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Cell Biolabs丨可溶性胶原蛋白定量检测试剂盒解决方案

武汉艾美捷科技有限公司2021年11月25日 15:46 点击:907

胶原蛋白(Collagen)是动物结缔组织的主要组成成分,主要存在于动物皮、骨、肌腱等组织中,发挥支架作用和保护作用。胶原蛋白在心脏中起着重要的结构作用。心脏细胞外基质主要由纤维状胶原组成,可保持心肌完整性,允许心脏力传递,并有助于心肌细胞定向。任何对胶原合成、合成后组装、翻译后修饰和降解的精细平衡调节的中断都可能对心肌功能产生重大影响。此外,胶原蛋白具有多种临床用途。胶原蛋白已广泛用于整容手术,以帮助烧伤患者的愈合过程。胶原蛋白还被用于在牙科、整形外科和其他外科手术中重建骨骼。胶原蛋白被用于骨移植,因为它的三螺旋结构使其成为一个非常强大的分子。同时,胶原也最适合用于骨骼,因为它不会损害骨骼的结构完整性。最后,人类和牛胶原蛋白都被用作皮肤填充剂来治疗皱纹和皮肤老化。

 

胶原蛋白中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量较高,特别是甘氨酸的含量几乎占了1/3,脯氨酸和羟脯氨酸的含量是各种蛋白中含量最高的,其中羟脯氨酸在其他蛋白质中鲜少存在,羟脯氨酸残基可通过形成分子内氢键稳定胶原蛋白分子。三条α-肽链借范德化力、氢键及共价交联则以平行、右手螺旋形式缠绕成“草绳状”三股螺旋结构,使胶原具有很高的拉伸强度胶原蛋白一级结构的特征是含有甘氨酸的三联体(Gly-X-Y)重复排列,其中XY多为脯氨酸和羟脯氨酸,通常由3条多肽链构成三股螺旋结构。

 

艾美捷 Cell Biolabs丨可溶性胶原蛋白定量检测试剂盒,cat#MET-5016,为检测细胞或组织样本中的可溶性胶原蛋白提供了一种方便的比色方法——天狼星红比色测定法,利用天狼星红与胶原蛋白特异性结合的原理,经NaOH洗脱离心后货得红色复合物,在特定波长540-560nm条件下通过测定吸光度确定胶原含量。

 

艾美捷 Cell Biolabs丨可溶性胶原蛋白定量检测试剂盒组分:

1. Collagen Standard(胶原蛋白标准品)

2. Sirius Red Reagent(天狼猩红染料)

3. Extraction Solution(提取液)

4. 10XPBS

 

艾美捷 Cell Biolabs丨可溶性胶原蛋白定量检测试剂盒原理:

可溶性胶原蛋白检测试剂盒为检测细胞或组织样本中的可溶性胶原蛋白提供了一种方便的比色方法。 首先,将未知样品或胶原蛋白标准品添加到 96 孔板中并干燥过夜。 然后,加入天狼星红试剂对胶原蛋白的 [Gly-x-y] 三螺旋结构进行染色。 最后,染色的胶原蛋白用酸性试剂洗涤,用碱性试剂从平板上洗脱,转移到新的 96 孔板中,用平板分光光度计测量。 通过与预定的胶原标准曲线进行比较来确定未知样品中的胶原含量。

 

Cell Biolabs丨可溶性胶原蛋白定量检测试剂盒实验结果


11.png

 

艾美捷科技是Cell Biolabs的中国代理商,为科研工作者提供优质的可溶性胶原蛋白定量检测试剂盒。

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DNA损伤研究丨Cell Biolabs彗星分析试剂盒来助力

 

由于环境因素和细胞内正常的新陈代谢过程,DNA损伤每天以每个细胞1000100万个分子损伤的速度发生。虽然这只占人类基因组约60亿个碱基(30亿个碱基对)的一小部分,但关键基因的未修复损伤可能会阻碍细胞发挥其功能的能力,并显著增加癌症的可能性。

 

彗星实验(Comet assay)也被称为单细胞凝胶电泳实验(Single cell gel electrophoresisSCGE),是一种超灵敏的单细胞水平上检测DNA损伤的技术,可以检测到1.657×10-150.1DNA的断裂,甚至检出自然光照射体外淋巴细胞1h后引起的DNA损伤。在电泳场下,损伤的细胞DNA(包含碎片和链断裂)从完整的DNA中分离出来,在显微镜下形成典型的“彗星尾巴”形状。DNA损伤的程度通常是通过测量彗星尾巴来目测的,也可以使用图像分析软件来测量各种参数。

 

Cell Biolabs【彗星分析应用领域】:主要还是在细胞凋亡的研究,肿瘤/癌症研究,毒理学研究,环境污染监测,临床诊断与治疗监测。

 

接下来,艾美捷 Cell Biolabs会给大家分享一下彗星分析实验(Comet assay)怎么做?

 

第一步:Cell Biolabs彗星分析试剂盒不可少(可根据实验用量,选择不同的规格:)

最常用:Comet Assay Kits, 3-Well (3孔玻片)

高通量筛选:Comet Assay Kits, 96-Well96孔玻片)

 

艾美捷 Cell BiolabsComet Assay kit彗星分析试剂盒内提供了彗星分析所需的所有必需试剂,包括裂解液、彗星分析低熔点凝胶、DNA荧光染料、彗星分析玻片以及其它试剂。

 

第二步:彗星分析电泳模式选择:

电泳模式 检测类型 电泳时间 说明

TBE电泳(中性电泳)——检测单链和双链DNA的断裂——推荐10-15 mins——分析细胞凋亡的shou选方法,可使用尾巴长度而非尾矩进行数据分析。

碱性电泳——检测单链和双链DNA的断裂,AP位点损伤在内的所有DNA 损伤——推荐15-30mins——灵敏度zui高!

 * 实验过程中的各类缓冲液都需要4℃预冷。

 

关于电泳电压:以上2种电泳模式,均推荐参考实验室电泳槽两极间的举例,按照1V/cm的标准设置电压。举例,如果电泳槽两极举例是35cm,那么你需要使用35V的电压来执行电泳。

实验环境:为避免紫外线对细胞样品造成额外损害,请在弱光条件下进行。

 

第三步:彗星分析的典型结果样式

21.png

如上图,左侧是健康的Jurkat细胞(未处理);右侧是使用20 uM Etoposide(依托泊苷)处理4小时的Jurkat细胞。【电泳条件:碱性电泳,15mins

 

第四步:彗星分析结果计算

 

通过测量细胞核遗传物质(“彗头”)与产生的“尾巴”之间的位移,可以量化DNA损伤。 尾矩(Tail Moment)和尾巴DNA%(Tail DNA% )是分析彗星分析结果的两个最常见的参数。 每个样品至少应分析50 -100个细胞。考虑到遗传物质的迁移以及尾巴中DNA的相对数量,通常建议使用尾矩作为评估DNA损伤的指标。

 

Cell Biolabs 配套彗星实验结果分析软件:

软件名称               说明

OpenComet 免费;是Image J软件的一款彗星分析插件

CaspLab CASP 免费;独立软件

Comet Assay IV 付费软件;可试用1

 

艾美捷科技是Cell Biolabs的中国代理商,为科研工作者提供优质的彗星分析试剂盒。

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Echelon Biosciences脂质与蛋白质结合研究神器”——PIP Strips

 

细胞内大分子之间的相互作用是探索生命奥秘的重要基础。蛋白质和蛋白质、多糖以及核酸之间的相互作用已经开展多年,并取得了一系列重要成果,但是蛋白质和脂质相互作用的研究无论在方法学、作用机制以及生物学功能等方面都比较少。脂质作为生物分子的重要组分,除储存。和运输机体代谢所需的能量外,脂质还作为细胞膜的组成部分,参与细胞表面识别和组织免疫等生物学功能。蛋白质和脂质的相互作用异常,往往会导致相关疾病的发生。

 

因此了解两者的相互作用方式、作用程度,完善检测机制,建立高效准确的分析方法就显得格外重要。目前比较主流的前期筛选验证的方法为:蛋白质- 脂质覆盖法 (protein lipid overlay assay, PLO)

 

艾美捷 细胞信号研究中心——脂质与信号通路zhuanEchelon Biosciences丨易用型PIP Strips,脂质与蛋白质相互作用筛选神器!

 

艾美捷 Echelon BiosciencesPIPStripsTM是一种2 x 6 cm的疏水膜,包含8种磷脂和7种其他重要的生物脂类,每个斑点有100 pmol的脂类。通过一个简单的蛋白质-脂质覆盖实验来确定脂质-蛋白质之间的相互作用。这为研究人员提供了一种方便的方法来确定他们感兴趣的蛋白质是否与一种或多个结合的脂质相互作用。

 

艾美捷 Echelon BiosciencesPIP Strips试纸条脂类与斑点分布:

31.png

脂类英文 中文

Lysophosphatidic acid (LPA) 溶血磷脂酸 (LPA)

Lysophosphocholine (LPC) 溶血磷脂酰胆碱(LPC)

Phosphatidylinositol (PtdIns) 磷脂酰肌醇 (PtdIns)

Phosphatidylinositol (3)-phosphate (PtdIns(3)P) 磷脂酰肌醇(3)-磷酸(PtdIns(3)P)

Phosphatidylinositol (4)-phosphate (PtdIns(4)P) 磷脂酰肌醇(4)-磷酸酯(PtdIns(4)P)

Phosphatidylinositol (5)-phosphate (PtdIns(5)P) 磷脂酰肌醇(5)-磷酸酯(PtdIns(5)P)

Phosphatidylethanolamine (PE) 磷脂酰乙醇胺 (PE)

Phosphatidylcholine (PC) 磷脂酰胆碱 (PC)

Sphingosine 1-Phosphate (S1P) 鞘氨醇1-磷酸(S1P

Phosphatidylinositol (3,4)-bisphosphate (PtdIns(3,4)P2 ) 磷脂酰肌醇(3,4-二磷酸酯(PtdIns(3,4)P2 )

Phosphatidylinositol (3,5)-bisphosphate (PtdIns(3,5)P2) 磷脂酰肌醇(3,5-二磷酸(PtdIns(3,5)P2

Phosphatidylinositol (4,5)-bisphosphate (PtdIns(4,5)P2) 磷脂酰肌醇(4,5-二磷酸酯(PtdIns(4,5)P2

Phosphatidylinositol (3,4,5)-trisphosphate (PtdIns(3,4,5)P3) 磷脂酰肌醇(3,4,5-三磷酸酯(PtdIns(3,4,5)P3

Phosphatidic acid (PA) 磷脂酸 (PA)

Phosphatidylserine (PS) 磷脂酰丝氨酸 (PS)

 

以上就是Echelon BiosciencesPIP Strips神器的详细介绍啦~

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Echelon Biosciences中国区授权代理丨艾美捷丨脂质丨多肽丨抗体等

 

Echelon Biosciences, Inc (EBI) 其前身是美国细胞信号研究中心,是由犹他大学的两位教授创立的Echelon研究实验室。他们最初的目标是通过开发新的研究试剂、分析和最终导致衰弱疾病的药物治疗和诊断的技术来推进脂质信号科学。在1997年美国犹他州正式成立Echelon Biosciences公司。Echelon的使命是利用我们在定制合成和检测开发方面的专业知识,只为生物和药物发现研究创造最好的试剂。我们的目标是简化基础研究的过程,让科学家们不断前进,成为为进一步的学术研究和药物开发提供生化试剂、分析和筛选服务的全球领导者。

 

Echelon 提供1200+精品特色产品,集中围绕磷脂,磷脂酰肌醇相关的脂质产品,多肽,抗体,活性/抑制剂筛选分析试剂盒,以及筛选结合的PIP stripLipid Strips/Arrays  ,为研究治疗诸如癌症、糖尿病、炎症、感染和心脑血管疾病专家提供有效工具。

 

产品线分类:

 

脂质相关蛋白与抗体

高品质的合成磷脂,磷酸肌醇,鞘脂及其衍生物,生化试剂

脂质相关生物酶活性检测,抑制剂筛选试剂盒

脂质与蛋白质相互作用工具

脂质含量检测试剂盒

 

作为Echelon Biosciences在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供Echelon Biosciences优质的产品与服务。下图为Echelon Biosciences公司授权艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc.)作为Echelon Biosciences在中国区域的代理授权书:

41.png

艾美捷 Echelon Biosciences 部分畅销产品:

货号            名称                             说明

P-6001        PIP Strips                     结合了8种磷酸肌醇及其它7种重要磷脂。

P-6002        Membrane Lipid Strips 结合了15种重要的细胞膜脂类

P-6100        PIP Arrays    结合了8种磷酸肌醇

P-6003        Membrane lipid Arrays    结合了8种重要的细胞膜脂类

K-2500SPIP3        Mass ELISA Kit    检测细胞样本的PI(3,4,5)P3 (PIP3)含量

K-5400        PI(5)P 4-Kinase (PIP4KII) Activity Assay    该测定可用于定量体外或细胞裂解物中的 PI(5)P 4-激酶

P-BCLP        Cardiolipin Beads    心磷脂Beads由琼脂糖组成,每1ml Beads中含有 10 nmol心磷脂

C-45B6        Biotin Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate    生物素磷脂酰肌醇 4,5-二磷酸是 PI(4,5)P2 (PIP2) 的水溶性类似物,在 sn-1 位置用生物素标记

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Cytoskeleton活细胞微管染色试剂盒研究方案

 

艾美捷 Cytoskeleton 主要覆盖肌动蛋白,微管蛋白,马达蛋白,小G蛋白,细胞外基质,活细胞成像等相关领域,提供对应的蛋白质,抗体,检测与分析试剂盒。此外,还有微管蛋白,肌动蛋白,小G蛋白,GAPsGEFs等现有产品的药物筛选服务。

 

接下来为大家带来的是 Cytoskeleton 微管蛋白tubulin染色工具:

 

微管(Microtubules, MTs)是真核生物细胞骨架的重要组分之一,具有聚合和解聚的动力学特性,其排列方式不断进行活跃的重组,以响应发育和外界环境(包括生物和非生物刺激)信号,比如,在维持细胞形态、细胞分裂、信号转导及物质输送等过程中起着重要作用。生理情况下,细胞的结构、细胞器的定位和功能取决于微管结构的稳定程度。

 

我们在网上可以搜索到F-actin的染色产品,比如鬼笔环肽衍生物系列,但是基本面没有见到过微管的染料,更别提活细胞的微管染料。那接下来就是艾美捷Cytoskeleton的活细胞微管染色试剂盒:

 

名称 Ex/Em 滤光镜 货号

SiR-Tubulin Kit 630 / 680 nm 标准Cy5设置 CY-SC002

SiR700-Tubulin Kit 690 / 720 nm 可以使用Cy5设置。但推荐检测700-800nm的发射光 CY-SC014

* 活细胞微管染色试剂盒均内含Verapamil(维拉帕米,戊脉安),一种广谱的外排泵抑制剂。

 

Cytoskeleton微管蛋白tubulin染色的相关文章和图例:

51.jpg

 

以上,就是有关Cytoskeleton微管蛋白tubulin染色的活细胞微管染色试剂盒介绍啦~

 

艾美捷科技是Cytoskeleton的中国代理商,为科研工作者提供优质的活细胞微管染色试剂盒。

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Lumiprobe你要的Cy我都有

 

经常接触荧光染料的专家们对于Cy系列的染料一定不陌生,本期就给大家介绍一下艾美捷Lumiprobe全系列花青染料,你想要的Cy我全都有,满满的安全感。

 

Cy是花青(Cyanine)的缩写,“花青”(Cyanine)这个名词是来自于聚次甲基组合成染料家族中的,它是一个非系统名称,cyanine一词源自英语单词“ cyan”,通常表示蓝绿色。 花青染料的摩尔消光系数(约150,000300,000 M-1cm-1)非常大,结合适度的量子产率,使它可以产生极其明亮的荧光信号。

 

例如,吸光度和荧光波长可通过选择聚次甲基桥长来控制:更长的花青素具有较高的吸光度和发射波长,直至近红外区域。

 

虽然许多花青类染料已用于生命科学应用中,例如一系列噻唑和恶唑染料已被用作结合DNA和蛋白质的染料(如TOTOYOYOStains All等)。但zui受欢迎的花青染料是在1990年代初期,通过卡内基·梅隆大学的艾伦·瓦格纳(Alan Wagoner)及其同事才应用到生命科学研究中的。花青染料是自1970年代以来用于血管造影的花青染料吲哚菁绿(ICG)的变体。

 

花青染料有两种:非磺化花青和磺化花青。对于绝大多数应用,它们是可互换的,因为它们的光谱特性几乎完全相同。磺化和非磺化染料均可用于标记生物分子,例如DNA和蛋白质。他们之间的主要区别在于它们的溶解度:磺化染料是水溶性的,它们在水性环境中不需要使用有机助溶剂即可进行标记。

 

磺化与非磺化花青标记时的区别:

 

磺化和非磺化花青显示出非常相似的荧光性质,但是应注意标记步骤中的一些差异。

1.非磺化花青必须在使用前溶解在有机溶剂(DMFDMSO)中,并添加到含有目标分子的溶液中。

2.纯化方面也有区别:当使用水或水性缓冲液进行纯化时,必须使用磺基花菁来有效去除未反应的染料。当通过凝胶过滤,色谱法(HPLCFPLC,离子交换层析)或电泳进行纯化时,磺基化和非磺基化的花青都是可以反应的。

 

艾美捷 Lumiprobe丨磺化/非磺化的花青染料及各种活性衍生物,如用于Click化学的NHS酯、马来酰亚胺、azides和其他衍生物。

 

1、磺基Cy3荧光团:

活性基团:NHS酯、马来酰亚胺、叠氮化物、炔烃、羧酸

2、磺基-Cy5荧光团:

活性基团:NHS酯、马来酰亚胺、叠氮化物、炔烃、羧酸

3、磺基-Cy7荧光团:

活性基团:NHS酯、叠氮化物、胺、羧酸

4Cy3荧光团:

活性基团:NHS酯、马来酰亚胺、叠氮、炔烃、酰肼、胺、羧酸

5Cy3.5荧光团:

活性基团:NHS、叠氮化物、羧酸

6Cy5荧光团:

活性基团:NHS酯、马来酰亚胺、叠氮、炔烃、酰肼、胺、羧酸

7Cy5.5荧光团:

活性基团:NHS酯、马来酰亚胺、叠氮、炔烃、酰肼、胺、羧酸

8cy7荧光团:

活性基团:NHS酯、马来酰亚胺、叠氮、炔烃、酰肼、胺、羧酸

9Cy7.5荧光团:

活性基团:NHS酯、马来酰亚胺、叠氮、炔烃、酰肼、胺、羧酸

 

艾美捷科技是Lumiprobe的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。





 


(来源: 武汉艾美捷科技有限公司


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