组织培养的基本条件

1 无菌及灭菌 
由于要维持细胞在体外长时间生长、繁殖，所以在培养过程中的全部用具及操作过程必须保证无菌，一旦有细菌污染细胞则不能继续存活。因此所用器具应首先进行严格清洗，然后再进行高压灭菌或干烤灭菌。对不能用高压或干烤灭菌的液体可用除菌滤器除菌。过去的操作环境一般在无菌室(密封，使用前用紫外线杀菌)进行。近年多应用国产洁净工作台(借助空气过滤及高速吹风除
菌)进行操作。亦可二者结合应用。 
2 培养基(medium) 
人工培养基的成分主要含有各种氨基酸，维生素，糖和无机盐等，并使其有与体液相等的渗透压，同时加入适量的碳酸氢钠，以调节其酸碱度，使pH维持在7.2—7.6左右。目前常用的人工培养基种类很多，如：“199”、“RPMI1640”、伊格(Eagle)、费歇(Fischer)等等。它们之间的区别主要在含有氨基酸、维生素等的数量和种类上有所不同。在应用时可根据所培养的细胞类型及自己的经验而选择。但是，目前无论使用哪种培养基一般都要加入5—20％的动物血清，Z常用者为初生的小牛血清，其次，马血清、人血清等亦有应用。由于对血清的成分还不完全清楚，所以它对培养细胞的作用机理也还不十分了解。近来对无血清培养亦有文献报道，但这一问题尚在研究之中。当然，理想的人工培养基Z好完全模拟体内环境，不过目前尚未达到。 
3 培养瓶和培养皿 
液体培养常用长方形培养瓶，有100ml，30ml， 15ml不等，此外还有扁圆形的卡氏瓶以及适用于微量培养的多孔微量培养板等。在二氧化碳培养箱中进行开放培养时多用培养皿，同时它也被用于半固体培养。国内所用培养瓶(皿)均采用优质中性玻璃制成，便于洗涮及反复应用。但国外现已普遍采用塑料制品。 
4 温度及二氧化碳 
用培养瓶进行培养，一般放于37℃恒温箱中即可，目前国外已普遍将细胞接种于培养皿内，在含5—10％的二氧化碳的空气环境中进行培养。一定量的二氧化碳有利于酸碱度的维持及细胞生长。二氧化碳培养需要放在二氧化碳培养箱中。二氧化碳培养箱，它除可维持37℃恒温之外，还可维持一定的二氧化碳浓度，虽然近年来国内已有产品，但价格仍较昂贵，不易推广使用。用真空干燥器充以含5—10％二氧化碳的空气来代替二氧化碳培养箱可以达到同样目的，这种方法目前已为国内许多实验室所采用。