精品推荐 | 仅需5min!高效完成反转录实验
- 翌圣生物科技(上海)股份有限公司2023年8月8日 5:24 点击:374
精品推荐 | 仅需5min!高效完成反转录实验
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit是基于Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit开发的快速逆转录试剂盒,适用于PCR扩增以及RT-qPCR实验。与Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit相比,具有稳定的检出率、特异性、产量保证,且反转录总时长最快可低于6分钟,大大缩短了实验时间。
Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit ※快速反转:最快5分钟左右即可完成第一链cDNA合成; ※检出率高:10 pg-1 ug的RNA检出率; ※高效合成:合成效率媲美进口,最长可合成14kb大小的片段; ※应用广泛:可用于下游PCR或qPCR,亦可调整引物保证small RNA等样本的反转录; ※示踪便利:示踪版包含无干扰、可视化蓝色示踪染料,提醒加样进度; ※稳定性好:试剂盒可4℃存放14天,反转产物可37℃保存7天,反复冻融50次。 图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行逆转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,不同反转录时间处理的Ct值差值在0.2之内。说明产品可在5分钟内完成反转录,反转效果和长时间反转效果持平。 图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行逆转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,RNA 投入量为10 pg-1 μg时,11149ES均可反转成功,保证定量结果。 图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行反转录,将得到的cDNA进行PCR检测。结果显示,11149ES能够满足合成1 kb-14 kb长度的cDNA, 后续PCR有一定的试用场景。若需要直接反转出10kb以上的片段,建议延长反转录时间至20-30分钟,以保证最终片段的获取。 图. 测试显示,加入一定量的示踪剂成分,未影响产品的反转录效率,Ct值、熔解曲线峰值和TM值未受到负面影响。 图. 以293T细胞总RNA为模板,使用-20℃、4℃、25℃、37℃下分别储存1、3、5、7天的11149ES进行逆转录,对得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,不同温度不同时间存放的试剂盒定量结果的△Ct均在0.3范围内(△Ct于±0.5以内,认为两者差异可忽略不计),具有良好的稳定性。 图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES、进口A品牌进行逆转录,其中11149ES不进行gDNA去除步骤,将得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,进口A品牌反转时间为13分钟, 11149ES反转时间为5分钟,不同产物定量显示,11149ES的Ct更小或者接近进口竞品,说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口A品牌的反转录效率。 图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES、进口B品牌进行逆转录,其中11149ES不进行gDNA去除步骤,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,进口B品牌反转时间为20分钟,11149ES反转时间为5分钟,不同量底物定量显示,11149ES的Ct更小或者接近进口B品牌,说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口B品牌的反转录效率。 样本来源:菊花叶片 客户评价:与某进口品牌效果相似,扩增常规大小的片段效果不错。 样本来源:果*叶片 客户评价:蓝色很好看 样本来源:水稻 客户评价:与其他反转录试剂盒相比,节省加样时间,节省反转录反应时间(其他试剂盒需要15+2 min,本试剂盒只需5 min),后续基因克隆DNA电泳结果证明,本试剂盒反转效率更高,条带更亮,所以会更节省PCR使用试剂,节省成本。 方法 分类 产品名称 货号 qPCR染料法 高灵敏通用型定量预混液(染料法) Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix 11184ES 超高性价比定量预混液 (染料法),已发文章累计IF达到5000+ Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) 11201ES Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) 11202ES Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) 11203ES 高灵敏型qPCR预混液(染料法) Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) 11198ES Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox) 11199ES Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox) 11200ES miRNA qPCR加A法 Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(加A法) 11171ES miRNA qPCR茎环法 Hieff® miRNA Universal qPCR SYBR Master Mix(茎环法) 11170ES RNA一步法RT-qPCR(染料法) Hifair® III One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 11143ES 细胞直接RT-qPCR(染料法) Hieff® Fast Cell Direct SYBR Green RT-qPCR Kit 11172ES 反转录试剂 5 min快速反转,最长可满足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游应用PCR/qPCR)New Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit 11149ES Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit(No Dye) 11150ES 15 min一步完成gDNA去除与反转录(下游应用qPCR) Hifair® V one-step RT-gDNA digestion SuperMix for qPCR 11142ES 高质量第一链cDNA合成预混液,含gDNA去除(下游应用qPCR)Hot Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) 11141ES 最长可满足19.8 kb cDNA合成试剂盒,含gDNA去除(下游应用PCR/qPCR) Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus) 11139ES 常规30 min反转预混液,含gDNA去除(下游应用qPCR) Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) 11123ES miRNA反转录试剂盒(加A法) Hifair® miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (加A法) 11148ES
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