艾美捷 Atlas Antibodies 抗组蛋白抗体，不一样的研究方案

艾美捷 Atlas Antibodies 抗组蛋白抗体，不一样的研究方案

组蛋白是核内最丰富的蛋白质，它与DNA构成的复合物称为染色质。染色质最基本的亚单位结构是核小体(nucleosome)，它由146个碱基对组成的DNA链缠绕8个组蛋白分子(2个H2A-H2B杂二聚体之间夹着2个杂二聚体H2-H4)2圈构成的核心和核心外的组蛋白H1与连结DNA(约60个碱基对)组成。H1既与核心部分的DNA结合，也与连结DNA结合，后者起连结相邻核小体的作用。5种组蛋白都有各自对应的自身抗体。抗DNA的自身免疫反应与抗组蛋白的自身免疫反应间具有连锁性，抗DNA抗体阳性的患者常同时能检出抗组蛋白抗体，但抗组蛋白抗体阳性并不一定伴有抗DNA抗体。

组蛋白变体具有不同的表观遗传目的，它们的出现可以是组织特异性的，也可以与某些发育阶段有关。例如，变体 H3.3和H2A.Z调节转录，而精子特异性变体TH2B和H2BFWT 有助于在精子发生过程中凝聚DNA。H3变体CENPA改变了包裹在核小体周围的DNA的方向，并存在于着丝粒DNA中。更大的组蛋白H2A变体macroH2A.1和macroH2A.2 富含女性灭活X染色体 (Xi)，这表明在转录沉默中起作用。

艾美捷 Atlas Antibodies 抗组蛋白抗体，基于来自对人类蛋白质图谱的认知，经过仔细的抗原设计和抗体的扩展验证表现。抗组蛋白抗体专门针对组蛋白中低水平或没有翻译后修饰的区域，从而可以很好地显示组织/细胞系中任何组蛋白变体的总量。因此，在进行表观遗传研究时，Atlas Antibodies组蛋白抗体非常适合与靶向特定修饰的抗体结合使用。

A、D：WB结果显示抗体对重组表达的组蛋白的各个亚基的特异性。请注意仅在存在特定组蛋白变体的泳道中存在WB信号，包括H2A (AMAb91335, A)和macroH2A.1 (AMAb91347, D)。

B、C、E、F：用H2A抗体AMAb91335和macroH2A抗体AMAb91347对人体组织进行IHC染色。请注意，这两种抗体在输卵管（B和E）中都显示出强烈的核免疫反应性。

A：macroH2A.1抗体(AMAb91347)的特异性在使用高表达细胞系HEL和低表达细胞PC-3的WB实验中得到验证。 注意HEL细胞裂解物中有正确大小的条带，PC-3 裂解物中没有信号。 右侧显示了各个细胞系的RNA表达水平。

B、C：macroH2A.1抗体AMAb91347对人体组织进行免疫组织化学IHC染色，在女性组织中显示出强烈的核免疫反应性，包括子宫内膜中的腺体和基质细胞（B）以及乳腺癌中的肿瘤细胞（C），与预期结果一致。

艾美捷抗组蛋白抗体研究

————————————————————————————

BioVision羟脯氨酸检测试剂盒和胶原蛋白检测试剂盒

胶原蛋白(Collagen)又称胶原，是由三条肽链拧成的螺旋形纤维状蛋白质。胶原蛋白是动物结缔组织重要的蛋白质，结缔组织除了含60～70%的水分外，胶原蛋白占了约20～30%，因为有高含量的胶原蛋白，结缔组织具有了一定的结构与机械力学性质，如张力强度、拉力、弹力等以达到支撑、保护的功能。

胶原（collagen）是哺乳动物体内含量最多的一类蛋白质，占蛋白质总量的25%~30% ，广泛存在于从低等脊椎动物的体表面到哺乳动物机体的一切组织中。

胶原蛋白的基本结构单位是原胶原(tropocollagen),原胶原肽链的一级结构具有(Gly-x-y)n重复序列, 其中x常为脯氨酸(Pro), y常为羟脯氨酸(Hypro)或羟赖氨酸(Hylys)。Hylys残基可发生糖基化修饰, 其糖单位有的是一个半乳糖残基(Gal), 但通常是二糖(Glu-Gal-),胶原上的糖所占的量约为胶原的10%。在胶原纤维内部，原胶原蛋白分子呈1/4交替平行排列，一个原胶原的头部与下一个原胶的尾部有一个小的间隙分割，这种排列在胶原纤维上形成长度为67nm的周期性横纹。平行排列的分子通过原胶原分子N末端与相邻原胶原分子C末端的赖氨酸或羟赖氨酸间形成共价键加以稳定。

现已发现20个左右的基因分别在不同组织中编码不同类型的胶原; 不同类型的胶原定位于体内的特定组织,也有2-3种不同的胶原存在于同一组织中。

羟脯氨酸（Hydroxyproline，Hyp）是一种非必需氨基酸，是胶原蛋白的主要成分之一，且被普遍认为是胶原中特有的氨基酸，通过质量计算含有12-14%的羟脯氨酸。利用羟脯氨酸在胶原蛋白中含量最高这一特点，通过血液和尿液对羟脯氨酸的测定，可了解体内胶原蛋白分解代谢情况，即可作为结缔组织分解情况指标。很多疾病可伴有胶原代谢变化而引起血、尿及组织羟脯氨酸的含量改变。

一般认为羟脯氨酸测量是对COL量的直接测量。COL是哺乳动物中含量最丰富的蛋白质，某些情况（即肿瘤侵袭/转移、类风湿性关节炎、心肺纤维化）会影响其周转。Hyp和胶原蛋白估算方案基于酸性条件下的Hyp氧化和Ehrlich试剂（高氯酸-PCA）。然而，PCA需要特殊的处理和废物处理协议。

艾美捷 BioVision 羟脯氨酸检测试剂盒（K555和K206）和总胶原蛋白检测试剂盒（K218和K406）使用zhuan利显影液来准确测量组织和蛋白质/肽酶水解物中的Hyp和COL。速度快，在96孔格式中每孔可检测至少0.05 ug羟脯氨酸/0.5 ug胶原蛋白，并生成几乎相同的比色结果。

羟脯氨酸检测试剂盒和总胶原蛋白检测试剂盒的特点：

1、方便：较少的样品制备；快速操作protocols；

2、特异性分析；

3、非放射性、均质分析；

4、经济高效：50/100次分析；兼容高通量筛选；

5、经过验证的：使用哺乳动物组织、生物体液等。

总的来说，艾美捷 BioVision 羟脯氨酸检测试剂盒和总胶原蛋白检测试剂盒还是比较有特色的，不妨了解一下哦~

——————————————————————————————

Biovision胶原蛋白检测试剂盒方案及注意事项

胶原是细胞外基质的重要组分之一，胶原水平的过高或过低都会导致疾病。例如：胶原过多会导致组织纤维化，过少会导致骨关节炎。因此在许多疾病研究中检测胶原水平非常重要。

艾美捷 Biovision总胶原蛋白检测试剂盒（比色法）基于样品中胶原蛋白酸水解产生水解产物和羟脯氨酸，羟脯氨酸被进一步氧化代谢产生有色产物，于560 nm处有吸收峰.

该胶原蛋白检测试剂盒组分：

1、96孔平底透明板

2、多阱分光光度计

3、12 M盐酸（浓盐酸）

4、水解：聚丙烯小瓶（BV类别号M1352）和螺帽

艾美捷 Biovision胶原蛋白检测试剂盒检测方案：

1.样品制备：组织或蛋白质/肽样品：组织样品（即肺）应在ddH2O中均匀化，使用100µl每10 mg组织使用ddH2O。向100µl样品匀浆中添加100µl浓HCl（~12 M，未提供），并将其放入一个压力合适的聚丙烯螺旋小瓶中。在120°C下水解样品3小时（见注释C）。尿液：用等量水水解样品压力密封聚丙烯螺旋盖小瓶中12m浓HCl（即100µl尿液+100µl HCl）的体积。之后均质，通过添加4 mg活性炭，用活性炭澄清样品。以10000 x g的速度旋转并离心3小时至少清除沉淀和活性炭。如果需要，重复上述步骤。将2-30µl各水解样品转移至96孔板中，并通过在热板/干热块或微孔板培养箱上70°C加热板蒸发至干燥。

注意：

A.对于未知样品，建议进行初步试验，以确保读数在标准曲线范围内，并且相应地调整样品水解液的体积（可使用2-30µl水解液）或在必要时稀释水解液。

B对于胶原蛋白浓度极低的样品，建议平行运行两个测试样品井，并加一个使用已知量的I型胶原蛋白标准品（4.0µg），以确保准确测定。

C对于样品水解，带有紧配合螺旋盖（无O形圈）的聚丙烯小瓶产生最佳结果。推荐Biovision的聚丙烯瓶和盖（类别号M1353和M1352）。

图：（a）水解胶原蛋白I标准曲线（0-10µg）。（b） 大鼠组织中总胶原浓度的估算。鼠肾，肝、肺和肌肉样品用ddH2O均质，并在120°C下用12 M HCl水解3小时。沉淀被分离通过离心（10000 x g，持续3分钟）去除。根据试剂盒测定30微升水解样品协议。胶原含量（mg胶原/g湿组织）：肾脏：2.01±0.22；肝脏：0.71±0.32；肺：3.03±0.3；肌肉：3.25±0.98。

——————————————————————

BioVision羟脯氨酸检测试剂盒操作手册

羟脯氨酸（（2S，4R）-4-羟脯氨酸，Hyp）是由脯氨酰-4-羟化酶形成的非蛋白源性氨基酸，其催化蛋白质合成后多肽脯氨酸残基的翻译后修饰。在动物体内发现羟脯氨酸几乎全部由胶原蛋白组成，其中含有约12-14%的羟脯氨酸（纤维蛋白弹性蛋白也含有少量羟脯氨酸含量）。因此，组织水解物中的羟脯氨酸可直接测量胶原蛋白的含量。

胶原蛋白是哺乳动物和许多疾病中最丰富的蛋白质被认为会影响胶原蛋白的转化，包括肿瘤的侵袭和转移转移、类风湿性关节炎、心肺纤维化和肌营养不良。经典的Hyp测定方法是基于将Hyp氧化成吡咯中间体，然后与溶解在浓高氯酸中的埃利希试剂反应（HClO4）。高氯酸是一种有毒和高活性的有害物质，需要特殊处理和废物处理协议。

艾美捷 BioVision羟脯氨酸检测试剂盒（不含高氯酸盐）使用专有的酸性显影液精确测量Hyp不使用有害高氯酸盐的组织和蛋白质/肽酶水解物。这是一个快速方便的协议，产生了颜色鲜艳的发色团，吸收峰为560nm。该检测法可检测到至少0.05µg羟脯氨酸，每孔含0.05µg羟脯氨酸一个96孔的格式，并产生比色结果，几乎是相同的经典高氯酸为基础的方法。

艾美捷 BioVision羟脯氨酸检测试剂盒组分：

氧化缓冲液10毫升WM K226-100-1

氯胺T浓缩液600µl红色K226-100-2

显影液5毫升NM K226-100-3

DMAB浓缩液（DMSO）5 ml琥珀色K226-100-4

羟脯氨酸标准品（1 mg/ml）100µl黄色K226-100-5

微孔板密封膜1膜─ K226-100-6

该羟脯氨酸检测试剂盒相关试剂和设备：

1、基于微板的多壁分光光度计

2、用平底清理96孔板

3、10N氢氧化钠（NaOH）和10N盐酸（HCl）

4、水解用：聚丙烯小瓶（BV类别号M1352）和螺帽（BV类别号M1353）

图：（a）羟脯氨酸标准曲线。（b） 羟脯氨酸标准曲线吸光度值之间的相关性经典的基于高氯酸的分析试剂盒（Cat#K555）和无高氯酸盐分析。这两种检测方法显示出良好的相关性（R）2.> 0.999). 一个平淡的Altman图表明两次分析之间高度一致，平均差异仅为3.06±各方法产生的吸光度值之间的0.33%。（c） 大鼠组织中总羟脯氨酸含量的估算。老鼠腿部肌肉、脾脏、心脏和肺样品用dH2O均质，在120°C下用10N NaOH水解1小时，并用10N盐酸中和。对于每个样品，测定10μl最终中和水解物。羟脯氨酸水平（按μg羟脯氨酸/mg湿组织）的含量：肌肉为1.71±0.09μg/mg，脾脏为0.47±0.07μg/mg，脾脏为0.56±0.10μg/mg心脏为1.56±0.17μg/mg，肺为1.56±0.17μg/mg。数据为3-4个重复的平均值±SEM，根据试剂盒方案进行分析。

——————————————————————————

这款精确度超高的SOD检测试剂盒，你可以看一下

之前我们写过很多超氧化物歧化酶（SOD）相关的基本内容。接下来复盘并且再介绍一下它的科研工具——SOD检测试剂盒。

超氧化物歧化酶（SOD）是一种广泛存在于生物体内的金属酶，作为重要的氧自由基清除剂，能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成H₂O₂和O₂。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶，也是H₂O₂主要生成酶，在生物抗氧化系统中具有重要作用。

黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统能够产生超氧阴离子（O₂⁻），O₂⁻可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜，产物在560 nm处具有特征吸收峰；SOD可清除O₂⁻，从而抑制了甲臜的形成，反应液颜色越深，表明SOD活性愈低，反之活性越高，通过吸光值的变化即可表征SOD的活性。

近期，CiteAb发布了关于2020年全球引用文献最多的100款试剂盒的调查报告，小编想说的是，接下来介绍的这款艾美捷 开曼生物的SOD检测试剂盒，它也在报告内。

该SOD检测试剂盒经过CiteAb quan威验证，被众多研究人员信赖并选择，非常优秀。

来看看艾美捷 开曼生物SOD检测试剂盒的检测原理吧：

这款SOD检测试剂盒使用四氮唑盐检测黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤产生的超氧化物自由基

该SOD检测试剂盒特点如下：

1、样本类型：血清，血浆，红和细胞裂解液，组织匀浆，细胞裂解液，线粒体

2、精确度：组内CV：3.2%，组间CV：3.7%

3、检测范围：0.005-0.05 units/ml（一个unit定义：50%超氧自由基歧化所需的酶量。）

4、检测SOD的类型：可检测所有三种类型SOD（Cu/Zn、Mn和FeSOD）

该SOD检测试剂盒，测试过的干扰物质包括缓冲液、洗涤剂、蛋白酶/螯合剂、DMSO等等，也是十分广泛了。

——————————————————————————————

Cell Biolabss试剂盒原理及优势丨艾美捷方案

自由基与多种人类疾病的发生发展都有着密切的关系。在清除自由基的过程中，抗氧化剂发挥着重要的作用。因此，了解抗氧化剂的作用及能力就变得至关重要。

在评价抗氧化剂能力的诸多方法中，抗氧化能力ORAC（又称，氧自由基吸收能力，Oxygen Radical Absorbance Capacity）分析法，被认定为检测抗氧化剂抗氧化能力的标准方法，是目前普遍被接受的一个标准评价手段。由于该法具有接近机体生理条件、操作简单、认可度和灵敏度高、准确性和重现性佳、高通量、不易受人为因素干扰等优点，被广泛用于农业，食品，保健品，药品及医学领域。

如何分析样本中氧自由基抗氧化能力/氧自由基吸收能力（ORAC）？艾美捷Cell Biolabss：众多文章引用的，氧自由基抗氧化能力（ORAC）活性检测试剂盒，来了。

Cell Biolabss试剂盒原理：

ORAC分析法中的自由基主要来源于偶氮化合物2，2'-偶氮-双-（2-眯基丙烷）氯化二氢（2，2'-azobis（2-amidinopropane）dihydrochloride，AAPH）热分解产生的过氧化氢自由基，也可以是芬顿（Fenton）反应过程中产生的羟自由基，以荧光素钠（Sodium Flourescein，FL）为荧光探针，观察自由基与荧光探针作用后，探针荧光强度的衰退过程，以水溶性维生素E类似物（Trolox）作为抗氧化标准物质，检测体系中各种抗氧化剂延缓探针荧光强度衰退的能力，以此评价抗氧化剂的抗氧化能力。

Cell Biolabss试剂盒实验优势：

1 简单快捷：不到2小时完成实验；

2 样本适用：多样性

3 提供标准品；

Cell Biolabss试剂盒组分：

1. 96-well Microtiter Plate

2. Fluorescein Probe (100X)

3. Free Radical Initiator

4. Antioxidant Standard (Trolox)

5. Assay Diluent (4X)

Cell Biolabss是谁？

Cell Biolabs是zhu名的细胞学试剂品牌，作为最前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供最好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的高端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。

艾美捷科技是Cell Biolabs的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品和服务。