Exonuclease I：特异性去除单链DNA，PCR引物去除的最佳选择
- 翌圣生物科技（上海）股份有限公司2023年8月18日 5:57 点击：376
Exonuclease I：特异性去除单链DNA，PCR引物去除的最佳选择
核酸外切酶I（Exonuclease I）是一种对变性或单链脱氧核糖核酸具有高度选择性的核酸外切酶，作用时，Exonuclease I从单链聚脱氧核糖核苷酸的3 羟基端开始攻击，随后逐步释放出脱氧核糖核苷5 ' -单磷酸盐，但末端二核苷酸会保持完整，对双链DNA或RNA无活性。常用于在Sanger测序或SNP分析之前去除PCR反应中的单链引物、去除巢式PCR中的单链引物、PCR产物酶法纯化、从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA等。
图1. Exonuclease I降解单链DNA示意图 翌圣的Exonuclease I（Cat#14535ES）由分子酶改造平台——ZymeEditor™重组表达而来，可高效消化单链DNA，严格质控，无核酸外切酶（双链）、核酸内切酶、RNase残留，80℃处理即可失活，适用于各种PCR反应后引物的去除及从核酸混合物中去除含有3'羟基末端的单链DNA。 20 μL反应体系中加入终浓度为15 pmol/μL的单链DNA底物，分别使用不同投入量（0.63、1.25、2.5、5、10、20 U）的翌圣及进口品牌N*的Exonuclease I在37℃下孵育15 min，80℃热失活15 min，聚丙烯酰胺凝胶电泳检测单链DNA降解情况。结果显示翌圣的Exonuclease I消化单链DNA的能力与进口品牌N*一致。 图2. 翌圣及进口品牌N*对单链DNA的消化能力 将500 ng底物DNA与100 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测DNA条带不发生变化，表明Exonuclease I无核酸内切酶残留。 图3. 核酸内切酶残留检测 将底物RNA与20 U的Exonuclease I在37℃下孵育4 h，琼脂糖凝胶电泳检测RNA条带不发生变化，表明Exonuclease I无RNase残留。 图4. RNase残留检测 定位 产品名称 产品货号 PCR产物纯化（核酸外切酶I+碱性磷酸酶） Exonuclease I (20 U/μL) 14535ES Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) 10322ES 高保真PCR预混液 2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) 10164ES 琼脂糖 Agarose 10208ES 核酸染料 YeaRed Nucleic Acid Gel Stain(10,000× in Water) 10202ES DNA Marker GoldBand系列marker 10501ES-10518ES 
联系邮箱：kefu@labbase.net
版权与免责声明
- 凡本网注明“来源：来宝网”的所有作品，版权均属于来宝网，转载请必须注明来宝网， //www.next-search.com，违反者本网将追究相关法律责任。
- 本网转载并注明自其它来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。
