶原受体是整合素α1β1和α2β1。α1β1是平滑肌细胞上的主要整合素，而α2β1是上皮细胞和血小板上的主要形式。这两种形式在包括成纤维细胞、内皮细胞、成骨细胞、软骨细胞和淋巴细胞在内的许多细胞类型上表达。某些细胞类型还可能表达其他胶原受体，如糖蛋白VI（GPVI），它在血小板中介导粘附和信号传导。其他胶原受体包括圆盘结构域受体、白细胞相关的免疫球蛋白样受体1以及曼诺糖受体家族的成员。这个产品是从大鼠尾腱中提取的胶原制备而成，并含有高单体含量。起始材料来自管理的Sprague Dawley大鼠群体，并使用符合cGMP的制造工艺进行纯化。该过程包含内置的、经过验证的步骤，以确保可能存在的朊病毒和/或病毒污染物的灭活。该产品非常适用于涂覆表面，提供用于培养细胞的薄层制备。

艾美捷Advanced BioMatrix 鼠尾胶原蛋白溶液，I 型，4 mg/ml，20 mL（2D 细胞培养）（ABM-5056-20ML）：

储存/稳定性：该产品存放在2-10°C，并在冷冻凝胶包装中运输。请勿冷冻。产品标签和每个特定批次的分析证书上列有到期日期。当产品按照指示处理和储存时，到期日期有效。

涂层操作步骤：

注意：在制备和处理胶原和其他溶液的过程中，采用无菌操作以保持产品的无菌性。

1. 将所需体积的胶原溶液从瓶中转移到稀释容器中（如果需要）。使用无菌的0.1%醋酸溶液进一步稀释至所需浓度。典型的工作浓度范围为50至100 μg/ml。

注意：使用这些建议作为指导，确定您的培养系统的最佳涂层条件。

2. 将适量稀释后的Rat Tail胶原加入培养表面。

3. 在室温或37°C下，盖上，孵育1-2小时。

4. 孵育结束后，吸去任何剩余物质。

5. 用无菌培养基或PBS仔细冲洗涂层表面，避免划伤表面。

6. 涂层表面已准备好使用。如果保持无菌性，也可以湿润或风干后存放在2-8°C。

仅用于科研，不可用于临床诊断。

美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者，在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。

https://www.amyjet.com/products/ABM-5056-20ML.shtml

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Advanced BioMatrix 聚-L-鸟氨酸，溶液在细胞培养中的应用

聚-L-鸟氨酸是一种合成的氨基酸链，带有正电荷，广泛用作涂层，增强细胞与塑料器皿和玻璃表面的附着和粘附。聚-L-鸟氨酸的分子量可以有很大差异，较低分子量（30,000 Da）的粘度较低，而较高分子量（>300,000 Da）的每个分子具有更多的结合位点。该产品的分子量范围为70,000至150,000 Da，提供易于操作的溶液粘度，同时提供足够的细胞附着结合位点。聚-L-鸟氨酸以50毫升包装规格提供，浓度为0.1毫克/毫升。该产品经过无菌过滤，稀释后即可使用。

艾美捷Advanced BioMatrix 聚-L-鸟氨酸，溶液，0.1 mg/mL，50 mL(ABM-5058-50ML)应用：

聚-L-鸟氨酸用于涂覆组织培养塑料器皿，增强细胞的附着和粘附。涂层表面通常可以改善在减少或无血清条件下的细胞附着。对于不同的细胞类型，细胞附着和培养的最佳浓度可能有所不同。可能需要进行一些实验来确定适用于个别细胞培养系统的最佳条件。典型的工作浓度为0.1毫克/毫升。供应的聚-L-鸟氨酸不适用于人类使用。

特性：

分子量：70,000 - 150,000 Da

数量：每个容器中的聚-L-鸟氨酸数量为50毫升。

浓度：聚-L-鸟氨酸的浓度为0.1毫克/毫升。

无菌处理：聚-L-鸟氨酸溶液已经进行了无菌过滤。

储存：建议将聚-L-鸟氨酸储存于2至10°C。

注意事项：

处理聚-L-鸟氨酸时，请遵循常规的实验室安全操作。

Advanced BioMatrix 聚-L-鸟氨酸，溶液，0.1 mg/mL，50 mL使用说明：

按照以下建议作为指导，确定适合您的培养系统的最佳涂层条件。为了保持无菌性，请在层流罩中进行所有操作。

1. 典型的工作浓度为0.1毫克/毫升。如果需要不同的浓度，从瓶中转移所需体积的溶液到稀释容器中。用组织培养级别的水或PBS稀释至所需浓度。

2. 向培养表面添加适量的稀释物。通常使用每25平方厘米1毫升。轻轻晃动以确保培养表面均匀涂层。

选项A：

3. 在室温下孵育60分钟，用抽液法去除多余溶液。

4. 用组织培养级别的水彻底冲洗表面，并抽去冲洗水。

5. 在室温或37°C下，有盖子地干燥孵育至少2小时。涂层的培养器皿可以在2至10°C下储存1周。

前往第9步

选项B：

6. 在室温下孵育过夜，用抽液法去除多余溶液。

7. 用组织培养级别的水彻底冲洗表面，并抽去冲洗水。

8. 在室温或37°C下，有盖子地干燥孵育至少2小时。涂层的培养器皿可以在2至10°C下储存1周。

9. 将培养基和细胞引入培养表面。

10. 将剩余的聚-L-鸟氨酸储存在2至10°C。

仅用于科研，不可用于临床诊断。

美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者，在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。

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Advanced BioMatrix 96孔板，PureCol胶原蛋白涂层在细胞实验中的应用

具有平底的 PureCol® 胶原蛋白包被的 96 孔板可在透明聚苯乙烯表面上均匀一致地应用高质量的 I 型胶原蛋白。板与所有常见的分配器、阅读器和清洗器兼容。板经过无菌处理，无气原。每个套筒有 5 个板的数量。在接种细胞之前，需要用 1X 培养基或 PBS 冲洗板。

艾美捷Advanced BioMatrix 96孔板，PureCol 胶原蛋白涂层(ABM-5072-5EA)：

参数、测试和方法 PureCol® 包被 96 多孔板 #5072

灭菌方法 无菌加工

大小 96-多孔板

使用的胶原蛋白 PureCol® I 型

储存温度 2-30°摄氏度

每个包裹的数量      5 盘子

保质期 自收到之日起至少 6 个月

烧瓶聚合物 聚苯乙烯

包衣前处理的 Tisue 培养物 是的

每口井的生长面积 0.35 厘米2

每孔标称体积 320 毫升

每孔典型工作体积 50-200 毫升

Advanced BioMatrix 96孔板，PureCol 胶原蛋白涂层部分文献参考：

Because PureCol® has been cited in over 2000 publications, we have only posted a few below:

Sorensen, Jacob R., et al. "An altered response in macrophage phenotype following damage in aged human skeletal muscle: implications for skeletal muscle repair." The FASEB Journal (2019): fj-201900519R.

Sorensen, Jacob R., et al. "An altered response in macrophage phenotype following damage in aged human skeletal muscle: implications for skeletal muscle repair." The FASEB Journal (2019): fj-201900519R.

Colaço, E., et al. "Hierarchical Collagen-Hydroxyapatite Nanostructures Designed Through Layer-by-Layer Assembly of Crystal-Decorated Fibrils." J., Hierarchical Collagen-Hydroxyapatite Nanostructures Designed Through Layer-by-Layer Assembly of Crystal-Decorated Fibrils (May 13, 2019)(2019).

美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者，在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。

https://www.amyjet.com/products/ABM-5072-5EA.shtml

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Advanced BioMatrix--6孔板，PureCol胶原蛋白涂层方案及结果分析

这些 6 孔板涂有 PureCol® 胶原蛋白，这是胶原蛋白产品纯度（>99.9% 胶原蛋白含量）、一致性和可重复性的标准。胶原蛋白包被板非常适合细胞培养和各种细胞测定。

PureCol 胶原蛋白涂层 6 孔平底板在透明聚苯乙烯表面上均匀一致地应用了高质量 I 型胶原蛋白。板可与所有常见的分配器、读取器和清洗器兼容使用。板经过无菌处理且无热原。每个套筒可提供 5 个板的数量。

艾美捷Advanced BioMatrix-- 6孔板，PureCol 胶原蛋白涂层(ABM-5073-5EA)：

参数、测试和方法 PureCol® 包被的 6 孔板 #5073

灭菌方法 无菌加工

大小 6 多孔板

使用的胶原蛋白 PureCol® I 型

储存温度 2-30°摄氏度

每个包裹的数量   5 盘子

盖子 防冷凝环

井圈    是的

保质期 自收到之日起至少 6 个月

板聚合物 聚苯乙烯

包衣前处理的 Tisue 培养物 是的

每口井的生长面积 9.5 厘米2

每孔标称体积 15.5毫升

每孔典型工作体积 2.0-3.5毫升

Advanced BioMatrix -- 6孔板，PureCol 胶原蛋白涂层部分文献参考：

Schwerdtfeger, Luke A., et al. "Human colon function ex vivo: Dependence on oxygen and sensitivity to antibiotic." PloS one14.5 (2019): e0217170.

Cardoso, Ana, et al. "MiR-144 overexpression as a promising therapeutic strategy to overcome glioblastoma cell invasiveness and resistance to chemotherapy." Human molecular genetics (2019).

Steele, Hannah E., et al. "Mechanotransduction of mitochondrial AMPK and its distinct role in flow-induced breast cancer cell migration." Biochemical and biophysical research communications 514.2 (2019): 524-529.

Gehwolf, Renate, et al. "Global Responses of Il-1β-Primed 3D Tendon Constructs to Treatment with Pulsed Electromagnetic Fields." Cells 8.5 (2019): 399.

Alexander, Frank, Sebastian Eggert, and Dorielle Price. "Label-Free Monitoring of 3D Tissue Models via Electrical Impedance Spectroscopy." (2019): 1-24.

美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者，在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。

https://www.amyjet.com/products/ABM-5073-5EA.shtml

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Advanced BioMatrix--磷酸盐缓冲盐水 (PBS)，10X，100 mL的选择指南

磷酸盐缓冲盐水（PBS）是一种常用的缓冲液，在生物科学研究和实验室应用中广泛使用。它由磷酸盐和盐组成，具有稳定的pH值和离子浓度，适用于许多生物学实验的各个方面。

PBS的主要作用是维持溶液的稳定性，使其具有理想的生化特性。它可以用于洗涤和稀释细胞、细菌或蛋白质等生物样品，以去除杂质和残留物。此外，PBS还可以用于稀释试剂、制备稀释系列、调整实验条件等。

PBS具有许多优点，例如易于制备和使用，可在室温下稳定保存，无毒无害，对大多数生物样品兼容。由于其广泛的应用领域和可靠性，PBS已成为许多生物实验室中不可或缺的基础试剂之一。无论是细胞培养、蛋白质研究还是分子生物学实验，PBS都是常见且重要的实验工具。

磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 10X 经过配制和制备，可与 Advanced BioMatrix 提供的其他产品（例如 I 型胶原蛋白）结合使用，以形成 3D 水凝胶。

磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 10X 经过配制和制备，可与 Advanced BioMatrix 提供的其他产品（例如 I 型胶原蛋白）结合使用，以形成 3D 水凝胶。 PBS 10X 采用用户友好的包装，便于使用和储存。该产品是无菌的，并作为即用型溶液提供。

艾美捷Advanced BioMatrix-- 磷酸盐缓冲盐水 (PBS)，10X，100 mL(ABM-5076-100ML)：

参数、测试和方法 磷酸盐缓冲盐水 （10X） #5076

形式 溶液

包装尺寸 100毫升

储存温度 室温

灭菌方法 过滤

酸碱度 7.0-7.6

无菌性 - USP 改良 无增长

保质期 自收到之日起至少 6 个月

渗透压 （mOsmo H20/kg） 2300-2700

相关研究：

Nutragen® 溶液，6 mg/ml（牛）#5010

氢氧化钠 （NaOH） 0.1M #5078

盐酸 （HCl） 0.01M #5077

美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者，在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。

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