SOD的生物学意义，及相关检测试剂盒

超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）是生物体系中抗氧化酶系的重要组成成员，广泛分布在微生物、植物和动物体内。

分类

按照 SOD 中金属辅基的不同,大致可将 SOD 分为三大类，分别为 Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、 Fe-SOD。

①Cu/Zn-SOD： 呈蓝绿色,主要存在于真核细胞的细胞质内，被认为存在于比较原始的生物类群中且分布最广的一种。

②Mn-SOD：呈粉红色,主要存在于原核生物和真核生物的线粒体中。

③Fe-SOD：呈黄褐色,主要存在于原核细胞中 。它们可以有效地清除超氧阴离子自由基（带有 1 个未成对电子的同时，还带有 1 个负电荷），避免其对细胞过度的损伤，具有抗氧化、抗辐射及抗衰老等功能。

超氧化物歧化酶（SOD）反应机理

SOD 的催化作用是通过金属离子 Mn+1 (氧化态)和 Mn (还原态)的交替电子得失实现的。一般认为 超氧阴离子自由基首先与金属离子形成内界配合物，Mn+1被体内的 超氧阴离子自由基还原为 Mn ，同时生成 O2 ，Mn又被 HO2· 氧化为 Mn+1 ，同时生成 H2O2。而 SOD 又被氧化为初始氧化态的 SOD。最后，H2O2在过氧化氢酶的作用下，被催化分解为水（H2O）和 O2。

超氧化物歧化酶（SOD）测定方法

超氧化物歧化酶活性的主要测定方法有直接法、邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、化学发光法及荧光动力学法等。近年来又建立了多种新方法，如免疫学方法、简易凝胶过滤扩散法、极谱氧电极法、微量测活方法等  。

1.直接法 原理是根据O2.- 或产生O2.- 的物质本身的性质测定O2.-的歧化量，从而确定SOD的活性。经典的直接法包括：脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法（EPR）、核磁共振法。由于所需的仪器设备价格昂贵，一般较少应用。

2.邻苯三酚自氧化法：原理是基于经典的分光光度法，在碱性条件下，邻苯三酚自氧化成红桔酚，用紫外-可见光谱跟踪波长为325nm、420nm或650nm（经典为420nm），同时产生O2.-，SOD催化O2.- 发生歧化反应从而抑制邻苯三酚的自氧化，样品对邻苯三酚自氧化速率的抑制率，可反映样品中的SOD含量。本法具有特异性强，所需样本量少（仅50μl），操作快速简单，重复性好，灵敏度高，试剂简单等优点。

3.细胞色素C还原法：原理是黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系中产生的O2.-使一定量的氧化型细胞色素C还原为还原型细胞色素C，后者在550nm有最大光吸收。在SOD存在时，由于一部分O2.-被SOD催化而歧化，O2.-还原细胞色素C的反应速度则相应减少，即其反应受到抑制。将抑制反应的百分数与SOD浓度作图可得到抑制曲线，由此计算样品中SOD活性。本法是间接法中的经典方法，但本法灵敏度较低。

4.化学发光法：原理是黄嘌呤氧化酶在有氧条件下，催化底物黄嘌呤或次黄嘌呤发生氧化反应生成尿酸，同时产生O2.-。后者可与化学发光剂鲁米诺反应，使其产生激发。SOD能清除O2.-从而抑制鲁米诺的化学发光。本法可应用于SOD的微量测定，不仅灵敏度高，简便易行，而且特异性与准确性至少与细胞色素C还原法类似。

5.免疫学方法：其测定的是SOD活性，免疫学方法则可测定样品中SOD的质量，因此特异性较好，是较理想的测定SOD方法，免疫法有放射免疫法、化学发光免疫分析法、ELISA法等。但其缺陷是只能测定抗体相应的抗原，对于检测不同种类的SOD，则须制备相应的特异性抗体，手续繁琐。

超氧化物歧化酶（SOD）应用领域

1.食品方面

SOD 在蔬菜水果中含量较高，如香蕉、山楂、刺梨、猕猴桃、大蒜等，其他如扇贝、鸡肉等中也有分布。SOD 的活性在果皮中高于果肉，在新鲜水果中高于放置后的水果。并以各种形式被加工成保健品和食品添加剂等作为使用，如添加有 SOD 的牛奶、啤酒、软糖等类型的食品营养强化剂 。

2.日化工业方面

皮肤衰老和损伤是人体衰老的重要特征，而人体衰老是由于活性氧类自由基堆积或清除产生障碍的后果，体内的多余自由基会引起细胞损伤以及色素沉着。由于人的皮肤直接与氧气接触，会造成皮肤的老化和损伤。外源 SOD 的补充有利于延缓皮肤衰老、抗氧化、祛色斑的功用。故国内外许多化妆品厂家都在自身产品中加入了一定比例的 SOD。如法国的雅诗兰黛石榴水、日本的 SKII 神仙水，以及国内大宝 SOD 蜜等。

3.抗炎方面

基于 SOD 是作用于超氧阴离子自由基的专一歧化反应催化剂，故 SOD 作为医药产品，在治疗因自由基作用而导致的炎症、自身免疫性、心脑血管疾病等都有着显著疗效。SOD 可利用其抗氧化作用抑制关节炎、胸膜炎、急性气管炎等炎症类型 。

4.抗肿瘤方面

在人体内SOD可有效的通过清除超氧阴离子自由基最终能达到抑制癌细胞的效果，Mn-SOD表达效果更为突出 。

艾美捷 开曼生物的超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒——经过CiteAb权威验证的，被众多研究人员信赖并选择的一款SOD检测试剂盒（2020年引文数量全球第一）

艾美捷 开曼生物SOD检测试剂盒特点如下：

样本类型：血清，血浆，红和细胞裂解液，组织匀浆，细胞裂解液，线粒体

精确度：组内CV：3.2%，组间CV：3.7%

检测范围：0.005-0.05 units/ml（一个unit定义：50%超氧自由基歧化所需的酶量。）

检测SOD的类型：可检测所有三种类型SOD（Cu/Zn、Mn和FeSOD）

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CUT&Tag PK ChIP-seq 技术

之前，弗雷德哈钦森癌症研究中心的Henikoff博士在Nature Communication公开了CUT&Tag技术的详细结果与实验方案。与以往的ChIP-Seq、pA-MNase等方法相比，CUT&Tag技术方法简便易行，信噪比高，重复性好，需要的细胞数量少至60个细胞，且有望将ChIP-Seq做到单细胞水平。

CUT&Tag技术的基本原理为：

在抗体引导下，ChiTag酶仅在目的组蛋白修饰标志、转录因子或染色质调控蛋白结合染色质的局部进行目的DNA的片段化，同时添加测序接头，并释放到细胞外。由于绝大部分无关的染色质还留在细胞核内，因此整个实验的信噪比大幅提高，同时简化了实验步骤。该方法可一管式高通量应用，并可与单细胞测序平台“无缝”结合。ChiTag酶在打断基因组的同时加上接头，不需要繁琐的补平加A加接头，在一天内可以完成从细胞到测序文库制备全流程。

CUT&Tag和ChIP-seq比较：

艾美捷 CUT&Tag技术科研工具：

EpiGentek的CUT&RUN和CUT&Tag技术。特别是 EpiQuik CUT&RUN M6A RNA富集试剂盒（P-9018）和EpiNext CUT&RUN M6A RNA-Seq试剂盒(P-9016)，可以在最小的非特异性背景水平上，从低输入RNA样本中特异性捕获和富集含有m6A修饰的RNA片段。富集的 RNA 特别适用于快速构建非条形码（单重）和条形码（多重）文库，允许以更小的偏差和高分辨率绘制 m6A 区域。

cat#     名称  时长

P-2028 EpiNext CUT&RUN Fast Kit  <3小时

P-9018 EpiQuik CUT&RUN m6A RNA Enrichment (MeRIP) Kit  <3小时

P-9016 EpiNext CUT&RUN RNA m6A-Seq Kit  <6小时

P-2032 EpiNext cTIP (CUT&Tag In-Place)-Sequencing Kit  <5小时

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胰高糖素样肽-1的生物学意义&GLP-1 ELISA试剂盒

胰高糖素样肽-1（glucagon-like peptide-1，GLP-1）是一种主要由肠道L细胞所产生的激素，属于肠促胰素（incretin） 。

GLP-1生物学特性如何?怎样发挥降糖效应?

研究已证实，肠促胰素以葡萄糖浓度依赖性方式促进胰岛β细胞分泌胰岛素，并减少胰岛α细胞分泌胰高糖素（glucagon），从而降低血糖。正常人在进餐后，肠促胰素开始分泌，进而促进胰岛素分泌，以减少餐后血糖的波动。但对于2型糖尿病患者，其“肠促胰素效应”受损，主要表现为进餐后GLP-1浓度升高幅度较正常人有所减小，因此GLP-1及其类似物可以作为2型糖尿病治疗的一个重要靶点。

以下几方面发挥降糖作用

GLP-1具有葡萄糖浓度依赖性降糖作用 作为一种肠源性激素，GLP-1是在营养物质特别是碳水化合物的刺激下才释放入血的，其促胰岛素分泌作用呈葡萄糖浓度依赖性，Nauck等对10例血糖控制不佳的2型糖尿病患者进行了研究，并在空腹状态下分别给予患者GLP-1或安慰剂，结果显示，患者在输注GLP-1后，其胰岛素和C肽水平显著增加，胰高血糖素水平显著降低，空腹血糖水平在4小时后变为正常。在血糖水平正常后,虽然仍持续输注GLP-1，患者的胰岛素水平却不会再升高，血糖水平也维持稳定，不再进一步下降 [7]  。这说明GLP-1具有葡萄糖浓度依赖性降糖作用，即只有在血糖水平升高的情况下，GLP-1才发挥降糖作用，而在血糖水平正常时，则不会使其进一步降低。GLP-1的这种葡萄糖浓度依赖性降糖特性是其临床应用安全性的基础与保障，从而免除了人们对现有糖尿病治疗药物及方案可能造成患者严重低血糖的担心。

GLP-1具有减轻体重的功效 灿德尔（Zander）等研究显示，在接受GLP-1治疗6周后，参与研究的20例2型糖尿病患者的体重平均减轻了1.9 kg。研究者认为，GLP-1是通过多种途径产生降低体重的作用，包括抑制胃肠道蠕动和胃液分泌，抑制食欲及摄食，延缓胃内容物排空。此外，GLP-1还可作用于中枢神经系统（特别是下丘脑），从而使人体产生饱胀感和食欲下降。

除此之外，GLP-1还具有许多其他生物学特性及功能，例如，GLP-1可能发挥降脂、降压作用，从而对心血管系统产生保护作用；它还可通过作用于中枢增强学习和记忆功能，保护神经。

然而，要将GLP-1应用于临床也面临着问题，那就是人体自身产生的GLP-1极易被体内的二肽基肽酶4（DPP-4）降解，其血浆半衰期不足2分钟，必须持续静脉滴注才能产生疗效，这大大限制了GLP-1的临床应用。

为解决这一难题，学者们已经提出两种方案，一是开发GLP-1类似物，让其既保有GLP-1的功效，又能抵抗降解；二是开发DPP-4抑制剂，使体内自身分泌的GLP-1不被降解。这两方面研究都已经取得了一定的进展。相信随着人们对GLP-1信号系统研究的深入，会发现更多新的作用靶点，从而开发出更多治疗糖尿病的新型药物，以造福糖尿病患者。

在药物研发过程中，对胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的准确监控必不可少，艾美捷 Crystal Chem 胰高血糖素样肽1 ELISA试剂盒，由众多高分文章引用。

【Nature也用的超敏胰高血糖素样肽-1 ELISA试剂盒】Crystal Chem的GLP-1 ELISA试剂盒是一种 ELISA 夹心法。它利用固定在微孔板上的特异性抗体和用HRP酶标记的抗体来实现对GLP-1的特异性检测。

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Crystal Chem 胰高血糖素样肽-1 ELISA 试剂盒功能参数

关于胰高血糖素样肽1的研究，在药物研发过程中，对胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的准确监控必不可少，艾美捷 Crystal Chem 胰高血糖素样肽1 ELISA试剂盒，由众多高分文章引用。

* 仅适用于科研用途.

胰高血糖素样肽-1 ELISA 试剂盒亮点：

1.试剂盒仅需10 ~ 25ul样本即可检测

2.超敏：24 pM ~ 300 pM

3.高特异性，低CV

4.针对人，小鼠，大鼠样本进行针对优化

艾美捷科技是Crystal Chem的中国代理商，为科研工作者提供优质的胰高血糖素样肽-1 ELISA 试剂盒。

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1.2 CLIA试剂盒：将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。通常选择 CLIA 试剂盒来定量复杂样品中的低浓度分析物。MyBioSource可提供1000多种CLIA试剂盒。

1.3 PCR试剂盒：MyBioSource可提供1000多种PCR试剂盒，用于传染病、动物病原体、肿瘤检测、遗传疾病以及监测与器官移植相关的病原体。许多试剂盒符合ISO13485和CE标准，且与大多数品牌的实时PCR检测系统兼容。

2.抗体：单克隆抗体、多克隆抗体、二抗、抗体对、修饰性（例如磷酸化）抗体。

3.蛋白：重组&天然蛋白、多肽、抗原

4.生化试剂：盐类，缓冲盐，核苷酸等

5.基因克隆：cDNA克隆、siRNA

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