Acti-stain 555鬼笔环肽用途

Phalloidin是蘑菇鹅膏菌中的一种七个氨基酸的肽毒素，它与肌动蛋白（F-actin）的聚合形式特异性结合并具有高亲和力（kd20nm）。Phalloidin将肌动蛋白聚合的临界浓度降低到1µg/ml以下，从而起到聚合促进剂的作用。Phalloidin已经用一种专有的红色荧光染料标记，它可以用来染色组织培养细胞和组织切片中的肌动蛋白丝（1，见图1） 以及无细胞制剂。活性染色™ 555阴茎环素标记的肌动蛋白丝保留了未标记肌动蛋白的许多功能特性，包括它们与肌球蛋白相互作用的能力。肌动蛋白染色™ 555 phalloidin以红色固体形式提供。

3T3细胞Rho活化，细胞核用Dapi（蓝色）染色，F-肌动蛋白用Acti染色™ 555（红色F-肌动蛋白，Cat.#PHDH1-A）。

Acti染色的吸光度和荧光扫描™ 将标记的鬼笔苷稀释到甲醇中，分别在300-750和560-750nm之间扫描其吸光度和激发光谱。吸收峰在560nm处，荧光峰在575nm处。

Acti-stain 555鬼笔环肽用途：

1.固定组织切片和组织培养细胞制备中肌动蛋白丝的荧光染色。注：与许多肌动蛋白抗体不同，Acti染色™ 555 phalloidin仅与F-肌动蛋白结合，导致低背景荧光。此外，肌动蛋白染色并没有明显的不同物种。

2.稳定荧光肌动蛋白丝的体外制备。

肌动蛋白染色对确定活细胞和固定细胞骨架的结构和功能非常有用。肌动蛋白细胞骨架在活细胞中是一个非常动态和不稳定的结构，但它可以在探测或染色肌动蛋白结构之前用多聚甲醛固定。

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D-荧光素——多功能生物荧光底物

近几十年来，腺苷三磷酸(ATP)生物发光技术得到了很大的发展，已经在细胞增殖、细胞毒性和生物量计数等方面广泛应用。 在食品卫生领域由于ATP生物发光技术无需培养过程，操作简便、灵敏度高，数分钟内可得到结果，具有其它微生物检测方法无法比拟的优势，是目前检测微生物最快的方法。

荧光素是最受欢迎的多功能生物荧光底物之一。在萤火虫和几种其它甲虫中发现了萤火虫荧光酶/荧光素。通过中间体dioxetanone介导作用，荧光素酶氧化ATP激活的荧光素。萤火虫荧光素酶在ATP的辅助下氧化荧光素产生荧光。

这个反应发生的几秒内在560nm处的化学荧光达到最高峰，当荧光素和ATP都超量存在的条件下，发射光与荧光素酶的活性成比例关系。萤火虫荧光素酶很早以前就用于与抗体结合形成偶联物，作为免疫分析中用荧光素作为底物进行检测的标签。

与HRP和碱性磷酸酶相比，荧光素酶不耐化学修饰。这个酶的一个特殊的优点是，除了高灵敏度外，在哺乳动物组织中内源性荧光素酶的活性很低。

荧光素酶另一个重要的作用是用于卫生监测。荧光素酶/荧光素系统可用于检测污染，因为产生荧光所需的ATP存在于所以活体生物中。这种类型的ATP生物荧光特性足以保证对食品表面的检测，无论是在加工制作工程中设备的污染还是产品的污染都能检出。

D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，尤其是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。